Question

【題目】癌胚抗原（CEA）是某些癌細(xì)胞表面產(chǎn)生的一種糖蛋白，臨床上通過制備CEA的單克隆抗體來診斷癌癥。回答下列問題。

(1)一般不直接用單個(gè)的B淋巴細(xì)胞培養(yǎng)形成細(xì)胞群的辦法來生產(chǎn)單克隆抗體。原因是____________。

(2)制備CEA的單克隆抗體時(shí)，給小鼠注射的CEA相當(dāng)于_______，能使小鼠產(chǎn)生免疫反應(yīng)。

(3)雜交瘤細(xì)胞的擴(kuò)大培養(yǎng)，既可在體外培養(yǎng)，也可注射到小鼠_______內(nèi)培養(yǎng)。體內(nèi)培養(yǎng)與體外培養(yǎng)相比，其優(yōu)點(diǎn)是____________________________________________________。

(4)已知小鼠正常細(xì)胞中合成DNA有D和S兩種途徑，其中D途徑能被氨基嘌呤阻斷。而小鼠骨髓瘤細(xì)胞中沒有S途徑，只有D途徑。將B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞在試管中混合，加聚乙二醇促融，獲得融合細(xì)胞（一般只考慮細(xì)胞兩兩融合），經(jīng)過多次篩選后生產(chǎn)單克隆抗體。請回答：

①試管中除融合的雜種細(xì)胞外，還有______種融合細(xì)胞。

②某同學(xué)設(shè)計(jì)了一種方法，嘗試從培養(yǎng)液中分離出雜種細(xì)胞。

方法：用______________的培養(yǎng)液培養(yǎng)融合細(xì)胞，收集能增殖的細(xì)胞。

原理：_______________________

Answer 1

【答案】B淋巴細(xì)胞不能無限增殖 抗原 腹腔/腹水 無需提供營養(yǎng)豐富的細(xì)胞培養(yǎng)液以及嚴(yán)格的無菌環(huán)境，操作簡便 2 添加氨基嘌呤 B淋巴細(xì)胞兩兩融合的細(xì)胞不能分裂增殖。在添加氨基嘌呤的培養(yǎng)液中，DNA合成的D途徑被阻斷，僅有D合成途徑的骨髓瘤細(xì)胞兩兩融合的細(xì)胞不能增殖；淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合的雜種細(xì)胞可以利用淋巴細(xì)胞中的S途徑合成DNA而增殖

【解析】

單克隆抗體制備流程：先給小鼠注射特定抗原，使之發(fā)生免疫反應(yīng)，之后從小鼠脾臟中獲取已經(jīng)免疫的B淋巴細(xì)胞；誘導(dǎo)B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合，利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞，進(jìn)行抗體檢測，篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞，進(jìn)行克隆化培養(yǎng)，即用培養(yǎng)基培養(yǎng)和注入小鼠腹腔中培養(yǎng)，最后從培養(yǎng)液或小鼠腹水中獲取單克隆抗體。

(1)因?yàn)锽淋巴細(xì)胞不能無限增殖，因此一般不直接用單個(gè)的B淋巴細(xì)胞培養(yǎng)成細(xì)胞群。

(2)根據(jù)題意可知，制備CEA的單克隆抗體時(shí)，給小鼠注射的CEA相當(dāng)于抗原，能使小鼠產(chǎn)生免疫反應(yīng)。

(3)雜交瘤細(xì)胞的擴(kuò)大培養(yǎng)，既可在體外培養(yǎng)，也可體內(nèi)培養(yǎng)，即注射到小鼠腹腔內(nèi)培養(yǎng)。體內(nèi)培養(yǎng)與體外培養(yǎng)相比，其優(yōu)點(diǎn)是無需提供營養(yǎng)物質(zhì)以及無菌環(huán)境，操作簡單。

(4)①骨髓瘤細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞兩兩融合形成3種融合細(xì)胞，即B淋巴細(xì)胞自身融合的細(xì)胞、骨髓瘤細(xì)胞自身融合的細(xì)胞、雜交瘤細(xì)胞。因此，試管中除融合的雜種細(xì)胞外，還有2種融合細(xì)胞。

②從培養(yǎng)液中分離出雜種細(xì)胞，分析回答：

方法：在培養(yǎng)液中加入氨基蝶呤，再收集增殖的細(xì)胞。

原理：B淋巴細(xì)胞兩兩融合的細(xì)胞不能分裂增殖。在添加氨基嘌呤的培養(yǎng)液中，DNA合成的D途徑被阻斷，僅有D合成途徑的骨髓瘤細(xì)胞兩兩融合的細(xì)胞不能增殖；淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合的雜種細(xì)胞可以利用淋巴細(xì)胞中的S途徑合成DNA而增殖。