Question

現(xiàn)有甲、乙兩種可能有一定毒性的化學(xué)物質(zhì)，實(shí)驗(yàn)室研究人員欲通過動物細(xì)胞培養(yǎng)的方法來鑒定它們是否有毒性，并比較二者毒性的強(qiáng)弱。請你以一個研究人員的身份參與此項研究，完成下列實(shí)驗(yàn)報告并回答有關(guān)問題。
【實(shí)驗(yàn)原理】有毒物質(zhì)能誘導(dǎo)細(xì)胞產(chǎn)生變異，根據(jù)這種變異細(xì)胞占全部培養(yǎng)細(xì)胞的百分?jǐn)?shù)（以下稱Q值），可判斷該化學(xué)物質(zhì)的毒性。
【實(shí)驗(yàn)材料】活的小白鼠胚胎。
【藥品用具】胰蛋白酶液、動物細(xì)胞培養(yǎng)液、動物細(xì)胞固定液、適宜濃度的龍膽紫溶液、滴管、培養(yǎng)皿、剪刀、錐形瓶、培養(yǎng)瓶、恒溫箱、載玻片、蓋玻片、顯微鏡、小白鼠正常體細(xì)胞有絲分裂各時期高倍顯微照片。
【實(shí)驗(yàn)步驟】

（1）制備細(xì)胞懸浮液：把活的小白鼠胚胎放在培養(yǎng)皿中剪碎，轉(zhuǎn)入錐形瓶中，加入____處理，使胚胎組織分散成單個細(xì)胞，再加入動物細(xì)胞培養(yǎng)液，制成細(xì)胞懸浮液。

（2）進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)：
①取A、B、C三個潔凈的培養(yǎng)瓶，____，加入等量的細(xì)胞懸浮液。
②向A培養(yǎng)瓶中加入化學(xué)物質(zhì)甲，向B培養(yǎng)瓶中加入____，向C瓶內(nèi)加入等量的生理鹽水，并將培養(yǎng)瓶搖勻。
③在實(shí)驗(yàn)中，C培養(yǎng)瓶起什么作用？____。

（3）制作臨時裝片
①當(dāng)細(xì)胞增殖到大約第8代左右時，同時從恒溫箱中取出三個培養(yǎng)瓶，用胰蛋白酶液處理，使培養(yǎng)的細(xì)胞____，再加入動物細(xì)胞固定液以便迅速殺死細(xì)胞并固定細(xì)胞。
②靜置一段時間后，分別從各培養(yǎng)瓶底部吸取適量的細(xì)胞懸浮液，滴在與培養(yǎng)瓶有相同編號的載玻片的中央，用____染色，3～5min后，蓋上蓋玻片。

（4）鏡檢和統(tǒng)計
把臨時裝片放在顯微鏡下，先用低倍鏡后用高倍鏡，尋找處于____期的細(xì)胞，并與C組對比以確認(rèn)發(fā)生變異的細(xì)胞，同時統(tǒng)計____。
【結(jié)果與結(jié)論】
經(jīng)研究人員實(shí)驗(yàn)得知：A、B、C三個培養(yǎng)瓶的Q值依次為：Q_A=1.3%、Q_B=12.5%、Q_C=0.1%，由此可知該實(shí)驗(yàn)的結(jié)論是____。

Answer 1

（1）胰蛋白酶液；

（2）消毒滅菌；等量的化學(xué)物質(zhì)乙；對照；

（3）從瓶壁上脫落；適宜濃度的龍膽紫溶液；

（4）細(xì)胞有絲分裂中期；該期變異的細(xì)胞占該期細(xì)胞總數(shù)的百分?jǐn)?shù)（Q值）；
實(shí)驗(yàn)的結(jié)論是：甲乙都是有毒性的，且乙的毒性大于甲

（1）胰蛋白酶能夠使動物組織分散成單個細(xì)胞。
（2）培養(yǎng)瓶在加入培養(yǎng)液前需消毒滅菌，該實(shí)驗(yàn)的自變量是有毒物質(zhì)的有無以及濃度，因變量是染色體的變異情況，所以需向三個培養(yǎng)瓶中加入等量的細(xì)胞懸浮液，并放在相同適宜溫度的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。檢測染色體的方法是龍膽紫染液。
（4）QA>QC、QB>QC，說明甲、乙兩種化學(xué)物質(zhì)均有毒性，QB>QA，說明乙的毒性大于甲。C瓶起對照作用，C瓶中Q值>0，說明動物細(xì)胞在正常培養(yǎng)狀態(tài)下變異頻率很低。