Question

在某些深海魚中發(fā)現(xiàn)的抗凍蛋白基因afp對提高農(nóng)作物的抗寒能力有較好的應(yīng)用價(jià)值．如圖所示獲得轉(zhuǎn)基因萵苣的技術(shù)流程，請據(jù)圖回答下列問題：
（1）進(jìn)行基因工程操作，首先必須將含有抗凍蛋白基因的DNA分子從細(xì)胞內(nèi)提取出來．在實(shí)驗(yàn)室中從魚的紅細(xì)胞中提取DNA，可以先根據(jù)DNA和蛋白質(zhì)等在不同濃度的NaCI溶液中

 

的 不同，初步分離，然后進(jìn)一步分離．在沸水浴的條件下，DNA遇二苯胺會呈

 

色，因此二苯胺可以作為鑒定DNA的試劑．
（2）①過程需要的酶有

 

、

 

．
（3）如果受體細(xì)胞C₁是土壤農(nóng)桿菌，則導(dǎo)入它的目的是利用農(nóng)桿菌的

 

，
使目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞C₂，并將其插入到受體細(xì)胞C₂中

 

上，使目的基因的遺傳特性得以穩(wěn)定維持和表達(dá)，形成轉(zhuǎn)基因萵苣．經(jīng)②過程獲得的轉(zhuǎn)基因萵苣中的目的基因是否表達(dá)，在分子水平上可用

 

方法進(jìn)行檢測，如果出現(xiàn)雜交帶，說明目的基因已經(jīng)表達(dá)蛋白質(zhì)產(chǎn)品，轉(zhuǎn)基因萵苣培育成功．
（4）若受體細(xì)胞為牛的受精卵，則受精卵分裂的方式為

 

，將此受精卵發(fā)育成的胚胎進(jìn)行分割移植時(shí)，應(yīng)選擇發(fā)育良好、形態(tài)正常的

 

，要注意將

 

均等分割，否則會影響分割后的恢復(fù)和進(jìn)一步發(fā)育．

Answer 1

考點(diǎn)：基因工程的原理及技術(shù),胚胎分割移植

專題：

分析：（1）獲取目的基因的主要途徑有從自然界已有的物種中分離和人工合成．①DNA在NaCl溶液中的溶解度隨NaCl濃度的不同而不同．當(dāng)NaCl的濃度為0.14mol/L時(shí)，DNA的溶解度最低．利用這一原理，可使溶解在NaCl溶液中的DNA析出．②DNA不溶于酒精溶液，但是細(xì)胞中的其他許多物質(zhì)溶于酒精溶液．利用這一原理，可以進(jìn)一步提取含雜質(zhì)較少的DNA．③DNA遇二苯胺（沸水�。�會染成藍(lán)色；DNA還有遇甲基綠溶液被染成藍(lán)綠色的特性．上述兩種方法均可用于鑒定DNA的存在．
（2）①過程為基因表達(dá)載體的構(gòu)建過程，需要用到限制酶，切開特定的磷酸二酯鍵，形成粘性末端，DNA連接酶，連接磷酸二酯鍵．
（3）一個(gè)完整的基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動子、終止子和標(biāo)記基因．
（4）農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法利用的是農(nóng)桿菌的轉(zhuǎn)化作用，將目的基因整合到受體細(xì)胞的染色體DNA上，進(jìn)而使目的基因能夠穩(wěn)定遺傳和表達(dá)．檢測目的基因是否成功表達(dá)可采用抗原--抗體雜交法．

解答： 解：（1）DNA在NaCl溶液中的溶解度隨NaCl濃度的不同而不同，DNA遇二苯胺（沸水�。�會染成藍(lán)色；DNA還有遇甲基綠溶液被染成藍(lán)綠色的特性．
（2））①過程為基因表達(dá)載體的構(gòu)建過程，需要用到限制酶，DNA連接酶．
（3）農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法利用的是農(nóng)桿菌的轉(zhuǎn)化作用，將目的基因整合到受體細(xì)胞的染色體DNA上，進(jìn)而使目的基因能夠穩(wěn)定遺傳和表達(dá)．檢測目的基因是否成功表達(dá)可采用抗原--抗體雜交法．
（4）受精卵的分裂方式為有絲分裂，胚胎移植時(shí)，需要在桑椹胚或囊胚時(shí)期，對內(nèi)細(xì)胞團(tuán)進(jìn)行均等分割，否則會影響胚胎的恢復(fù)和發(fā)育．
故答案為：
（1）溶解度  藍(lán)
（2）限制性內(nèi)切酶（限制酶）  DNA連接酶
（3）轉(zhuǎn)化作用  染色體的DNA  抗原-抗體雜交
（4）有絲分裂  桑椹胚或囊胚  內(nèi)細(xì)胞團(tuán)

點(diǎn)評：此題主要考查基因工程的原理和應(yīng)用，胚胎工程等知識點(diǎn)，意在考查學(xué)生對基礎(chǔ)知識的理解和綜合運(yùn)用能力．難度適中．