Question

【題目】阿拉伯膠是一種多糖，能被土壤中某些能合成阿拉伯膠降解酶的微生物分解，回答下列問題。

（1）為從土壤中分離獲得能分解阿拉伯膠的單菌落，某同學(xué)設(shè)計了A、B、C、D四種培養(yǎng)基(成分見下表)：

培養(yǎng)基	阿拉伯膠	NaNO3	牛肉膏	K2HPO4	MgSO4·7H2O	KCl	FeSO4·7H2O	瓊脂
A	25 g/L	－	－	1 g/L	1 g/L	0.5 g/L	0.01 g/L	15 g/L
B	25 g/L	－	3 g/L	1 g/L	1 g/L	0.5 g/L	0.01 g/L	15 g/L
C	25 g/L	3 g/L	－	1 g/L	1 g/L	0.5 g/L	0.01 g/L	－
D	25 g/L	3 g/L	－	1 g/L	1 g/L	0.5 g/L	0.01 g/L	15 g/L

據(jù)表判斷，則應(yīng)選用表中的_________培養(yǎng)基，針對不選用的其他培養(yǎng)基，分別說明原因：

①__________________________________________________________

②______________________________________________________________；

③_______________________________________________________________。

（2）為獲得單菌落，可將土壤稀釋液涂布接種在上述選定培養(yǎng)基上。在涂布平板時，滴加到培養(yǎng)基表面的菌懸液量不宜過多的原因是________________________________。在樣品稀釋和涂布平板步驟中，下列選項(xiàng)不需要的是_________(填序號)。

①酒精燈 ②培養(yǎng)皿 ③顯微鏡 ④無菌水

（3）為了確定微生物產(chǎn)生的阿拉伯膠降解酶的最適溫度，某同學(xué)測得相同時間內(nèi)，在35 ℃、40 ℃、45 ℃溫度下降解10 g阿拉伯膠所需酶量依次為4 mg、1 mg、6 mg，則上述三個溫度中，________℃條件下該酶活力最小。為了進(jìn)一步確定該酶的最適溫度，應(yīng)在_______ ℃范圍內(nèi)設(shè)計后續(xù)實(shí)驗(yàn)。

Answer 1

【答案】 D A培養(yǎng)液缺少氮源 B培養(yǎng)液不是以阿拉伯膠為唯一碳源 C為液體培養(yǎng)基不能分離單菌落 培養(yǎng)基表面的菌懸液會出現(xiàn)積液，導(dǎo)致菌體堆積，影響分離效果 ③ 45 35～45

【解析】【試題分析】

本題主要考查微生物的分離與培養(yǎng)的相關(guān)知識，需要考生理解所學(xué)知識：分離某些能合成阿拉伯膠降解酶的微生物時，要選用以阿拉伯膠做唯一碳源的固體培養(yǎng)基。同時還需掌握稀釋涂布平板法分離微生物的操作原理和步驟。在此基礎(chǔ)上結(jié)合題意，靈活運(yùn)用所學(xué)知識進(jìn)行綜合分析并解題。

（1）分析表格中培養(yǎng)基的成分可知，A培養(yǎng)液缺少氮源，B培養(yǎng)液不是以阿拉伯膠為唯一碳源，C為液體培養(yǎng)基不能分離單菌落，所以應(yīng)選用D培養(yǎng)基從土壤中分離獲得能分解阿拉伯膠的單菌落。

（2）稀釋涂布平板法接種微生物時，滴加到培養(yǎng)基表面的菌懸液量不宜過多的原因是如果滴加過多，則培養(yǎng)基表面的菌懸液會出現(xiàn)積液，導(dǎo)致菌體堆積，影響分離效果；在樣品稀釋過程中需要用到無菌水，在涂布平板過程中要用到酒精燈和培養(yǎng)皿，兩個步驟中都不用顯微鏡，因此，在樣品稀釋和涂布平板步驟中，下列選項(xiàng)不需要的是③顯微鏡。

（3）降解等量的阿拉伯膠所需的酶量越多，說明此溫度下的酶的活力越小。所以三種溫度中45℃條件下該酶活力最�。粡娜�種溫度下的實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知，40℃下酶的活力最大，所以要想測定該酶的最適溫度，應(yīng)圍繞該溫度即35～45℃設(shè)計不同溫度梯度，進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)。