Question

5．自1964年印度科學(xué)家培養(yǎng)曼陀羅花藥獲得單倍體植株后，花藥離體培養(yǎng)技術(shù)發(fā)展迅速，據(jù)記載，現(xiàn)在已經(jīng)有
250多種高等植物的花藥培養(yǎng)成功．
（1）組培中，常采用MS固體培養(yǎng)基，主要包括的成分有水、大量元素、微量元素、有機(jī)物，還需要添加植物激素．
（2）細(xì)胞分裂素和生長素的使用順序和用量會影響到植物細(xì)胞的發(fā)育方向．如，為了有利于細(xì)胞分裂而不分化，兩種激素的使用順序?yàn)椋合壬�長素，后細(xì)胞分裂素．花粉植株產(chǎn)生的途徑有兩種：一種是花粉脫分化形成愈傷組織，另一種是形成胚狀體．
（3）進(jìn)行月季花藥離體培養(yǎng)一般選擇在五月初到五月中旬．對于花粉而言，要采用單核期的花粉，為了鑒定該時期的花粉，常采用醋酸洋紅法進(jìn)行染色鑒定．若是某些植物花粉細(xì)胞不易著色，常采用焙花青鉻礬法法染色，能將花粉的細(xì)胞核染成藍(lán)黑色．
（4）消毒后的花蕾，在無菌條件下除去萼片與花瓣，剝離花藥時，盡量不要損傷花藥，同時要將花絲 徹底去除．

Answer 1

分析 1、組織培養(yǎng)常用的MS培養(yǎng)基含大量元素、微量元素、有機(jī)物，有機(jī)物包括甘氨酸、維生素B₁、維生素B₆、煙酸、肌醇、蔗糖、瓊脂等，還需要添加植物生長素、細(xì)胞分裂素等植物生長調(diào)節(jié)物質(zhì)，微生物培養(yǎng)基不含有植物激素．MS培養(yǎng)基含氨基酸，如甘氨酸，含碳源，如蔗糖，含維生素B₁和維生素B₆
2、細(xì)胞分裂素和生長素的使用順序不同，培養(yǎng)的結(jié)果不同．先使用生長素，再使用細(xì)胞分裂素，有利于細(xì)胞分裂，但細(xì)胞不分化；先使用細(xì)胞分裂素，后使用生長素，細(xì)胞既分裂又分化；兩者同時使用，細(xì)胞分化頻率提高．
2、在植物組織培養(yǎng)時，通過調(diào)節(jié)生長素和細(xì)胞分裂素的比值能影響愈傷組織分化出根或芽．因此從愈傷組織形成完整植株的途徑有兩條，具體通過那一條途徑主要取決于培養(yǎng)基成分中激素的種類及其濃度配比；由花粉離體培養(yǎng)得到的是植株是單倍體植株，這也說明成熟花粉細(xì)胞具有全能性．
3、通常選擇植物單核期的花藥培養(yǎng)成功率最高．花藥取樣后通常用醋酸洋紅法染成紅色鏡檢，對不易著色的則用焙花青-鉻礬法對其染色，顏色是藍(lán)黑色．

解答 解：（1）組培中，常采用MS固體培養(yǎng)基，主要包括的成分有水、大量元素、微量元素、有機(jī)物，還需要添加植物激素．
（2）細(xì)胞分裂素和生長素的使用順序不同，培養(yǎng)的結(jié)果不同．先使用生長素，再使用細(xì)胞分裂素，有利于細(xì)胞分裂，但細(xì)胞不分化，植物的花粉在適宜的培養(yǎng)基上培養(yǎng)產(chǎn)生花粉植株的兩種途徑：一種是花粉通過胚狀體階段發(fā)育為植株，另一種是花粉在誘導(dǎo)培養(yǎng)基上先形成愈傷組織，再將其誘導(dǎo)分化成植株．這兩種途徑之間并沒有絕對的界限，主要取決于培養(yǎng)基中的激素的種類和濃度配比．
（3）選擇月季單核期的花藥培養(yǎng)成功率最高．花藥取樣后通常用醋酸洋紅法染色鏡檢，對不易著色的則用焙花青-鉻礬法對其染色，能將花粉的細(xì)胞核染成藍(lán)黑色．
（4）消毒后的花蕾，在無菌條件下除去萼片與花瓣，剝離花藥時，盡量不要損傷花藥，同時要將花絲徹底去除．
故答案為：
（1）MS固體    微量元素     
（2）先生長素，后細(xì)胞分裂素     胚狀體
（3）單核（單核居中到單核靠邊）   焙花青鉻礬法      藍(lán)黑     
（4）花絲

點(diǎn)評 對于月季花藥離體培養(yǎng)技術(shù)的掌握是解題的關(guān)鍵．