Question

【題目】夏日炎炎，空調(diào)是人們?nèi)粘Ｉ�活不可或缺的家電之一舒爽的涼風里可能藏著引發(fā)“空調(diào)病”的危險分子——嗜肺軍團菌。該病菌被免疫細胞吞噬后不被分解而讓自己不斷擴增壯大，最終導致重癥肺炎�；卮鹣铝袉栴}：

（1）嗜肺軍團菌的培養(yǎng)基的營養(yǎng)成分包括_______和特殊營養(yǎng)物質(zhì)五大類，配制好的培養(yǎng)基通常采用__________法進行滅菌。

（2）為了避免培養(yǎng)基在培養(yǎng)過程中被污染，一般需將含有培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿_________。為了排除培養(yǎng)基被污染，需設(shè)置接種等量________的培養(yǎng)基作為空白對照。

（3）篩選獲得的嗜肺軍團菌株經(jīng)鑒定后，將菌株進行液體擴大培養(yǎng)用于藥物研究。培養(yǎng)時需要振蕩，其主要目的是___________。為了測定培養(yǎng)液中的菌體數(shù)量，一般采用_____法將一定量的菌液接種到固體培養(yǎng)基上，該方法是通過統(tǒng)計平板上的菌落數(shù)來推測樣品中的活菌數(shù)，一般選擇菌落數(shù)在________的平板進行計數(shù)。該方法使用時需對菌種進行梯度稀釋，原因是______________。

Answer 1

【答案】碳源、氮源、水、無機鹽 高壓蒸汽滅菌 倒置或加蓋倒置 無菌水 增大培養(yǎng)液中的溶氧量、使菌株與培養(yǎng)基中的營養(yǎng)物質(zhì)充分接觸 稀釋涂布平板 30～300 當樣品的稀釋度足夠高時，培養(yǎng)基表面生長的一個菌落來源于樣品稀釋液中的一個活菌

【解析】

1．培養(yǎng)基的營養(yǎng)構(gòu)成：各種培養(yǎng)基一般都含有水、碳源、氮源、無機鹽，此外還要滿足微生物生長對pH、特殊營養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的要求。例如，培養(yǎng)乳酸桿菌時需要在培養(yǎng)基中添加維生素，培養(yǎng)霉菌時需將培養(yǎng)基的pH調(diào)至酸性，培養(yǎng)細菌時需將pH調(diào)至中性或微堿性，培養(yǎng)厭氧微生物時則需要提供無氧的條件。

2．分解纖維素的微生物的分離的實驗原理：

①土壤中存在著大量纖維素分解酶，包括真菌、細菌和放線菌等，它們可以產(chǎn)生纖維素酶。纖維素酶是一種復合酶，可以把纖維素分解為纖維二糖，進一步分解為葡萄糖使微生物加以利用，故在用纖維素作為唯一碳源的培養(yǎng)基中，纖維素分解菌能夠很好地生長，其他微生物則不能生長。

②在培養(yǎng)基中加入剛果紅，可與培養(yǎng)基中的纖維素形成紅色復合物，當纖維素被分解后，紅色復合物不能形成，培養(yǎng)基中會出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈，從而可篩選纖維素分解菌。

（1）嗜肺軍團菌的培養(yǎng)基的營養(yǎng)成分包括碳源、氮源、水、無機鹽和特殊營養(yǎng)物質(zhì)五大類，配制好的培養(yǎng)基通常采用高壓蒸汽滅菌法進行滅菌。

（2）為了避免培養(yǎng)基在培養(yǎng)過程中被污染，一般需將含有培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿倒置或加蓋倒置。為了排除培養(yǎng)基被污染，需設(shè)置接種等量無菌水的培養(yǎng)基作為空白對照。

（3）篩選獲得的嗜肺軍團菌株經(jīng)鑒定后，將菌株進行液體擴大培養(yǎng)用于藥物研究。培養(yǎng)時需要振蕩，其主要目的是增大培養(yǎng)液中的溶氧量、使菌株與培養(yǎng)基中的營養(yǎng)物質(zhì)充分接觸。為了測定培養(yǎng)液中的菌體數(shù)量，一般采用稀釋涂布平板法將一定量的菌液接種到固體培養(yǎng)基上，該方法是通過統(tǒng)計平板上的菌落數(shù)來推測樣品中的活菌數(shù)，一般選擇菌落數(shù)在30～300的平板進行計數(shù)。該方法使用時需對菌種進行梯度稀釋，原因是當樣品的稀釋度足夠高時，培養(yǎng)基表面生長的一個菌落來源于樣品稀釋液中的一個活菌。