Question

6．人乳頭狀瘤病毒（ HPV）與宮頸癌的發(fā)生密切相關(guān)，抗HPV的單克隆抗體可以準(zhǔn)確檢測(cè)出HPV，從而及時(shí)監(jiān)控宮頸癌的發(fā)生，以下是以HPV衣殼蛋白為抗原制備出單克隆抗體的過程，請(qǐng)據(jù)圖回答：

（1）述單克隆抗體制備過程中涉及的細(xì)胞工程技術(shù)有動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、動(dòng)物細(xì)胞融合．
（2）雜交瘤細(xì)胞中染色體數(shù)目與普通淋巴細(xì)胞相比具有的特點(diǎn)是染色體數(shù)目加倍，在HAT培養(yǎng)基上存活的細(xì)胞可能包括①②③（填下列序號(hào)）
①無抗體分泌的細(xì)胞   ②抗HPV抗體的分泌細(xì)胞  ③其它無關(guān)抗體的分泌細(xì)胞
（3）對(duì)于抗體檢測(cè)呈陽性的雜交克隆應(yīng)盡早進(jìn)行克隆化，克隆化的方法最常用的是有限稀釋法，即稀釋細(xì)胞到3～10個(gè)細(xì)胞/mL，每孔加入細(xì)胞稀釋液0.1 mL（0.1/1/10），使每個(gè)孔內(nèi)不多于一個(gè)細(xì)胞，達(dá)到單克隆培養(yǎng)的目的．
（4）由上述過程生產(chǎn)出的單克隆抗體不能直接用于人體，理由是因?yàn)樾∈笮纬傻目贵w對(duì)人體來說是抗原，存在著排異反應(yīng)．
（5）科學(xué)家從某些無限增殖細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中分離出了無限增殖調(diào)控基因（prG），該基因能激發(fā)動(dòng)物細(xì)胞分裂，這為單克隆抗體的制備提供了更多的思路．除本題描述的一種制備單克隆抗體技術(shù)外，請(qǐng)?jiān)俸?jiǎn)要寫出一種制備單克隆抗體的思路通過基因工程向漿細(xì)胞中導(dǎo)入prG、利用核移植技術(shù)將漿細(xì)胞的細(xì)胞核移植到去核的無限增殖細(xì)胞中．

Answer 1

分析 單克隆抗體制備流程：
（1）對(duì)小鼠注射特定的抗原蛋白，使小鼠產(chǎn)生免疫反應(yīng)；（2）得到相應(yīng)的B淋巴細(xì)胞；（3）將小鼠骨髓瘤細(xì)胞與B淋巴細(xì)胞融合，再用特定的選擇培養(yǎng)基進(jìn)行篩選；（4）在該培養(yǎng)基上，未融合的親本細(xì)胞和融合的具有同種核的細(xì)胞都會(huì)死亡，只有融合的雜種細(xì)胞才能生長(zhǎng)（這種雜種細(xì)胞的特點(diǎn)是既能迅速大量繁殖又能產(chǎn)生專一的抗體）（5）對(duì)上述雜交瘤細(xì)胞還需進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè)，經(jīng)多次篩選，就可獲得足量的能分泌所需抗體的細(xì)胞；（6）最后，將雜交瘤細(xì)胞在體外條件下做大規(guī)模培養(yǎng)，或注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖，這樣，從細(xì)胞培養(yǎng)液或小鼠腹水中，就可以提取出大量的單克隆抗體．

解答 解：（1）單克隆抗體制備過程中涉及的細(xì)胞工程技術(shù)有動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、動(dòng)物細(xì)胞融合．
（2）因?yàn)殡s交瘤細(xì)胞含有雙親的遺傳物質(zhì)，故雜交瘤細(xì)胞中染色體數(shù)目與普通淋巴細(xì)胞相比具有的特點(diǎn)是染色體數(shù)目加倍．看圖分析可知：小鼠骨髓瘤細(xì)胞不能在HAT培養(yǎng)基上生長(zhǎng)，但是沒有說能不能生存，只是不能增殖，正常細(xì)胞也能在HAT培養(yǎng)基上存活，故①無抗體分泌的細(xì)胞、②抗HPV抗體的分泌細(xì)胞、③其它無關(guān)抗體的分泌細(xì)胞都能在HAT培養(yǎng)基上存活，但是能夠增重的只有雜交瘤細(xì)胞．
（3）對(duì)于抗體檢測(cè)呈陽性的雜交克隆應(yīng)盡早進(jìn)行克隆化，克隆化的方法最常用的是有限稀釋法，即稀釋細(xì)胞到3～10個(gè)細(xì)胞/mL，每孔加入細(xì)胞稀釋液0.1mL，使每個(gè)孔內(nèi)不多于一個(gè)細(xì)胞，達(dá)到單克隆培養(yǎng)的目的．
（4）因?yàn)樾∈笮纬傻目贵w對(duì)人體來說是抗原，存在著排異反應(yīng)，故上述過程生產(chǎn)出的單克隆抗體不能直接用于人體
（5）由于調(diào)控細(xì)胞無限增殖的prG基因位于細(xì)胞質(zhì)中，因此若要采用細(xì)胞核移植獲得單克隆抗體時(shí)，只能講漿細(xì)胞的細(xì)胞核移入到含有prG基因的細(xì)胞質(zhì)中，獲得重組細(xì)胞，最終獲得單克隆抗體．
故答案為：
（1）動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、動(dòng)物細(xì)胞融合   
 （2）染色體數(shù)目加倍     ①②③
（3）陽  0.1    
（4）因?yàn)樾∈笮纬傻目贵w對(duì)人體來說是抗原，存在著排異反應(yīng)
（5）通過基因工程向漿細(xì)胞中導(dǎo)入prG、利用核移植技術(shù)將漿細(xì)胞的細(xì)胞核移植到去核的無限增殖細(xì)胞中

點(diǎn)評(píng) 本題考查了單克隆抗體的制備過程和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)等相關(guān)知識(shí)，意在考查考生理解所學(xué)知識(shí)的要點(diǎn)，把握知識(shí)間的內(nèi)在聯(lián)系的能力．