（10分）人工構建的大腸桿菌質粒pBR322是基因工程中應用最廣泛的載體（見圖1）。除標注外，圖中其他英文縮寫表示該質粒上不同的限制性核酸內切酶的切割位點。請分析回答：

（1）此質粒的化學本質是           ，它可以作為多種目的基因的（運）載體，原因是           。ampr和tetr在基因工程中的主要作用是             。

（2）人胰島素由兩條肽鏈共有51個氨基酸組成，如圖2所示。

 

①通過基因工程培育能合成人胰島素的工程菌時，可先依據(jù)             推出

            序列，再推出           序列，然后用化學方法人工合成A鏈和B鏈基因的片段。將此基因片段分別與             重組后，再導入大腸桿菌內。

② 在大腸桿菌內合成的單獨的A、B兩條多肽鏈沒有生物活性，是因為細菌中缺少            ，不能             。若要直接獲得有活性的轉基因人胰島素，可以選擇              作為受體細胞。

 

【答案】

 

（1）DNA （核酸不給分，大腸桿菌的質粒只是DNA）      

含有多種限制性核酸內切酶的酶切位點 （外加載體的其它條件不錯給分，錯不給分）

（2）① 氨基酸的排列順序（A鏈、B鏈的一級結構給分）  

　　　　信使RNA的堿基（核糖核苷酸的排列序列給分）    

DNA（基因、）的堿基（脫氧核糖核苷酸給分）      

不同質粒（２個質粒）

② 內質網(wǎng)、高爾基體等細胞器（答出任何一個內容均可得分，只答線粒體不給

　　分，但如果與內質網(wǎng)、高爾基體任何一個細胞器給分）   

對多肽鏈進行加工（添加形成二硫鍵；形成空間結構不給分，因大腸桿菌也　

形成空間結夠）       

真核細胞（酵母菌）（人的瘤細胞給分）

【解析】略

 

練習冊系列答案
相關習題

科目：高中生物 來源：2012屆北京市西城區(qū)高三上學期期末考試生物試卷 題型：綜合題

（10分）人工構建的大腸桿菌質粒pBR322是基因工程中應用最廣泛的載體（見圖1）。除標注外，圖中其他英文縮寫表示該質粒上不同的限制性核酸內切酶的切割位點。請分析回答：

（1）此質粒的化學本質是          ，它可以作為多種目的基因的（運）載體，原因是          。ampr和tetr在基因工程中的主要作用是            。
（2）人胰島素由兩條肽鏈共有51個氨基酸組成，如圖2所示。

①通過基因工程培育能合成人胰島素的工程菌時，可先依據(jù)            推出
           序列，再推出          序列，然后用化學方法人工合成A鏈和B鏈基因的片段。將此基因片段分別與            重組后，再導入大腸桿菌內。
② 在大腸桿菌內合成的單獨的A、B兩條多肽鏈沒有生物活性，是因為細菌中缺少           ，不能            。若要直接獲得有活性的轉基因人胰島素，可以選擇             作為受體細胞。

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科目：高中生物 來源：2013年上海市普陀區(qū)高三高考二模生物試卷 題型：綜合題

研究人員利用基因工程技術對肺癌的治療進行了大量研究，肺部細胞中的let-7基因表達減弱，癌基因RAS表達增強，會引發(fā)肺癌。研究人員利用基因工程技術將let-7基因導入肺癌細胞實現(xiàn)表達，發(fā)現(xiàn)肺癌細胞的增殖受到抑制。該基因工程技術基本流程如圖所示，據(jù)圖回答

1.在基因工程中通常選擇細菌質粒作為載體，原因是                          ；如果某質粒由100 0個脫氧核苷酸組成，脫氧核苷酸平均分子量為a,則該質粒的質量為        。

2.圖甲中在構建重組載體時，酶切目的基因和酶切質粒時，所用的限制酶可以不同，但是產生的粘性末端必須是                。

3.圖甲中在將酶切后的目的基因導入到酶切后的質粒上時需要的酶是              ， 圖乙中l(wèi)et-7基因轉錄過程需要的酶是    ，這 兩種酶作用的化學鍵都是          。

4.EcoR I限制酶只能識別序列一GAATTC一，并只能在G與A之間切割。若在某目的基因的兩側各有1個EcoR I的切點，請畫出目的基因兩側被限制酶EcoR I切割后所形成的黏性末端。                      

5.原代培養(yǎng)是是指直接從機體取下細胞、組織和器官后立即進行培養(yǎng)。原代培養(yǎng)隨著培養(yǎng)時間的延長和細胞不斷分裂，空間因素和營養(yǎng)因素會限制其進一步生長。此時就需要將培養(yǎng)物分割成小的部分（組織細胞分散開），重新接種到另外的培養(yǎng)器皿內再進行培養(yǎng)，這個過程就稱為傳代或者再培養(yǎng)。圖甲中進行傳代培養(yǎng)操作時，需要用　　 　　酶處理貼附在原代培養(yǎng)培養(yǎng)皿壁上的細胞，以利于傳代培養(yǎng)。

6.研究發(fā)現(xiàn)，let-7基因能影響RAS基因的表達，其影響機理如圖乙所示。從分子水平的角度分析，其作用機理是　　                               　    　。

7.下圖所示pBR322是目前常用的人工質粒載體。如果將BamHI處理后的pBR322質粒與用BgIⅡ處理得到的目的基因進行重組，并將重組質粒導入原本無ampR和tetR  的大腸桿菌進行培養(yǎng)。為了檢測重組質粒是否成功導入大腸桿菌，現(xiàn)將上述大腸桿菌在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基上培養(yǎng)，得到如圖二的菌落。再將滅菌絨布按到培養(yǎng)基上，使絨布面沾上菌落，然后將絨布按到含四環(huán)素的培養(yǎng)基上培養(yǎng)，得到如圖三的結果(空圈表示與圖二對照無菌落的位置)。與圖三空圈相對應的圖二中的菌落表現(xiàn)型是___       _____ ，圖三結果顯示，多數(shù)大腸桿菌內導入的是___            __。

 

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科目：高中生物 來源：2013屆海南省高二下學期期中考試生物試卷（解析版） 題型：綜合題

目前所用的質粒載體主要是以天然細菌質粒的各種元件為基礎重新組建的人工質粒，pBR322質粒是較早構建的質粒載體，其主要結構如圖所示。

 

(1)構建人工質粒時要有抗性基因，以便于                               。

(2)pBR322分子中有單個EcoR I限制酶作用位點，EcoR 1只能識別序列一GAATTC一，并只能在G與A之間切割。若在某目的基因的兩側各有1個EcoR I的切點，請畫出目的基因兩側被限制酶EcoR I切割后所形成的黏性末端。

                                                                      

(3)pBR322分子中另有單個的BamHI限制酶作用位點，現(xiàn)將經BamHI處理后的質粒與用另一種限制酶BgIⅡ處理得到的目的基因，通過DNA連接酶作用恢復___     ___ 鍵，成功的獲得了重組質粒。

 (4)為了檢測上述重組質粒是否導入原本無ampR和tetR的大腸桿菌，將大腸桿菌在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基上培養(yǎng)，得到如圖二的菌落。再將滅菌絨布按到培養(yǎng)基上，使絨布面沾上菌落，然后將絨布按到含四環(huán)素的培養(yǎng)基上培養(yǎng)，得到如圖三的結果(空圈表示與圖二對照無菌落的位置)。與圖三空圈相對應的圖二中的菌落表現(xiàn)型是___       _____ ，圖三結果顯示，多數(shù)大腸桿菌導入的是___            __。

 

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科目：高中生物 來源： 題型：

人工構建的大腸桿菌質粒pBR322是基因工程中應用最廣泛的載體（見圖1）。除標注外，圖中其他英文縮寫表示該質粒上不同的限制性核酸內切酶的切割位點。請分析回答：













（1）此質粒的化學本質是　　　　　 ，它可以作為多種目的基因的（運）載體，原因是　　　　　 。ampr和tetr在基因工程中的主要作用是　　　　　　 。

（2）人胰島素由兩條肽鏈共有51個氨基酸組成，如圖2所示。


①通過基因工程培育能合成人胰島素的工程菌時，可先依據(jù)　　　　　　 推出

　　　　　 序列，再推出　　　　　 序列，然后用化學方法人工合成A鏈和B鏈基因的片段。將此基因片段分別與　　　　　　 重組后，再導入大腸桿菌內。

② 在大腸桿菌內合成的單獨的A、B兩條多肽鏈沒有生物活性，是因為細菌中缺少　　　　　 ，不能　　　　　　 。若要直接獲得有活性的轉基因人胰島素，可以選擇　　　　　　 作為受體細胞。

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