Question

【題目】研究表明，HER2/neu是一種原癌基因，它表達(dá)的H蛋白在多種惡性腫瘤特別是乳腺癌細(xì)胞中過量表達(dá)．抗H蛋白單克隆抗體能抑制過量表達(dá)H蛋白的乳腺癌細(xì)胞的生長(zhǎng)，目前已成為有效的生物治療手段．
（1）選擇H蛋白作為單克隆抗體的作用靶點(diǎn)，是因?yàn)镠蛋白在成年個(gè)體的正常組織中（填“低表達(dá)”或“高表達(dá)”）．H蛋白是一個(gè)跨膜蛋白，結(jié)構(gòu)如圖12所示．制備免疫小鼠用的H蛋白（抗原）時(shí)，應(yīng)構(gòu)建區(qū)基因，轉(zhuǎn)入原核細(xì)胞表達(dá)并提純．
（2）將H蛋白注射到小鼠體內(nèi)，取該小鼠的脾臟細(xì)胞與細(xì)胞進(jìn)行融合，使用的化學(xué)誘導(dǎo)劑是 ， 細(xì)胞融合的原理是 ．
（3）將融合細(xì)胞在培養(yǎng)基中培養(yǎng)，一段時(shí)間后培養(yǎng)基中只有雜交瘤細(xì)胞生長(zhǎng)．將雜交瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)到多孔培養(yǎng)板上培養(yǎng)，吸取有克隆生長(zhǎng)的細(xì)胞培養(yǎng)孔中的（填“上清液”或“沉淀細(xì)胞”），應(yīng)用技術(shù)進(jìn)行抗體陽性檢測(cè)．經(jīng)多次篩選，就能得到產(chǎn)生單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞．
（4）將篩選得到的雜交瘤細(xì)胞，經(jīng)過或小鼠腹腔內(nèi)培養(yǎng)，獲取大量的單克隆抗體．
（5）治療乳腺癌時(shí)，可單獨(dú)使用抗H蛋白單克隆抗體，也可將該單克隆抗體與抗癌藥物結(jié)合構(gòu)建“生物導(dǎo)彈”，殺死癌細(xì)胞．這充分體現(xiàn)了單克隆抗體的特點(diǎn)．

Answer 1

【答案】
（1）低表達(dá)；胞外
（2）骨髓瘤；PEG（或“聚乙二醇”）；細(xì)胞膜的流動(dòng)性
（3）選擇；上清液；抗原﹣抗體雜交
（4）體外（培養(yǎng)）
（5）特異性強(qiáng)（或“識(shí)別抗原部位專一”）
【解析】解：（1）根據(jù)題意可知，H蛋白在多種惡性腫瘤特別是乳腺癌細(xì)胞中過量表達(dá)，因此原癌基因的表達(dá)產(chǎn)物H蛋白在正常組織中低表達(dá)；由于抗體主要存在于細(xì)胞外液中，因此根據(jù)H蛋白的結(jié)構(gòu)圖可知，若用H蛋白制備抗原需要利用胞外區(qū)基因，由制備獲得的抗體作用于該抗原的胞外區(qū)． （2）在制備單克隆抗體過程中，需要將脾臟細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，誘導(dǎo)其融合的試劑為聚乙二醇，其融合的原理是借助于細(xì)胞膜的流動(dòng)性． （3）將融合細(xì)胞接種在選擇培養(yǎng)基中，從中選出雜交瘤細(xì)胞，由于抗體蛋白質(zhì)相對(duì)質(zhì)量較輕，又因?yàn)榭贵w由細(xì)胞分泌出細(xì)胞，因此需要在吸取有克隆生長(zhǎng)的細(xì)胞培養(yǎng)孔中的上清液，利用抗原﹣抗體雜交技術(shù)最后選出產(chǎn)生單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞．（4）將雜交瘤細(xì)胞經(jīng)過體外培養(yǎng)或小鼠腹腔內(nèi)培養(yǎng)，獲得大量的單克隆抗體．（5）單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn)是特異性強(qiáng)，靈敏度高． 所以答案是：（1）低表達(dá)；胞外；（2）骨髓瘤；PEG（或“聚乙二醇”）；細(xì)胞膜的流動(dòng)性；（3）選擇；上清液；抗原﹣抗體雜交；（4）體外（培養(yǎng)）；（5）特異性強(qiáng)（或“識(shí)別抗原部位專一”）
【考點(diǎn)精析】認(rèn)真審題，首先需要了解單克隆抗體的制備(對(duì)免疫小鼠注射特定的抗原蛋白；提取B淋巴細(xì)胞；同時(shí)用動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的方法培養(yǎng)骨髓瘤細(xì)胞并提�。淮偈顾鼈兗�(xì)胞融合；在特定的選擇培養(yǎng)基上篩選出融合的雜種細(xì)胞；然后對(duì)它進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè)；最后將雜交瘤細(xì)胞在體外做大規(guī)模培養(yǎng)或注射入小鼠腹腔內(nèi)增殖，從細(xì)胞培養(yǎng)液或小鼠腹水中可得到大量的單克隆抗體)．