Question

【題目】人類疾病的轉基因動物模型常用于致病機理的探討及治療藥物的篩選。利用正常大鼠制備遺傳性高血壓轉基因模型大鼠的流程如圖所示（注：基因B為高血壓相關基因）。

（1）進行①過程之前，需對人工采集的精子進行 處理。完成②過程常采用的方法是 ，④過程中，為了防止污染，通常還要在細胞培養(yǎng)液中添加一定量的 。

（2）從人體細胞中獲取基因B時用到的工具酶是 ，在構建的基因表達載體中，高血壓相關基因的首端必須有 ，它是RNA聚合酶的識別和結合部位。

（3）圖示中甲為 （時期）的去核卵母細胞，⑤過程操作技術叫做 。

（4）要在分子水平上檢測成功導入的B基因在大鼠中是否成功表達，可采用 方法，如果高血壓相關基因已在大鼠體內(nèi)成功表達，可用其建立高血壓轉基因動物模型。

Answer 1

【答案】（1）獲能（2分）顯微注射法 抗生素（2）限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶） 啟動子（2分）

（3）減數(shù)第二次分裂中期（MII中期）（2分）核移植（2分） （4）抗原-抗體雜交

【解析】試題分析：(1)過程①表示體外受精的過程，在進行此過程之前，首先需要對精子進行獲能處理。“獲能”是精子與卵子結合前必需的準備過程，沒有這個過程就不能完成受精。②過程表示的是將外源基因導入受體細胞，導入動物受精卵一般用顯微注射的方法。動物細胞培養(yǎng)需要滿足以下條件：無菌、無毒的環(huán)境，培養(yǎng)液應進行無菌處理。通常還要在培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素，以防培養(yǎng)過程中的污染。（2）獲取目的基因時可用到的工具酶是限制酶，基因表達載體的構建啟動子是為了啟動下游基因的“表達”，表達首先需要轉錄，因此RNA聚合酶識別和結合的部位才是轉錄的起始，DNA聚合酶識別和結合的部位是DNA復制的起始。（3）卵細胞培養(yǎng)到減數(shù)第二次分裂中期時，才具有與精子受精的能力，⑤過程表示細胞核移植技術。（4）基因工程中，導入了目的基因，但不知道它是否成功表達，即是否合成相應蛋白質(zhì)，所以用抗原與抗體雜交技術，驗證這種蛋白質(zhì)的存在，確定基因是否表達。