Question

【題目】在藥品生產中，人們逐步利用基因工程技術生產出如干擾素，白細胞介素，凝血因子等各種高質量低成本的藥品，請分析回答：

(1)在用目的基因與質粒形成重組DNA過程中，一般要用到的工具酶是限制酶和DNA連接酶，其中限制酶切割的是___________________鍵,其特點是___________________________。

(2)將含有“某激素基因”的質粒導入細菌細胞后，能在細菌細胞內直接合成“某激素”，則該激素在細菌體內的合成包括______________________和_________________兩個階段。

(3)基因工程形成工程菌的遺傳學原理是______________________________。

(4) 基因工程操作的第四步是目的基因的檢測與鑒定，其中分子水平的檢測又分三步：首先要檢測轉基因生物的DNA是否插入了目的基因，采用技術是______________________；其次還要檢測目的基因是否轉錄出了mRNA，方法是____________________________；最后檢測目的基因是否翻譯成蛋白質，方法是__________________________________________。

(5)為了解基因結構，通常選取一特定長度的線性DNA分子，先用一種限制酶切割，通過某種技術將單酶水解片段分離，計算相對大��；然后再用另一種酶對單酶水解片段進行降解，分析片斷大小。下表是某小組進行的相關實驗。

已知一線性DNA序列共有5000bp（bp為堿基對）	第一步水解	產物（單位bp）	第二步水解	產物（單位bp）
	A酶切割	1900	將第一步水解產物分離后，分別用B酶切割	1700 200
		1500		800 700
		1600		1100 500

由實驗可知，在這段已知序列上，A酶與B酶的識別序列分別為______個和_____個。

Answer 1

【答案】 磷酸二酯鍵 只能識別特定的DNA序列,并在兩個特定的脫氧核苷酸之間切割 轉錄 翻譯 基因重組 DNA分子雜交技術 采用分子雜交技術 抗原—抗體雜交 2 3

【解析】試題分析：制性核酸內切酶是可以識別DNA的特異序列，并在識別位點或其周圍切割雙鏈DNA的一類內切酶，簡稱限制酶。由表格分析可知A酶切割后有3段產物，說明酶A有2個切割位點，A酶切割的每一段產物，能被B酶切割位2段產物，說明每一段產物酶B有1個切割位點，因此說明酶B有3個切割位點。

（1）限制酶切割的是磷酸二酯鍵，其特點是只能識別特定的DNA序列，并在兩個特定的脫氧核苷酸之間切割。

（2）將含有“某激素基因”的質粒導入細菌細胞后，能在細菌細胞內直接合成“某激素”，說明該激素的化學本質為蛋白質，蛋白質的合成包括轉錄和翻譯兩個階段。

（3）基因工程形成工程菌的遺傳學原理是基因重組。
（4）基因工程操作的第四步是目的基因的檢測與鑒定，其中分子水平的檢測又分三步：首先要檢測轉基因生物的DNA是否插入了目的基因，采用技術是DNA分子雜交技術；其次還要檢測目的基因是否轉錄出了mRNA，方法是采用分子雜交技術；最檢測目的基因是否翻譯成蛋白質，方法是抗原-抗體雜交。

（5）由實驗可知，A酶切割后形成3段產物，所以有2個識別位點，被A酶切割后的3段產物，被B酶切割后形成6段，所以酶B的識別序列有3個。