Question

【題目】下圖表示利用經(jīng)抗原免疫后的B淋巴細(xì)胞與小鼠的骨髓瘤細(xì)胞進(jìn)行雜交，制備單克隆抗體的過程。請據(jù)圖回答下列問題：

（1）在單克隆抗體的制備過程中，應(yīng)用了細(xì)胞工程中的______和_____兩大技術(shù)。

（2）將特定的抗原注入小鼠，需在一定時間內(nèi)間隔注射3次，其目的是______。

（3）培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞的培養(yǎng)基中需加入動物血清，原因是__________________；提供氣體條件CO2的作用是______；雜交瘤細(xì)胞體外培養(yǎng)過程中，為避免細(xì)胞代謝產(chǎn)物積累對細(xì)胞自身造成危害，常采取的措施是_______________。

（4）對篩選出來的雜交瘤細(xì)胞應(yīng)盡早進(jìn)行克隆化，克隆化的方法最常用的是有限稀釋法，即稀釋細(xì)胞到3～10個細(xì)胞/mL，每孔加入細(xì)胞稀釋液_________mL（填“0．1”“1”或“10”），使每個孔內(nèi)不多于一個細(xì)胞，達(dá)到單克隆培養(yǎng)的目的。

（5）單克隆抗體注入體內(nèi)后可以自動追蹤抗原（如癌變細(xì)胞等）并與之結(jié)合，而不攻擊正常細(xì)胞，故可制成“生物導(dǎo)彈”，這是利用了_________________________的原理，與傳統(tǒng)從血清提取的抗體相比，單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn)是_______________。

Answer 1

【答案】動物細(xì)胞培養(yǎng) 動物細(xì)胞融合 加強(qiáng)免疫，刺激小鼠機(jī)體產(chǎn)生更多的淋巴細(xì)胞 補(bǔ)充細(xì)胞生長所需的未知營養(yǎng)物質(zhì) 維持培養(yǎng)液的pH 定期更新培養(yǎng)液 0.1 抗原與抗體高特異性結(jié)合的特性 特異性強(qiáng)、靈敏度高、可大量制備等

【解析】

單克隆抗體的制備過程是：對小動物注射抗原，從該動物的脾臟中獲取效應(yīng)B細(xì)胞，將效應(yīng)B細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，篩選出能產(chǎn)生單一抗體的雜交瘤細(xì)胞，克隆化培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞（體內(nèi)培養(yǎng)和體外培養(yǎng)），最后獲取單克隆抗體；誘導(dǎo)動物細(xì)胞融合的方法有：物理法（離心、振動）、化學(xué)法（聚乙二醇）、生物法（滅活的病毒）；單克隆抗體的兩次篩選：①篩選得到雜交瘤細(xì)胞(去掉未雜交的細(xì)胞以及自身融合的細(xì)胞)；②篩選出能夠產(chǎn)生特異性抗體的細(xì)胞群；兩次抗體檢測：專一抗體檢驗(yàn)陽性。

（1）單克隆抗體制備的過程中運(yùn)用的細(xì)胞工程技術(shù)有動物細(xì)胞培養(yǎng)和動物細(xì)胞融合技術(shù)。

（2）在一定時間內(nèi)間隔注射3次抗原，其目的是加強(qiáng)免疫，刺激小鼠機(jī)體產(chǎn)生更多的淋巴細(xì)胞。

（3）對雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)時，需要加入動物血清，以補(bǔ)充細(xì)胞生長所需的未知營養(yǎng)物質(zhì)；培養(yǎng)液中二氧化碳的作用是維持培養(yǎng)液的pH；培養(yǎng)過程中，為了避免細(xì)胞代謝產(chǎn)物積累對細(xì)胞自身造成危害，需要定期更新培養(yǎng)液。

（4）已知稀釋后密度是3～10個細(xì)胞/mL，要使每個孔內(nèi)不多于一個細(xì)胞，則每孔應(yīng)該加入細(xì)胞稀釋液0.1mL。

（5）由于抗體能夠與抗原特異性結(jié)合，因此將單克隆抗體制成“生物導(dǎo)彈”，可以保證將藥物定向帶到癌變部位，而不攻擊正常細(xì)胞；單克隆抗體具有特異性強(qiáng)、靈敏度高、化學(xué)性質(zhì)單一、可大量制備等優(yōu)點(diǎn)。