Question

13．實(shí)驗(yàn)人員從環(huán)境中分離獲得白腐菌，以白腐菌的菌絲或孢子制得固定化白腐菌凝膠顆粒，各取25個(gè)兩種凝膠顆粒分別處理50mL染料廢水，實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖1．進(jìn)一步研究不同數(shù)量的凝膠顆粒處理50mL染料廢水結(jié)果如圖2．據(jù)圖分析回答：

（1）從野外采集白腐菌前，先向待采集土壤噴灑適量的染料廢水的目的是使分解染料的白腐菌富集．某同學(xué)在進(jìn)行白腐菌分離純化實(shí)驗(yàn)時(shí)，劃線某個(gè)平板培養(yǎng)后，第一劃線區(qū)域的劃線上都不間斷地長(zhǎng)滿了菌，第二劃線區(qū)域的第一條線上無(wú)菌落，其它劃線上有菌落．造成第一條劃線無(wú)菌落可能的操作失誤是接種環(huán)灼燒后未冷卻（或劃線未從第一區(qū)域末端開(kāi)始）．將收集到的菌絲或者孢子加入到適量的海藻酸鈉溶液中混勻，抽取5mL混合液，滴加到CaCl₂溶液中，該過(guò)程中CaCl₂溶液的作用是與海藻酸鈉反應(yīng)形成凝膠球（凝固劑）．
（2）現(xiàn)要處理100L皮革生產(chǎn)過(guò)程中產(chǎn)生的染料廢水．從實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析，應(yīng)選用固定化白腐菌孢子（或孢子）凝膠顆粒，添加60000個(gè)凝膠顆粒后，保持10天以上，以達(dá)到最好的凈化效果．
（3）與向染料廢水中直接接種白腐菌相比，在工業(yè)生產(chǎn)中使用固定化白腐菌凝膠顆粒的優(yōu)點(diǎn)主要是可以反復(fù)利用．

Answer 1

分析 1、制備培養(yǎng)基時(shí)倒平板中的主要操作；平板劃線時(shí)，每次劃線前都要進(jìn)行灼燒，最后一次劃線結(jié)束也要進(jìn)行灼燒．
2、根據(jù)圖1和圖2顯示可以發(fā)現(xiàn)：應(yīng)選用固定化白腐菌孢子（或孢子）凝膠顆粒脫色率較高．由圖1可知：凈化時(shí)間需要保持10天以上，凈化效果較好．根據(jù)圖2顯示：固定化白腐菌孢子的凝膠顆粒處理50mL染料廢水時(shí)，固定化白腐菌孢子的凝膠顆粒達(dá)到30個(gè)時(shí)，已達(dá)到飽和．

解答 解：（1）從野外采集白腐菌前，先向待采集土壤噴灑適量的染料廢水的目的是使分解染料的白腐菌富集．純化菌株時(shí)，通常使用接種環(huán)進(jìn)行劃線．劃線的某個(gè)平板培養(yǎng)后，第一劃線區(qū)域的劃線上都不間斷地長(zhǎng)滿了菌，第二劃線區(qū)域所劃的第一條線上無(wú)菌落，其他劃線上有菌落．造成劃線無(wú)菌落可能的操作失誤有接種環(huán)灼燒后未冷卻、劃線未從第一區(qū)域末端開(kāi)始．CaCl₂溶液的作用是與海藻酸鈉反應(yīng)形成凝膠球（凝固劑）．
（2）根據(jù)圖1和圖2顯示可以發(fā)現(xiàn)：應(yīng)選用固定化白腐菌孢子（或孢子）凝膠顆粒脫色率較高，故選之．由圖1可知：凈化時(shí)間需要保持10天以上．根據(jù)圖2顯示：固定化白腐菌孢子的凝膠顆粒處理50mL染料廢水時(shí)，固定化白腐菌孢子的凝膠顆粒達(dá)到30個(gè)時(shí)，已達(dá)到飽和．故處理100L廢水，需要添加$\frac{100×1000×30}{50}=60000$個(gè)凝膠顆粒．
（3）使用固定化白腐菌凝膠顆粒的優(yōu)點(diǎn)主要是可以反復(fù)利用．
故答案為：
（1）使分解染料的白腐菌富集　接種環(huán)灼燒后未冷卻（或劃線未從第一區(qū)域末端開(kāi)始，答到任意1點(diǎn)即給分）　與海藻酸鈉反應(yīng)形成凝膠球（凝固劑）
（2）固定化白腐菌孢子（或孢子）　60000　10
（3）可以反復(fù)利用

點(diǎn)評(píng) 本題考查固定化酶的相關(guān)內(nèi)容，要求考生掌握平板劃線法接種時(shí)需要注意的細(xì)節(jié)問(wèn)題，能結(jié)合圖中信息準(zhǔn)確答題