Question

【題目】下圖是培育表達人乳鐵蛋白的乳腺生物反應(yīng)器的技術(shù)路線。圖中tetR表示四環(huán)素抗性基因，ampR表示氨芐青霉素抗性基因，BamHI、HindⅢ、SmaI直線所示為三種限制酶的酶切位點。據(jù)圖回答：

（1）圖中將人乳鐵蛋白基因插入載體，需用___________________限制酶同時酶切載體和人乳鐵蛋白基因。篩選含有重組載體的大腸桿菌首先需要在含________________的培養(yǎng)基上進行。

（2）能使人乳鐵蛋白基因在乳腺細胞中特異性表達的調(diào)控序列是_______（填字母代號）。

A．啟動子 B．tetR C．復(fù)制原點 D．ampR

（3）過程①常用的操作方法是_________（填字母代號）。

A．農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法 B．大腸桿菌的鈣離子轉(zhuǎn)染法

C．顯微注射法 D．基因槍法

（4）過程②可采用的生物工程技術(shù)是_______________________。

（5）對早期胚胎進行切割，經(jīng)過程②可獲得多個新個體。這利用了細胞的____________性。

（6）為檢測人乳鐵蛋白是否成功表達，可采用_______（填字母代號）技術(shù)。

A．核酸分子雜交 B．基因序列分析 C．抗原—抗體雜交 D．PCR

Answer 1

【答案】HindⅢ和BamHⅠ 氨芐青霉素 A C 胚胎移植技術(shù) 全能 C

【解析】

結(jié)合題意分析圖解：圖中質(zhì)粒包括四環(huán)素抗性基因、氨芐青霉素抗性基因、啟動子、復(fù)制原點，以及兩個限制酶切點，并且兩個限制酶切點的位置均在四環(huán)素抗性基因上；目的基因上有三個限制酶切點，與質(zhì)粒對照，共有的是BamHI、HindIII。
圖中①表示目的基因?qū)�入受體細胞，②表示通過胚胎移植的方式將早期胚胎移植到代孕母牛體內(nèi)。

（1）由圖中信息可知，載體上有HindⅢ和BamHⅠ酶切位點，目的基因上也有它們的酶切位點，應(yīng)用此2種酶切。當(dāng)人乳鐵蛋白基因和質(zhì)粒連接成重組質(zhì)粒后，tetR基因被人乳鐵蛋白基因隔開，不是完整的，而ampR基因是完整的，所以篩選含有重組載體的大腸桿菌首先需要含氨芐青霉素的培養(yǎng)基上進行。

（2）能讓目的基因開始表達的是啟動子，啟動子是RNA聚合酶特異性識別和結(jié)合的DNA序列，是基因的一個組成部分，控制基因表達（轉(zhuǎn)錄）的起始時間和表達的程度。

（3）將目的基因?qū)�入到動物中常用顯微注射法。

（4）早期胚胎移入代孕牛的體內(nèi)利用的是胚胎移植的技術(shù)。

（5）對早期胚胎進行切割，經(jīng)過程胚胎移植過程可獲得多個新個體都發(fā)育成了個體，這體現(xiàn)了細胞全能性。

（6）一般檢測目的基因是否表達里用抗原-抗體雜交的方法。