Question

人組織纖溶酶原激活物（htPA）是一種重要的藥用蛋白，可在轉(zhuǎn)htPA基因母羊的羊乳中獲得．流程如圖：

（1）htPA基因與載體用

 

切割后，通過DNA連接酶連接，以構(gòu)建重組表達(dá)載體．檢測目的基因是否已插入受體細(xì)胞DNA，可采用

 

技術(shù)．
（2）為獲取更多的卵（母）細(xì)胞，要對(duì)供體母羊注射促性腺激素，使其

 

．采集的精子需要經(jīng)過

 

，才具備受精能力．
（3）將重組表達(dá)載體導(dǎo)入受精卵常用的方法是

 

．為了獲得母羊，移植前需對(duì)已成功轉(zhuǎn)入目的基因的胚胎進(jìn)行

 

．利用胚胎分割和胚胎移植技術(shù)可獲得多個(gè)轉(zhuǎn)基因個(gè)體，這體現(xiàn)了早期胚胎細(xì)胞的

 

．
（4）若在轉(zhuǎn)htPA基因母羊的羊乳中檢測到

 

，說明目的基因成功表達(dá)．

Answer 1

考點(diǎn)：基因工程的原理及技術(shù),胚胎移植

專題：

分析：DNA重組技術(shù)至少需要三種工具：限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶）、DNA連接酶、運(yùn)載體．
目的基因分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)．
該基因工程需要對(duì)羊的性別進(jìn)行選擇，由于只有母羊能夠分泌乳汁，因此選擇母羊的胚胎進(jìn)行移植．

解答： 解：（1）htPA基因與載體需要用同種限制性核酸內(nèi)切酶（或同種限制酶）切割，形成相同的黏性末端，然后再通過DNA連接酶連接，以構(gòu)建重組表達(dá)載體．檢測目的基因是否已插入受體細(xì)胞DNA，可采用DNA分子雜交（或核酸探針）技術(shù)．
（2）為獲取更多的卵（母）細(xì)胞，要對(duì)供體母羊注射促性腺激素，使其超數(shù)排卵．采集的精子需要經(jīng)過獲能（處理），才具備受精能力．
（3）將重組表達(dá)載體導(dǎo)入受精卵常用的方法是顯微注射法．為了獲得母羊，移植前需對(duì)已成功轉(zhuǎn)入目的基因的胚胎進(jìn)行性別鑒定，以選擇母羊的胚胎進(jìn)行移植．利用胚胎分割和胚胎移植技術(shù)可獲得多個(gè)轉(zhuǎn)基因個(gè)體，這體現(xiàn)了早期胚胎細(xì)胞的全能性．
（4）若在轉(zhuǎn)htPA基因母羊的羊乳中檢測到htPA（或人組織纖溶酶原激活物），說明目的基因成功表達(dá)．
故答案為：
（1）同種限制性核酸內(nèi)切酶（或同種限制酶）；     DNA分子雜交（或核酸探針）；
（2）超數(shù)排卵；   獲能（處理）；
（3）顯微注射法；    性別鑒定；     全能性；
（4）htPA（或人組織纖溶酶原激活物）．

點(diǎn)評(píng)：本題考查了基因工程和胚胎工程的相關(guān)知識(shí)，要求考生能夠識(shí)記基因工程的操作步驟；明確該基因工程中需要選擇母羊進(jìn)行胚胎移植；識(shí)記細(xì)胞全能性的概念等．要求考生具有扎實(shí)的基礎(chǔ)知識(shí)，難度適中，屬于考綱中識(shí)記、理解層次的考查．