Question

紅細(xì)胞含有大量血紅蛋白，紅細(xì)胞的機能主要是由血紅蛋白完成，血紅蛋白的主要功能是攜帶O₂或CO₂，我們可以選用豬、牛、羊或其他脊椎動物的血液進(jìn)行實驗，來提取和分離血紅蛋白．請回答下列有關(guān)問題：
（1）血紅蛋白的提取和分離一般可分為四步：

 

、

 

、

 

和

 

．
（2）實驗前取新鮮的血液，要切記在采血容器中預(yù)先加入檸檬酸鈉，取血回來，馬上進(jìn)行離心，收集血紅蛋白溶液．
①加入檸檬酸鈉的目的是

 

②以上所述的過程即是樣品處理，它包括

 

、

 

、

 

、透析．
（3）收集的血紅蛋白溶液在透析袋中可以經(jīng)過透析，這就是樣品的粗分離．
①透析的目的是

 

②透析的原理是

 

（4）然后通過凝膠色譜法將樣品進(jìn)一步純化，最后經(jīng)SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳進(jìn)行純度鑒定．樣品純化的目的是

 

（5）提取細(xì)胞膜經(jīng)常使用的材料是哺乳動物的成熟紅細(xì)胞，原因是：

 

．

Answer 1

考點：蛋白質(zhì)的提取和分離,細(xì)胞膜的制備方法

專題：

分析：本題是對血紅蛋白的提取和分離的實驗操作的考查，回憶血紅蛋白的提取和分離的實驗操作過程和原理，然后結(jié)合問題的具體要求進(jìn)行解答．

解答： 解：（1）血紅蛋白的提取和分離一般可分為：樣品處理、粗分離、純化、純度鑒定四步．
（2）樣品處理過程分為紅細(xì)胞洗滌、血紅蛋白釋放、分離血紅蛋白溶液和透析四步，實驗前取新鮮的血液時，在采血容器中應(yīng)預(yù)先加入檸檬酸鈉，以防止血液凝固．
（3）血紅蛋白的粗分離是通過透析完成的，透析的目的是除去分子量較小的雜質(zhì)，原理是透析袋是半透膜，能使小分子自由進(jìn)出，而將大分子保留在袋內(nèi)．
（4）樣品純化是通過凝膠色譜法除去分子量大的雜蛋白．
（5）由于哺乳動物的成熟紅細(xì)胞沒有細(xì)胞核、沒有線粒體等由膜系統(tǒng)構(gòu)成的細(xì)胞器，提取的細(xì)胞膜相對單一，只有細(xì)胞膜，因此取細(xì)胞膜經(jīng)常使用的材料是哺乳動物的成熟紅細(xì)胞．
故答案為：
（1）樣品處理   粗分離  純化   純度鑒定
（2）①防止血液的凝固②紅細(xì)胞的洗滌  血紅蛋白的釋放  分離血紅蛋白溶液
（3）①將樣品中分子量較小的雜質(zhì)蛋白除去     ②透析袋能使小分子自由進(jìn)出，而將大分子保留在袋內(nèi)
（4）通過凝膠色譜法將相對分子質(zhì)量大的雜質(zhì)蛋白除去
（5）因為哺乳動物的成熟紅細(xì)胞沒有細(xì)胞核、沒有線粒體等由膜系統(tǒng)構(gòu)成的細(xì)胞器，這樣提取的細(xì)胞膜相對較純

點評：對血紅蛋白的提取和分離的實驗操作和原理的掌握是本題考查的重點．