Question

（7分）H18雜交瘤細(xì)胞產(chǎn)生的抗人肝癌單克隆抗體HAb18對(duì)于人體肝癌的靶向治療具有重要的意義，但H18雜交瘤細(xì)胞在培養(yǎng)過(guò)程中的凋亡現(xiàn)象制約著細(xì)胞的高密度培養(yǎng)以及生產(chǎn)能力的提高。通過(guò)基因工程可改造H18雜交瘤細(xì)胞的抗凋亡能力，相關(guān)研究步驟如下：

①細(xì)胞培養(yǎng)：將人肝癌細(xì)胞在含10%小牛血清的培養(yǎng)液中培養(yǎng)。一段時(shí)間后，用胰蛋白酶處理培養(yǎng)液，漂洗后調(diào)整細(xì)胞懸液濃度為1×107個(gè)·mL－1。

②免疫小鼠：向小鼠體內(nèi)注射肝癌細(xì)胞懸液0.8mL，以后每隔2周免疫1次，共3次，最后一次免疫后3天，取脾臟制成細(xì)胞懸液備用。

③細(xì)胞融合及篩選：將脾臟細(xì)胞懸液和骨髓瘤細(xì)胞懸液在50%PEG作用下進(jìn)行融合，篩選出能產(chǎn)生抗人肝癌單克隆抗體HAb18的H18雜交瘤細(xì)胞。

④改造H18雜交瘤細(xì)胞：利用PCR技術(shù)獲得小鼠的bcl-XL基因（抗凋亡基因），構(gòu)建表達(dá)載體，通過(guò)脂質(zhì)體法導(dǎo)入H18雜交瘤細(xì)胞，再篩選出抗凋亡能力明顯提高的H18雜交瘤細(xì)胞。

請(qǐng)分析回答：

（1）步驟①肝癌細(xì)胞培養(yǎng)液中加入小牛血清的目的是 ，培養(yǎng)液中還需加入一定量抗生素的目的是 。

（2）步驟②中，肝癌細(xì)胞免疫小鼠需在一定時(shí)間內(nèi)間隔注射3次，其目的是 。

（3）步驟③中，除了用50%PEG促進(jìn)細(xì)胞融合外，常用的生物誘導(dǎo)因素是 。步驟④中通過(guò)脂質(zhì)體法將表達(dá)載體導(dǎo)入H18雜交瘤細(xì)胞的原理是 。

（4）與普通抗肝癌藥物相比，用抗人肝癌單克隆抗體HAb18與相應(yīng)抗癌藥物結(jié)合制成的“生物導(dǎo)彈”治療肝癌的主要優(yōu)點(diǎn)是 。

（5）乙醇有誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的作用。為了建立H18雜交瘤細(xì)胞凋亡檢測(cè)模型，科研人員利用不同濃度的乙醇溶液誘導(dǎo)H18雜交瘤細(xì)胞凋亡，其結(jié)果如右圖所示。

抗凋亡細(xì)胞株的建立與篩選應(yīng)選擇的條件是 。

Answer 1