Question

【題目】長春花植物中含有復雜的生物堿，其中長春花堿是目前應用最廣泛的天然植物抗腫瘤藥物之一，提取方法如下：長春花干燥粉碎→纖維素酶處理→加入pH為4.0的酸中→恒溫水浴→加堿調pH至8.0→四氯化碳萃取�；卮鹣铝袉栴}：

（1）長春花干燥粉碎后再用纖維素酶處理的原因是增大________，提髙纖維素的_________。

（2）纖維素酶是一類復合酶，實驗室常用___________法鑒別微生物是否產生纖維素酶。

（3）長春花堿微溶于水，易溶于酸中，由此推測，后續(xù)提取加堿的目的是________________。

（4）四氯化碳的熔沸點為76.8℃，長春花堿的熔沸點為211-216℃，由此推測，四氯化碳萃取后，除去四氯化碳獲得純凈的長春花堿的方法是加熱至__________℃之間的某溫度，蒸發(fā)除去四氯化碳。

（5）本實驗中纖維素酶在不同pH和溫度處理后，提取得到的長春花堿含量如圖所示，a、b、c曲線最大值對應的溫度均為50℃，原因是在不同pH條件下，該溫度下_______________，提取的長春花堿含量最多；從酶的功能特性考慮，為了提取更多的長春花堿，需要提供的條件是______________________________（至少回答出3點）

Answer 1

【答案】 纖維素與纖維素酶的接觸面積 降解率 剛果紅染色 讓溶解于酸中的長春花堿析出 76.8211 纖維素酶活性最高 適宜的溫度、pH和纖維素酶用量

【解析】根據(jù)題干信息分析，長春花堿是長春花細胞中的一種生物堿，具有抗腫瘤的作用，因此采用一定的方法從長春花細胞中提取出來，具體過程為：長春花干燥粉碎→纖維素酶處理→加入pH為4.0的酸中→恒溫水浴→加堿調pH至8.0→四氯化碳萃取。

（1）纖維素酶處理干燥粉碎的長春花可以增大纖維素酶與纖維素的接觸面積，提高纖維素的降解率。

（2）纖維素酶是一類復合酶，包括C1酶、Cx酶和葡萄糖苷酶；剛果紅與纖維素反應呈紅色，纖維素分解菌產生的纖維素酶會將纖維素分解而不能與剛果紅染液呈紅色，在菌落周圍會出現(xiàn)透明圈，因此實驗室常用剛果紅染色法鑒別微生物是否產生纖維素酶。

（3）根據(jù)題意分析，長春花堿微溶于水，易溶于酸中，說明后續(xù)提取加堿的目的是讓溶解于酸中的長春花在堿中析出。

（4）根據(jù)題意分析，除去四氯化碳獲得純凈的長春花堿，則溫度必須在四氯化碳的熔沸點以上、長春花堿的熔沸點以下，因此應該加熱至76.8℃211℃之間的某溫度，蒸發(fā)除去四氯化碳。

（5）據(jù)圖分析，三條曲線的最高點對應的溫度都是50℃，說明在不同pH條件下，50℃都是最適宜溫度，該溫度下纖維素酶的活性最高；為了提取更多的長春花堿，需要提供的條件是適宜的溫度、pH和纖維素酶用量。