Question

【題目】萌發(fā)的小麥種子中的淀粉酶主要有α－淀粉酶（在 pH<3.6 時(shí)迅速失活，但耐熱）、β－淀粉酶（不耐 熱，70℃條件下 15min 后就失活，但耐酸）。以下是以萌發(fā)的小麥種子為原料來測定α－淀粉酶催化效率的實(shí)驗(yàn)， 請(qǐng)回答下列與實(shí)驗(yàn)相關(guān)的問題。

[實(shí)驗(yàn)?zāi)康腯測定 40℃條件下α－淀粉酶的催化效率。

[實(shí)驗(yàn)材料]萌發(fā) 3 天的小麥種子。

[主要器材]麥芽糖標(biāo)準(zhǔn)溶液、5％淀粉溶液、斐林試劑、蒸餾水、恒溫水浴鍋、試管等。

[實(shí)驗(yàn)步驟]

（1）制備不同濃度麥芽糖溶液，與斐林試劑生成標(biāo)準(zhǔn)顏色。取 7 支潔凈試管編號(hào)，按下表中所示加入試劑，而后 將試管置于 60℃水浴中加熱 2min，取出后按編號(hào)排序。

表中 Z 代表的數(shù)值是。

（2）以萌發(fā)的小麥種子制取淀粉酶溶液，將裝有淀粉酶溶液的試管置于，取出后迅速冷卻，得到α－淀粉酶溶液。

（3）取 A、B、C、D 四組試管分別作以下處理：

（4）將 Al 和 Bl 試管中溶液加入到 E1 試管中，A2 和 B2 溶液加入到 E2 試管中，A3 和 B3 溶液加入到 E3 試管中．C、 D 試管中的溶液均加入到 F 試管中，立即將 E1、E2、E3、F 試管在 40℃水浴鍋中保溫一段時(shí)間。然后分別加入 2mL 斐林試劑，并經(jīng)過 60℃水浴中加熱 2min 后，觀察顏色變化。

[結(jié)果分析]將 E1、E2、E3 試管中的顏色與試管進(jìn)行比較得出麥芽糖溶液濃度，并計(jì)算出α－淀粉酶催化效率前平均值。

[討論]

①實(shí)驗(yàn)中 F 試管所起的具體作用是排除對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的干擾，從而對(duì)結(jié)果進(jìn)行校正。

②若要測定β－ 淀粉酶的活性，則需要對(duì)步驟二進(jìn)行改變，具體的操作是將淀粉酶溶液，從而獲得β－淀粉酶。

Answer 1

【答案】（1）0．6 （2）70℃水浴鍋中15min （4）結(jié)果分析：1—7號(hào)（以及F）

討論：①α—淀粉酶溶液中還原糖 ②pH調(diào)至3．6以下

【解析】試題分析：（1）制備不同濃度麥芽糖溶液，與斐林試劑生成標(biāo)準(zhǔn)顏色：7個(gè)組麥芽糖標(biāo)準(zhǔn)溶液含量不同，為保證7組麥芽糖濃度不同，麥芽糖和水混合后的總量7組是一樣的，故第5組（1．4+Z=2．0）求出Z=0．6．

因?yàn)槊劝l(fā)的小麥種子既含有α－淀粉酶，也含有、β－淀粉酶。而本實(shí)驗(yàn)中測定40℃條件下α－淀粉酶的催化效率，所以需要除去β－淀粉酶。根據(jù)α－淀粉酶（在pH3．6以下迅速失活，但耐熱）、β－淀粉酶（不耐熱，70℃條件下15min后就失活，但耐酸），設(shè)定70℃條件下15min后即可去除β－淀粉酶。故70℃水浴鍋中15min 。

α－淀粉酶可以水解淀粉生成麥芽糖，E1、E2、E3試管中正是這個(gè)水解過程，水解之后通過斐林試劑檢測顯色反應(yīng)，再通過與（不同濃度麥芽糖溶液，與斐林試劑生成標(biāo)準(zhǔn)顏色1—7號(hào)）對(duì)比，即可測定40℃條件下α－淀粉酶的催化效率，故1—7號(hào)（以及F）

（4）①因?yàn)閷?shí)驗(yàn)用到的α－淀粉酶溶液是從萌發(fā)的小麥種子中制取的，故需要排除α—淀粉酶溶液中還原糖對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的干擾。 ②若要測定β－淀粉酶的活性，需要去除萌發(fā)種子中的α－淀粉酶。根據(jù)α－淀粉酶（在pH3．6以下迅速失活，但耐熱）、β－淀粉酶（不耐熱，70℃條件下15min后就失活，但耐酸），故pH調(diào)至3．6以下后即可去除α－淀粉酶。