Question

8．蛋白質(zhì)是生物體內(nèi)重要的化合物，實(shí)驗(yàn)室提取、分離蛋白質(zhì)對(duì)于蛋白質(zhì)的研究，應(yīng)用具有重要意義，請(qǐng)分析回答：
（1）若要從紅細(xì)胞中提取血紅蛋白，則要對(duì)獲得的紅細(xì)胞進(jìn)行洗滌、血紅蛋白釋放、分離血紅蛋白溶液、透析才能獲得含雜質(zhì)較少的血紅蛋白溶液，前兩個(gè)步驟中使用的液體分別是生理鹽水、蒸餾水和甲苯．
（2）用凝膠色譜法分離血紅蛋白的過(guò)程中，為使凝膠裝填緊密，應(yīng)在約50cm高的操作壓下向色譜柱內(nèi)注入緩沖液，當(dāng)色譜柱內(nèi)紅色條帶接近色譜柱底端時(shí)，開(kāi)始收集流出液，在分離過(guò)程中，當(dāng)觀察到紅色區(qū)帶均勻一致地移動(dòng)時(shí)，說(shuō)明色譜柱制作成功．
（3）裝填凝膠柱時(shí)，不得有氣泡存在，原因是氣泡會(huì)攪亂洗脫液中蛋白質(zhì)的洗脫次序，降低分離效果．

Answer 1

分析 血紅蛋白提取和分離的程序可分為四大步，包括：樣品處理、粗分離、純化和純度鑒定．
首先通過(guò)洗滌紅細(xì)胞、血紅蛋白的釋放、離心等操作收集到血紅蛋白溶液，即樣品的處理；再經(jīng)過(guò)透析去除分子量較小的雜質(zhì)，即樣品的粗分離；然后通過(guò)凝膠色譜法將相對(duì)分子質(zhì)量大的雜質(zhì)蛋白除去，即樣品的純化；最后經(jīng)聚丙烯酰胺凝膠電泳進(jìn)行純度鑒定．

解答 解：（1）若要從紅細(xì)胞中提取血紅蛋白，則要對(duì)獲得的紅細(xì)胞進(jìn)行洗滌、血紅蛋白釋放、分離血紅蛋白溶液、透析才能獲得含雜質(zhì)較少的血紅蛋白溶液．洗滌紅細(xì)胞利用的是生理鹽水，紅細(xì)胞不會(huì)破裂，而血紅蛋白釋放過(guò)程中利用蒸餾水和甲苯使紅細(xì)胞吸水破裂．
（2）用凝膠色譜法分離血紅蛋白的過(guò)程中，為使凝膠裝填緊密，應(yīng)在約50cm高的操作壓下向色譜柱內(nèi)注入緩沖液，當(dāng)色譜柱內(nèi)紅色條帶接近色譜柱底端時(shí)，開(kāi)始收集流出液，在分離過(guò)程中，當(dāng)觀察到紅色區(qū)帶均勻一致地移動(dòng)時(shí)，說(shuō)明色譜柱制作成功．
（3）裝填凝膠柱時(shí)，不得有氣泡存在，原因是氣泡會(huì)攪亂洗脫液中蛋白質(zhì)的洗脫次序，降低分離效果．
故答案為：
（1）洗滌    血紅蛋白釋放     生理鹽水    蒸餾水和甲苯
（2）50    色譜柱底端     紅色區(qū)帶均勻一致地移動(dòng)
（3）氣泡會(huì)攪亂洗脫液中蛋白質(zhì)的洗脫次序，降低分離效果

點(diǎn)評(píng) 本題考查了蛋白質(zhì)的提取和分離的實(shí)驗(yàn)，要求考生能夠掌握實(shí)驗(yàn)的原理、方法、步驟等有關(guān)知識(shí)，掌握在不同步驟中使用的溶液；注意凝膠裝填過(guò)程總的相關(guān)注意點(diǎn)，難度適中．