Question

【題目】在熒光素酶中加入正確的熒光素底物就可以放出熒光。熒光素酶及其合成基因在生物研究中有著廣泛的應用。請回答下列問題：

（1）熒光素酶基因可以從基因文庫中獲取，也可以通過________方法得到，再利用PCR技術擴增即可，擴增熒光素酶基因利用的原理是__________________。

（2）限制酶是切割DNA的工具酶，主要從_________中分離純化出來。DNA連接酶可以分為兩類，一類是從_____________中分離得到的，稱為E·coliDNA連接酶；另一類是從____________中分離得到的。

（3）將目的基因?qū)�入植物細胞，目前常用的目的基因載體是農(nóng)桿菌的Ti質(zhì)粒，目的基因需插入到該基因載體的_________上，然后再轉(zhuǎn)移至受體細胞中。將目的基因?qū)�入動物細胞的技術中，應用最多的是_______。

Answer 1

【答案】 人工合成 DNA（雙鏈）復制 原核生物 大腸桿菌 T4噬菌體 T—DNA 顯微注射技術

【解析】試題分析：解答本題需熟記并理解DNA重組技術的基本工具、基因工程的基本操作程序并形成清晰的知識網(wǎng)絡。在此基礎上，結合問題情境，進行相關問題的解答。

(1)熒光素酶基因?qū)儆谀康幕�因。目的基因可以從基因文庫中獲取，也可以通過人工合成方法得到，再利用PCR技術擴增即可。利用PCR技術擴增目的基因的原理是：DNA雙鏈復制的原理。

(2)限制酶主要從原核生物中分離純化出來。DNA連接酶可以分為兩類，一類是從大腸桿菌中分離得到的，稱為E·coliDNA連接酶；另一類是從T4噬菌體中分離得到的。

(3)將目的基因?qū)�入植物細胞，目前常用的目的基因載體是農(nóng)桿菌的Ti質(zhì)粒，目的基因需插入到該基因載體的T—DNA上，然后再轉(zhuǎn)移至受體細胞中。將目的基因?qū)�入動物細胞的技術中，應用最多的是顯微注射技術。