Question

【題目】近期，5只生物鐘紊亂的體細(xì)胞克隆猴登上中國(guó)綜合英文期刊《國(guó)家科學(xué)評(píng)論》封面，標(biāo)志著中國(guó)體細(xì)胞克隆技術(shù)走向成熟。下圖為克隆猴的步驟，請(qǐng)回答下列問(wèn)題：

（1）在各級(jí)神經(jīng)中樞中，與猴子生物節(jié)律控制有關(guān)的中樞位于________________。除了腦部主生物鐘外，在肝臟、胰臟等器官中還存在局部生物鐘，敲除猴子肝臟細(xì)胞中的生物鐘基因后，出現(xiàn)低血糖癥狀，其原因可能是______________________________________________。

（2）核移植前需將A猴卵母細(xì)胞培養(yǎng)至_________________期，并進(jìn)行去核操作，其目的是__________________________________________。從細(xì)胞水平分析，與取B猴體細(xì)胞的細(xì)胞核進(jìn)行移植相比，直接將B猴體細(xì)胞注人去核A猴卵母細(xì)胞的優(yōu)勢(shì)是________________________。

（3）重組細(xì)胞進(jìn)行體外培養(yǎng)，需要?dú)怏w環(huán)境和無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境，其中前者需要的氣體主要是_____________；后者的具體操作有_______________________________(答三點(diǎn))。

Answer 1

【答案】下丘腦 肝臟細(xì)胞中的肝糖原分解產(chǎn)生葡萄糖并進(jìn)入血液中，受生物鐘基因調(diào)控 減數(shù)第二次分裂中 保證克隆猴的遺傳物質(zhì)主要來(lái)自B猴 避免取核過(guò)程對(duì)核造成損傷 O2和CO2 對(duì)培養(yǎng)皿和所有培養(yǎng)用具進(jìn)行無(wú)菌處理；在培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素；定期更換培養(yǎng)液

【解析】

動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)需要滿足以下條件

（1）充足的營(yíng)養(yǎng)供給--微量元素、無(wú)機(jī)鹽、糖類、氨基酸、促生長(zhǎng)因子、血清等。

（2）適宜的溫度：36.5℃±0.5℃；適宜的pH：7.2～7.4。

（3）無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境：培養(yǎng)液應(yīng)進(jìn)行無(wú)菌處理。通常還要在培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素，以防培養(yǎng)過(guò)程中的污染。此外，應(yīng)定期更換培養(yǎng)液，防止代謝產(chǎn)物積累對(duì)細(xì)胞自身造成危害。

（4）氣體環(huán)境：95%空氣+5%CO2。O2是細(xì)胞代謝所必需的，CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH。

（1）與生物節(jié)律控制有關(guān)的中樞位于下丘腦。除了腦部主生物鐘外，在肝臟、胰臟等器官中還存在局部生物鐘，敲除猴子肝臟細(xì)胞中的生物鐘基因后，出現(xiàn)低血糖癥狀，其原因可能是肝臟細(xì)胞中的肝糖原分解產(chǎn)生葡萄糖并進(jìn)入血液中，受生物鐘基因調(diào)控。

（2）核移植前需將A猴卵母細(xì)胞培養(yǎng)至減數(shù)第二次分裂中期，并進(jìn)行去核操作，其目的是保證克隆猴的遺傳物質(zhì)主要來(lái)自B猴。從細(xì)胞水平分析，與取B猴體細(xì)胞的細(xì)胞核進(jìn)行移植相比，直接將B猴體細(xì)胞注人去核A猴卵母細(xì)胞可以避免取核過(guò)程對(duì)核造成損傷。

（3）重組細(xì)胞進(jìn)行體外培養(yǎng)，需要的氣體環(huán)境主要是O2和CO2；保證無(wú)菌無(wú)毒環(huán)境的具體操作有對(duì)培養(yǎng)皿和所有培養(yǎng)用具進(jìn)行無(wú)菌處理；在培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素；定期更換培養(yǎng)液。