Question

15．某工廠為了生產(chǎn)耐高溫植酸酶飼料添加劑，開展了產(chǎn)該酶菌株的篩選、酶的固定化及其特性分析研究，其流程如下．請(qǐng)回答：
土樣中的菌種篩選→菌種鑒定→優(yōu)良菌株擴(kuò)大培養(yǎng)→植酸酶提純→植酸酶固定化→植酸酶特性分析
（1）上壤懸液濘先經(jīng)80℃處理15分鐘，其目的是篩選出耐高溫菌株
（2）在無(wú)菌條件下，將經(jīng)過(guò)處理的土壤懸液進(jìn)行稀釋，然后涂布于含有植酸鈉的固體培養(yǎng)基上．培養(yǎng)后觀察到單菌落，其周圍出現(xiàn)透明水解圈，圈的直徑大小與植酸酶的活性強(qiáng)弱相關(guān)．
（3）篩選獲得的菌株經(jīng)鑒定后，將優(yōu)良菌株進(jìn)行液體擴(kuò)大培養(yǎng)．培養(yǎng)時(shí)齋要振蕩，其主要目的是供氧．液體培養(yǎng)基與固體培養(yǎng)基相比不含有的成分是瓊脂．
（4）在合適條件下，將提純的植酸酶與海藻酸鈉混合后，滴加到一定濃度的鈣離子溶液中，使液滴形成凝膠固體小球．該過(guò)程是對(duì)酶進(jìn)行B．
A．吸附B．包埋C．裝柱D．洗滌
（5）溫度與植酸酶相對(duì)酶活性的關(guān)系如圖所示．下列敘述錯(cuò)誤的是D．
A．測(cè)試溫度中，固定化與非固定化植酸酶的最適溫度分別為60℃和45℃
B．測(cè)試溫度范圍內(nèi)，固定化植酸酶的相對(duì)酶活性波動(dòng)低于非固定化植酸酶
C．固定化與非固定化植酸酶相比，相對(duì)酶活性在80%以上時(shí)的溫度范圍較寬
D．65℃時(shí)固定化與非固定化植酸酶的相對(duì)酶活性因蛋白質(zhì)變性而位于最低點(diǎn)．

Answer 1

分析 微生物的篩選與分離需要使用選擇培養(yǎng)基．常用的接種方法主要有平板劃線法和稀釋涂布平板法．固定化酶和固定化細(xì)胞的方法主要有包埋法、物理吸附法和化學(xué)結(jié)合法．影響酶的活性的因素主要有溫度和pH等．

解答 解：（1）土壤懸液首先經(jīng)80℃處理15分鐘，目的是使大多數(shù)的不耐高溫的微生物死亡而篩選出耐高溫菌株．
（2）土壤懸液懸液在無(wú)菌條件下進(jìn)行梯度稀釋，使用稀釋涂布平板法接種涂布于含有植酸鈉的固體培養(yǎng)基上，經(jīng)培養(yǎng)后可以觀察到單菌落的出現(xiàn)，且出現(xiàn)透明圈，透明圈的直徑大小與植酸酶的活性強(qiáng)弱相關(guān)．
（3）振蕩培養(yǎng)的目的是向培養(yǎng)液供氧，同時(shí)使微生物與培養(yǎng)液充分接觸，有利于微生物的繁殖與生長(zhǎng)．液體培養(yǎng)基與固體培養(yǎng)基的區(qū)別是液體培養(yǎng)基不含凝固劑瓊脂．
（4）固定化酶和固定化細(xì)胞的方法主要有包埋法、物理吸附法和化學(xué)結(jié)合法．題干所述方法是將提純的植酸酶與海藻酸鈉混合后，滴加到一定濃度的鈣離子溶液中，使液滴形成凝膠固體小球，該過(guò)程屬于包埋法．
故選：B．
（5）A、據(jù)圖分析，固定化與非固定化植酸酶的最適溫度分別為60℃和45℃，A正確；
B、圖中，在測(cè)試溫度范圍內(nèi)，固定化植酸酶的相對(duì)酶活性波動(dòng)較小，低于非固定化植酸酶的波動(dòng)，B正確；
C、據(jù)圖分析，固定化與非固定化植酸酶相比，相對(duì)酶活性在80%以上時(shí)的溫度范圍較寬，C正確；
D、根據(jù)題意，植酸酶屬于耐高溫酶，65℃時(shí)固定化與非固定化植酸酶的相對(duì)酶活性不是因蛋白質(zhì)變性而位于最低點(diǎn)，D錯(cuò)誤．
故選：D．
故答案為：
（1）耐高溫菌株
（2）稀釋    單菌落     植酸酶的活性
（3）供氧    瓊脂
（4）B
（5）D

點(diǎn)評(píng) 本題主要考查生物技術(shù)實(shí)踐中的微生物的篩選與分離、培養(yǎng)、觀察和固定化酶等知識(shí)，意在強(qiáng)化學(xué)生對(duì)生物技術(shù)實(shí)踐中的核心知識(shí)的識(shí)記、理解與掌握．