Question

1．金黃色葡萄球菌是一種具有高度耐鹽性的微生物，可引起人類肺炎、腸炎等疾病．金黃色葡萄球菌在血平板上生長時，可破壞菌落周圍的紅細(xì)胞，使其褪色．如圖為定性檢測鮮牛奶中是否存在金黃色葡萄球菌的操作流程，請回答相關(guān)問題．

（1）按細(xì)胞結(jié)構(gòu)分類，金黃色葡萄球菌屬于原核生物；從培養(yǎng)過程分析，金黃色葡萄球菌可進(jìn)行有氧呼吸．
（2）7.5%NaCl肉湯培養(yǎng)基可為微生物提供的營養(yǎng)成分包括碳源、氮源、水和無機(jī)鹽，用7.5%NaCl肉湯培養(yǎng)基進(jìn)行選擇培養(yǎng)的主要目的是增加金黃色葡萄球菌的數(shù)量．操作中在血平板上的接種方法是平板劃線法．
（3）在制備血平板時需將pH調(diào)節(jié)至微堿性 （“微酸性”或“微堿性”）后進(jìn)行高壓蒸汽滅菌，滅菌時，要把鍋內(nèi)的水加熱煮沸，將其原有的冷空氣徹底排除后，將鍋密閉，在壓力為100kPa，溫度為121℃條件下滅菌15-30分鐘．按培養(yǎng)基功能分類，血平板屬于鑒別培養(yǎng)基．
（4）經(jīng)多次規(guī)范操作、重復(fù)實(shí)驗，血平板上均出現(xiàn)周圍存在透明圈的菌落，初步證明鮮牛奶中存在金黃色葡萄球菌，但鮮牛奶供應(yīng)商仍認(rèn)為此菌并非鮮牛奶所攜帶，因此，要對本操作進(jìn)行完善，完善的方案是設(shè)置不加鮮牛奶其他操作均相同的對照組．

Answer 1

分析 1、微生物的營養(yǎng)物質(zhì)有5類，分別是水、無機(jī)鹽、碳源、氮源及生長因子．
2、培養(yǎng)基按功能分為選擇培養(yǎng)基和鑒別培養(yǎng)基：
①選擇培養(yǎng)基：培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)物質(zhì)，以抑制不需要的不需要的微生物的生長，促進(jìn)所需要的微生物生長，培養(yǎng)、分離出特定的微生物（如培養(yǎng)酵母菌和霉菌，可在培養(yǎng)基中加入青霉素；培養(yǎng)金黃色葡萄球菌，可在培養(yǎng)基中加入高濃度的食鹽）
②鑒別培養(yǎng)基：根據(jù)微生物的代謝特點(diǎn)，在培養(yǎng)基中加入某種指示劑或化學(xué)藥品，鑒別不同種類的微生物，如可用伊紅-美藍(lán)培養(yǎng)基鑒別飲用水或乳制品中是否有大腸桿菌（若有，菌落呈深紫色，并帶有金屬光澤）
3、剛果紅染色法篩選纖維素分解菌的原理：剛果紅是一種染料，它可以與像纖維素這樣的多糖物質(zhì)形成紅色復(fù)合物，但并不和水解后的纖維二糖和葡萄糖發(fā)生這種反應(yīng)．當(dāng)我們在含有纖維素的培養(yǎng)基中加入剛果紅時，剛果紅能與培養(yǎng)基中的纖維素形成紅色復(fù)合物．當(dāng)纖維素被纖維素酶分解后，剛果紅-纖維素的復(fù)合物就無法形成，培養(yǎng)基中會出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈．這樣，我們就可以通過是否產(chǎn)生透明圈來篩選纖維素分解菌．

解答 解：（1）葡萄球菌是一種細(xì)菌，屬于原核生物；由于培養(yǎng)過程中沒有進(jìn)行密閉培養(yǎng)，所以葡萄球菌屬于有氧呼吸的菌種．
（2）7.5%NaCl肉湯培養(yǎng)基中含有蛋白質(zhì)，所以可以提供氮源和碳源，又含有水分和氯化鈉，所以提供的營養(yǎng)物質(zhì)為碳源、氮源、水和無機(jī)鹽；高濃度的鹽溶液可以對微生物進(jìn)行選擇，而葡萄球菌可以生存在高濃度的鹽溶液中．圖中接種時使用的工具是接種環(huán)，因此采用的接種方法應(yīng)該是平板劃線法．
（3）培養(yǎng)細(xì)菌時需將pH調(diào)至中性或微堿性；采用高壓蒸汽滅菌法進(jìn)行滅菌時，要把鍋內(nèi)的水加熱煮沸，將其原有的冷空氣徹底排除后，將鍋密閉，在壓力為100kPa，溫度為121℃條件下滅菌15-30分鐘．金黃色葡萄球菌在血平板上生長時，可破壞菌落周圍的紅細(xì)胞，使其褪色，據(jù)此可以鑒別金黃色葡萄球菌，因此按培養(yǎng)基功能分類，血平板屬于鑒別培養(yǎng)基．
（4）根據(jù)題意，“金黃色葡萄球菌在血平板（培養(yǎng)基中添加適量血液）上生長時，可破壞菌落周圍的紅細(xì)胞，使其褪色”，所以如果經(jīng)多次規(guī)范操作、重復(fù)實(shí)驗，血平板上均出現(xiàn)透明圈的菌落，說明初步證明鮮牛奶中存在金黃色葡萄球菌；但這個實(shí)驗要這是對照實(shí)驗，對照實(shí)驗的設(shè)計是在培養(yǎng)基中不加鮮牛奶．
故答案為：
（1）原核     有氧
（2）碳源、氮源、水和無機(jī)鹽      增加金黃色葡萄球菌的數(shù)量       平板劃線法
（3）微堿性       冷空氣     121℃鑒別
（4）周圍存在透明圈    設(shè)置不加鮮牛奶其他操作均相同的對照組

點(diǎn)評 本題結(jié)合定性檢測鮮牛奶中是否存在金黃色葡萄球菌的操作流程圖，考查微生物的培養(yǎng)和鑒定、生物實(shí)驗設(shè)計的知識，考生識記微生物培養(yǎng)的過程、明確生物實(shí)驗設(shè)計的原則（單一變量原則和對照原則）是解題的關(guān)鍵．