Question

1．下列實驗操作及目的，正確的是（　�。�

• A． 將葡萄糖異構(gòu)酶加入到冷卻的海藻酸鈉溶液中，以制備固定化酶
• B． 將新制得的固定化酵母凝膠珠用清水反復(fù)沖洗，以防止雜菌污染
• C． 向含DNA的2 mol•L^-1 NaCl溶液中快速加入蒸餾水，以迅速析出DNA
• D． 將切成小塊的獼猴桃經(jīng)液氮冷凍并研碎，以充分釋放核物質(zhì)

Answer 1

分析 1、酶和細(xì)胞的固定方法和特點

固定對象	酶	細(xì)胞
適宜固定法	交聯(lián)法、吸附法	包埋法
特點	體積小，固定一種酶．
包埋法容易丟失	體積大，固定一系列酶．
難以化學(xué)結(jié)合和吸附
發(fā)揮作用需要的條件	適宜的溫度、pH	適宜的溫度、pH、
還需要營養(yǎng)物質(zhì)和氧氣

2、DNA粗提取和鑒定的原理：
（1）DNA的溶解性：DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度NaCl溶液中溶解度不同；DNA不溶于酒精溶液，但細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)溶于酒精；DNA對酶、高溫和洗滌劑的耐受性．
（2）DNA的鑒定：在沸水浴的條件下，DNA遇二苯胺會被染成藍(lán)色．
3、DNA粗提取和鑒定的過程：
（1）實驗材料的選�。悍彩呛�有DNA的生物材料都可以考慮，但是使用DNA含量相對較高的生物組織，成功的可能性更大．
（2）破碎細(xì)胞，獲取含DNA的濾液：
動物細(xì)胞的破碎比較容易，以雞血細(xì)胞為例，在雞血細(xì)胞液中加入一定量的蒸餾水，同時用玻璃棒攪拌，過濾后收集濾液即可．如果實驗材料是植物細(xì)胞，需要先用洗滌劑溶解細(xì)胞膜．例如，提取洋蔥的DNA時，在切碎的洋蔥中加入一定的洗滌劑和食鹽，進(jìn)行充分的攪拌和研磨，過濾后收集研磨液．
（3）去除濾液中的雜質(zhì)：
方案一的原理是DNA在不同濃度NaCl溶液中溶解度不同；方案二的原理是蛋白酶分解蛋白質(zhì)，不分解DNA；方案三的原理是蛋白質(zhì)和DNA的變性溫度不同．
方案二是利用蛋白酶分解雜質(zhì)蛋白，從而使提取的DNA與蛋白質(zhì)分開；方案三利用的是DNA和蛋白質(zhì)對高溫耐受性的不同，從而使蛋白質(zhì)變性，與DNA分離．（4）DNA的析出與鑒定
①將處理后的溶液過濾，加入與濾液體積相等、冷卻的酒精溶液，靜置2～3min，溶液中會出現(xiàn)白色絲狀物，這就是粗提取的DNA．用玻璃棒沿一個方向攪拌，卷起絲狀物，并用濾紙吸取上面的水分．
②取兩支20ml的試管，各加入物質(zhì)的量濃度為2mol/L的NaCl溶液5ml，將絲狀物放入其中一支試管中，用玻璃棒攪拌，使絲狀物溶解．然后，向兩支試管中各加入4ml的二苯胺試劑．混合均勻后，將試管置于沸水中加熱5min，待試管冷卻后，比較兩支試管溶液顏色的變化，看看溶解有DNA的溶液是否變藍(lán)．

解答 解：A、酶分子比較小，溶液從包埋材料中漏出，因此固定化酶一般不采用包埋法，A錯誤；
B、將新制得的固定化酵母凝膠珠用清水反復(fù)沖洗，以去除凝膠珠表面的氯化鈣，B錯誤；
C、向含DNA的2 mol•L^-1 NaCl溶液中緩慢加入蒸餾水，慢慢析出DNA，C錯誤；
D、將切成小塊的獼猴桃經(jīng)液氮冷凍并研碎，以充分釋放核物質(zhì)，D正確．
故選：D．

點評 本題考查固定化酶、DNA的粗提取和鑒定，要求考生識記固定化技術(shù)；識記DNA粗提取的原理及操作過程，能結(jié)合所學(xué)的知識準(zhǔn)確判斷各選項．