Question

13．海棲熱袍菌生活在55～90℃的海底火山口處水域，其產(chǎn)生的乳酸脫氫酶（LDH）具有極強(qiáng)耐熱性．研究人員利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)該酶以用于工業(yè)制備NAD⁺（一種輔酶），基本技術(shù)流程如圖．請回答：

（1）過程①中，應(yīng)提取海棲熱袍菌的基因組DNA作模板；同時根據(jù)LDH（或目的）基因的核苷酸序列合成引物．
（2）進(jìn)行過程③前，利用Ca²⁺（或CaCl₂）處理大腸桿菌，使其成為感受態(tài)細(xì)胞．
（3）過程④中，應(yīng)將大腸桿菌置于42℃條件下誘導(dǎo)培養(yǎng)；然后提取大腸桿菌的蛋白質(zhì)進(jìn)行檢測，以鑒定目的基因是否成功表達(dá)．

Answer 1

分析 據(jù)圖分析，①過程表示獲取目的基因，②過程表示基因表達(dá)載體的構(gòu)建，③表示從囊胚中分離出胚胎干細(xì)胞，④表示細(xì)胞的增殖分化．

解答 解：（1）過程①是利用PCR技術(shù)獲取目的基因的過程，應(yīng)提取海棲熱袍菌的基因組DNA作模板；同時根據(jù)LDH（或目的）基因的核苷酸序列合成引物．
（2）將目的基因?qū)�入大腸桿菌的轉(zhuǎn)化方法是：先用 Ca²⁺處理細(xì)胞，使其成為感受態(tài)細(xì)胞，再將重組表達(dá)載體DNA分子溶于緩沖液中與感受態(tài)細(xì)胞混合，在一定的溫度下促進(jìn)感受態(tài)細(xì)胞吸收DNA分子，完成轉(zhuǎn)化過程．
（3）圖示大腸桿菌42℃條件下啟動子活性完全激發(fā)，所以應(yīng)該在此溫度下進(jìn)行培養(yǎng)．目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)，方法是從轉(zhuǎn)基因生物中提取蛋白質(zhì)，用相應(yīng)的抗體進(jìn)行抗原-抗體雜交．
故答案為：
（1）海棲熱袍菌       LDH（或目的）
（2）Ca²⁺（或CaCl₂）
（3）42        蛋白質(zhì)

點評 本題考查基因工程技術(shù)等相關(guān)知識，意在考查學(xué)生的識圖、分析能力和解決問題的能力，難度不大．