Question

【題目】流行性感冒（簡(jiǎn)稱(chēng)流感）是流感病毒引起的急性呼吸道感染疾病。典型的臨床癥狀有急起高熱、全身疼痛、顯著乏力和輕度呼吸道癥狀，所引起的并發(fā)癥和死亡現(xiàn)象非常嚴(yán)重�；卮鹣铝邢嚓P(guān)問(wèn)題：

（1）可根據(jù)_____________原理，用人工標(biāo)記的抗體檢測(cè)體內(nèi)流感病毒的有無(wú)。

（2）“病毒核酸檢測(cè)試劑盒”在快速準(zhǔn)確檢測(cè)病毒方面發(fā)揮著重要作用，通過(guò)血液等樣本獲得cDNA的具體過(guò)程是_____________。將獲得的cDNA通過(guò)PCR技術(shù)擴(kuò)增，最后通過(guò)熒光標(biāo)記的基因探針對(duì)擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行檢測(cè)。利用PCR技術(shù)擴(kuò)增DNA時(shí)，需要的條件有_____________（答出3點(diǎn)），PCR技術(shù)獲取目的基因的優(yōu)勢(shì)是___________________________。

（3）疫苗對(duì)預(yù)防流感具有重要意義，某公司將流感病毒的表面蛋白基因與質(zhì)粒結(jié)合形成基因疫苗，并已完成動(dòng)物接種實(shí)驗(yàn)。接種基因疫苗后，__________（填“病毒的DNA聚合酶”“宿主的DNA聚合酶”或“宿主的RNA聚合酶”）識(shí)別表面蛋白基因啟動(dòng)子，最終啟動(dòng)免疫反應(yīng)。在檢測(cè)疫苗刺激機(jī)體產(chǎn)生免疫能力的實(shí)驗(yàn)中，對(duì)照組的處理為__________________________，實(shí)驗(yàn)組的處理為接種疫苗，一段時(shí)間后分別接種流感病毒，并統(tǒng)計(jì)兩組動(dòng)物的發(fā)病率。

（4）2017年，我國(guó)科學(xué)家將流感病毒的部分基因進(jìn)行改造，使其失去在宿主細(xì)胞內(nèi)的增殖能力，并已將該病毒活疫苗進(jìn)行動(dòng)物實(shí)驗(yàn)。與傳統(tǒng)滅活疫苗相比，該類(lèi)疫苗的優(yōu)點(diǎn)是可引起_______________（填“體液”或“細(xì)胞”）免疫，從而加強(qiáng)免疫效果。

Answer 1

【答案】抗原—抗體雜交 在逆轉(zhuǎn)錄酶的作用下，以mRNA為模板，按照堿基互補(bǔ)配對(duì)原則合成cDNA 熱穩(wěn)定DNA聚合酶（或Taq酶）、引物、原料、加熱 可以在短時(shí)間內(nèi)大量擴(kuò)增目的基因 宿主的RNA聚合酶 接種不含疫苗的接種物 細(xì)胞

【解析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：

（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫(kù)中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。

（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。

（3）將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣.將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)�入�?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)�入微生物�?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。

（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定：分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù).個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲(chóng)鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。

（1）利用抗原-抗體雜交的特點(diǎn)，可用人工標(biāo)記的抗體對(duì)檢測(cè)者體內(nèi)流感病毒的有無(wú)進(jìn)行檢測(cè)。

（2）以mRNA為材料可以獲得cDNA，其具體過(guò)程是在逆轉(zhuǎn)錄酶的作用下，以mRNA為模板按照堿基互補(bǔ)配對(duì)的原則合成cDNA。利用PCR技術(shù)擴(kuò)增DNA時(shí)，需要的條件有熱穩(wěn)定DNA聚合酶（或Taq酶）、引物、原料、加熱，PCR技術(shù)獲取目的基因的優(yōu)勢(shì)是可以在短時(shí)間內(nèi)大量擴(kuò)增目的基因。

（3）病毒不具細(xì)胞結(jié)構(gòu)，只能利用宿主細(xì)胞的RNA聚合酶識(shí)別其啟動(dòng)子。在檢測(cè)疫苗刺激機(jī)體產(chǎn)生免疫能力的實(shí)驗(yàn)中，對(duì)照組的處理為接種不含疫苗的接種物，實(shí)驗(yàn)組的處理為接種疫苗，一段時(shí)間后分別接種流感病毒，并統(tǒng)計(jì)兩組動(dòng)物的發(fā)病率，從而確定疫苗的免疫能力。

（4）上述子代病毒能侵染宿主細(xì)胞，與不具有侵染性的流感病毒滅活疫苗相比，該病毒活疫苗的優(yōu)勢(shì)之一是可引起細(xì)胞免疫，從而加強(qiáng)免疫效果。