Question

科研人員利用胚胎干細(xì)胞（ES細(xì)胞）對(duì)干擾素基因缺失小鼠進(jìn)行基因治療。其技術(shù)流程如下圖：

（1）步驟①的技術(shù)名稱是 。

（2）將基因?qū)�入ES細(xì)胞而不是導(dǎo)入到上皮細(xì)胞是因?yàn)镋S細(xì)胞具有 。

（3）步驟③中，需要構(gòu)建含有干擾素基因的 。由于DNA復(fù)制時(shí)，子鏈只能由5′向3′方向延伸，故構(gòu)建前利用PCR技術(shù)擴(kuò)增干擾素基因時(shí)，可以從下圖A、B、C、D四種單鏈DNA片段中選取作為引物。對(duì)干擾素基因片段和質(zhì)粒進(jìn)行酶切時(shí)，可選用限制酶的組合為 或 。

（4）將步驟③獲得的ES細(xì)胞在熒光顯微鏡下觀察，選擇發(fā) 色熒光的細(xì)胞進(jìn)行體外誘導(dǎo)。為檢測干擾素基因是否表達(dá)，可以采用 的方法。

Answer 1