Question

【題目】下圖是制備抗埃博拉病毒(EBoV)VP40蛋白單克隆抗體的過程。請據(jù)圖回答：

（1）埃博拉病毒(EBOV)的遺傳物質(zhì)是RNA，EBOV病毒容易變異的原因是____________。

（2）科研人員利用小鼠的B淋巴細(xì)胞與鼠的瘤細(xì)胞進(jìn)行雜交，獲得純凈的單一品種抗體，其特點是_________________，可以用此抗體與放射性同位素、化學(xué)藥物或細(xì)胞毒素相結(jié)合，制成“_______________ ”，抗擊埃博拉病毒(EBOV)。

（3）利用PCR獲取目的基因的過程中，反應(yīng)體系內(nèi)要加入含有VP40基因的DNA、dNTP、Taq酶和根據(jù)________________________合成的引物。

（4）選用EcoRⅠ和XhoⅠ雙酶切的優(yōu)點是 ___________________________ ；VP40基因進(jìn)入大腸桿菌細(xì)胞，并在大腸桿菌內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)，該過程可稱為_____________。

（5）過程⑥常用的不同于植物原生質(zhì)體融合的促融方法是用_________________處理。

Answer 1

【答案】RNA是單鏈結(jié)構(gòu)，穩(wěn)定性差，突變率高 經(jīng)EBOV免疫后特異性強、靈敏度高、可大量制備 生物導(dǎo)彈 目的基因的核苷酸序列 防止自身環(huán)化 轉(zhuǎn)化 滅活的病毒

【解析】

據(jù)圖分析，圖示過程涉及到基因工程的基本步驟和單克隆抗體的制備過程，其中①表示獲取目的基因，②表示構(gòu)建基因表達(dá)載體，③表示將目的基因?qū)�入�?dǎo)入大腸桿菌，④表示從大腸桿菌獲取相應(yīng)的蛋白質(zhì)（VP40蛋白），⑤表示注射抗原，提取相應(yīng)的B淋巴細(xì)胞，⑥表示通過細(xì)胞融合技術(shù)獲得形成雜交瘤細(xì)胞，⑦表示雜交瘤細(xì)胞的體外培養(yǎng)，獲得單克隆抗體。

（1）埃博拉病毒（EBO）的遺傳物質(zhì)是RNA，而RNA是單鏈結(jié)構(gòu)，突變率較高，穩(wěn)定性較差，所以EBO病毒容易變異。

（2）經(jīng)EBO免疫后小鼠體內(nèi)可獲取漿細(xì)胞，其與鼠的瘤細(xì)胞進(jìn)行雜交，獲得純凈的單一品種抗體，即單克隆抗體，其特點是特異性強、靈敏度高、可大量制備；可以用此抗體與放射性同位素、化學(xué)藥物或細(xì)胞毒素制成“生物導(dǎo)彈”，抗擊埃博拉病毒（EBO）。

（3）PCR技術(shù)中，引物是根據(jù)目的基因的核苷酸序列合成的。

（4）EcoRⅠ和XhoⅠ切割形成的黏性末端不同，而DNA連接酶只能將具有相同黏性末端的DNA片段連接起來，因此為了防止目的基因反向連接、目的基因和質(zhì)粒的自身環(huán)化，酶切時可選用的酶是EcoRⅠ和XhoⅠ。VP40基因進(jìn)入大腸桿菌細(xì)胞，并在大腸桿菌內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)，該過程稱為轉(zhuǎn)化。

（5）過程⑥為誘導(dǎo)動物細(xì)胞融合，其不同于植物原生質(zhì)體的促融方法是用滅活的病毒進(jìn)行誘導(dǎo)。