Question

請(qǐng)回答下列有關(guān)生物技術(shù)實(shí)踐的問(wèn)題．
（1）為了從土壤中篩選能有效降解一種有害的、難于降解的有機(jī)化合物A的細(xì)菌．研究人員用化合物A、磷酸鹽、鎂鹽以及微量元素配制的培養(yǎng)基，成功地篩選出能高效降解化合物A的細(xì)菌（目地菌），該培養(yǎng)基為

 

培養(yǎng)基，其中化合A為目的菌提供

 

 等營(yíng)養(yǎng)要素，在分離、純化、計(jì)數(shù)過(guò)程中，則常采用

 

 法接種，實(shí)驗(yàn)過(guò)程中還需配制空白培養(yǎng)基作為對(duì)照，其目的是

 

，如果空白培養(yǎng)基中無(wú)菌落形成而實(shí)驗(yàn)組培養(yǎng)基中形成的菌落如圖所示，造成這種結(jié)果的原因可能是

 

．
（2）在提取胡蘿卜素時(shí)，常用的萃取劑具有沸點(diǎn)高且

 

 等特點(diǎn)，在鑒定胡蘿卜素粗品時(shí)，常用

 

 法，如果標(biāo)準(zhǔn)樣品只形成一種色素帶，而提取樣品形成了多種色素帶，其原因可能是

 

．
（3）用凝膠色譜法提取分離血紅蛋白時(shí)，用

 

 洗滌紅細(xì)胞，用

 

 破裂紅細(xì)胞使血紅蛋白得以釋放，如果裝填的凝膠色譜柱中出現(xiàn)氣泡，氣泡會(huì)

 

，降低分離效果．

Answer 1

考點(diǎn)：微生物的分離和培養(yǎng),從生物材料中提取某些特定成分,蛋白質(zhì)的提取和分離

專題：

分析：（1）實(shí)驗(yàn)室中目的菌株的篩選的原理：人為提供有利于目的菌株生長(zhǎng)的條件（包括營(yíng)養(yǎng)、溫度．pH等），同時(shí)抑制或阻止其他微生物生長(zhǎng)．
（2）常用的接種方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法．
（3）胡蘿卜素的化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定，為橘黃色結(jié)晶，不溶于水，微溶于乙醇，易溶于石油醚等脂溶性有機(jī)溶劑，常采用萃取法提�。�胡蘿卜素的提取流程為：紅蘿卜-粉碎-干燥-萃取-過(guò)濾-濃縮-胡蘿卜素-鑒定．
（4）凝膠色譜法是根據(jù)相對(duì)分子質(zhì)量大小分離蛋白質(zhì)的有效方法，相對(duì)分子質(zhì)量較小的蛋白質(zhì)容易進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道，路程長(zhǎng)，移動(dòng)的速度慢，相對(duì)分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)不容易進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道，路程短，移動(dòng)的速度快．

解答： 解：（1）由于用化合物A、磷酸鹽、鎂鹽以及微量元素配制的培養(yǎng)基，成功地篩選出能高效降解化合物A的細(xì)菌（目地菌），所以該培養(yǎng)基為選擇培養(yǎng)基．由于微生物的生長(zhǎng)需要水、無(wú)機(jī)鹽、碳源、氮源和生長(zhǎng)因子，所以化合A為目的菌提供碳源和氮源等營(yíng)養(yǎng)要素．在分離、純化、計(jì)數(shù)過(guò)程中，則常采用稀釋涂布法接種．實(shí)驗(yàn)過(guò)程中還需配制空白培養(yǎng)基作為對(duì)照，其目的是驗(yàn)證培養(yǎng)基滅菌是否徹底或檢測(cè)培養(yǎng)基平板滅菌是否合格，如果空白培養(yǎng)基中無(wú)菌落形成而實(shí)驗(yàn)組培養(yǎng)基中形成的菌落如圖所示，造成這種結(jié)果的原因可能是土壤中含有4種能降解有機(jī)化合物A的細(xì)菌或培養(yǎng)基不純，含有其他碳源和氮源或接種過(guò)程中被雜菌污染．
（2）在提取胡蘿卜素時(shí)，常用的萃取劑具有沸點(diǎn)高且水不溶性或不與水混溶等特點(diǎn)，在鑒定胡蘿卜素粗品時(shí)，常用紙層析法，如果標(biāo)準(zhǔn)樣品只形成一種色素帶，而提取樣品形成了多種色素帶，其原因可能是提取樣品中含多種胡蘿卜素．
（3）用凝膠色譜法提取分離血紅蛋白時(shí)，用生理鹽水洗滌紅細(xì)胞，用蒸餾水和甲苯破裂紅細(xì)胞使血紅蛋白得以釋放，如果裝填的凝膠色譜柱中出現(xiàn)氣泡，氣泡會(huì)攪亂洗脫次序，降低分離效果．
故答案為：
（1）選擇    碳源和氮源      稀釋涂布法     驗(yàn)證培養(yǎng)基滅菌是否徹底或檢測(cè)培養(yǎng)基平板滅菌是否合格     土壤中含有4種能降解有機(jī)化合物A的細(xì)菌或培養(yǎng)基不純，含有其他碳源和氮源或接種過(guò)程中被雜菌污染
（2）水不溶性或不與水混溶    紙層析    提取樣品中含多種胡蘿卜素
（3）生理鹽水    蒸餾水和甲苯     攪亂洗脫次序

點(diǎn)評(píng)：本題綜合考查細(xì)菌的篩選、胡蘿卜素的提取和提取分離血紅蛋白等相關(guān)知識(shí)，意在考查學(xué)生的識(shí)記能力和判斷能力，運(yùn)用所學(xué)知識(shí)綜合分析問(wèn)題和解決問(wèn)題的能力．