Question

【選修1：生物技術(shù)實(shí)踐】
（1）PCR是一種DNA體外擴(kuò)增技術(shù)．1988年，PCR儀問(wèn)世，并被廣泛應(yīng)用于基因擴(kuò)增和DNA序列測(cè)定．如圖是PCR技術(shù)示意圖，請(qǐng)回答下列問(wèn)題：
①標(biāo)準(zhǔn)的PCR過(guò)程一般分為

 

、

 

、

 

三大步驟．
②引物是此過(guò)程中必須加入的物質(zhì)，從化學(xué)本質(zhì)上說(shuō)，引物是一小段

 

．
③將雙鏈DNA

 

，使之變性，從而導(dǎo)致

 

．
④引物延伸需提供

 

作為原料．
（2）紅細(xì)胞含有大量血紅蛋白，我們可以選用豬、牛、羊或其他脊椎動(dòng)物的血液進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，來(lái)提取和分離血紅蛋白，血紅蛋白提取和分離的程序可分為四步：樣品處理、粗分離  純化  純度鑒定．請(qǐng)回答下列有關(guān)問(wèn)題：
①樣品處理，它包括

 

、

 

、收集血紅蛋白溶液．
②收集的血紅蛋白溶液在透析袋中經(jīng)過(guò)透析，這就是樣品的粗分離．透析的目的是

 

．透析的原理是

 

．
③通過(guò)凝膠色譜法將樣品進(jìn)一步純化，最后經(jīng)SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳進(jìn)行純度鑒定．樣品純化的目的是

 

．

Answer 1

考點(diǎn)：PCR技術(shù)的基本操作和應(yīng)用,蛋白質(zhì)的提取和分離

專(zhuān)題：

分析：本題是對(duì)PCR體外擴(kuò)增DNA片段的原理、過(guò)程和條件及血紅蛋白的提取和分離過(guò)程中的實(shí)驗(yàn)原理和操作程序的考查，回憶PCR體外擴(kuò)增DNA片段的原理、過(guò)程和條件及血紅蛋白的提取和分離過(guò)程中的實(shí)驗(yàn)原理和操作程序，然后結(jié)合問(wèn)題的具體要求進(jìn)行解答．

解答： 解：（1）①PCR是一種DNA體外擴(kuò)增技術(shù)一個(gè)循環(huán)包括變性、復(fù)性和延伸三步．
②PCR技術(shù)中的引物實(shí)質(zhì)是單鏈DNA片段或RNA片段．
③PCR技術(shù)中，DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)的打開(kāi)的原理是利用DNA分子熱變性的原理，通過(guò)控制溫度控制DNA分子的解聚和結(jié)合，當(dāng)溫度在95℃時(shí)，DNA分子變性，雙螺旋結(jié)構(gòu)打開(kāi)形成兩條單鏈．
④引物延伸即合成DNA分子需要四種游離的脫氧核糖核苷酸為原料．
（2）①血紅蛋白提取和分離過(guò)程中樣品處理包括紅細(xì)胞的洗滌、血紅蛋白的釋放和收集血紅蛋白溶液．
②粗分離過(guò)程是指將收集的血紅蛋白溶液在透析袋中經(jīng)過(guò)透析的過(guò)程，原理是透析袋能使小分子自由進(jìn)出，而大分子則保留在透析袋內(nèi)，經(jīng)過(guò)透析，將分子量小的雜質(zhì)除去．
③通過(guò)凝膠色譜法將樣品進(jìn)一步純化的目的是除去相對(duì)分子質(zhì)量大的雜質(zhì)蛋白．
故答案為：
①變性    復(fù)性    延伸      ②單鏈DNA或RNA   ③加熱到95℃雙鏈DNA分離成兩條單鏈    ④四種脫氧核苷酸
（2）①紅細(xì)胞的洗滌      血紅蛋白的釋放
②去除相對(duì)分子質(zhì)量較小的雜質(zhì)     透析袋能使小分子自由進(jìn)出，而大分子則保留在透析袋內(nèi)
③通過(guò)凝膠色譜法將相對(duì)分子質(zhì)量大的雜質(zhì)蛋白除去

點(diǎn)評(píng)：對(duì)PCR體外擴(kuò)增DNA片段的原理、過(guò)程和條件及血紅蛋白的提取和分離過(guò)程中的實(shí)驗(yàn)原理和操作程序的記憶和掌握是本題考查的重點(diǎn)．