Question

分析有關(guān)生物工程的資料，回答問(wèn)題．
（1）新技術(shù)的建立和應(yīng)用對(duì)生物學(xué)發(fā)展至關(guān)重要．下列技術(shù)（或儀器）與應(yīng)用匹配正確的是

 

①PCR技術(shù)--擴(kuò)增蛋白質(zhì)
②雜交瘤技術(shù)--制備單克隆抗體
③光學(xué)顯微鏡--觀察葉綠體的基粒
④花粉離體培養(yǎng)--培育單倍體植物
A．①②B．③④C．①③D．②④
紅細(xì)胞生成素（EPO）是體內(nèi)促進(jìn)紅細(xì)胞生成的一種糖蛋白，可用于治療腎衰性貧血等疾病由于天然EP0來(lái)源極為有限，目前臨床使用的紅細(xì)胞生成素主要來(lái)自于基因工程技術(shù)生產(chǎn)的重組人紅細(xì)胞生成素（rhEPO），其生產(chǎn)流程如圖：
（2）本生產(chǎn)流程中要得到的目的基因是

 

；受體細(xì)胞是

 

．圖中②所指的物質(zhì)是

 

，③所指的物質(zhì)是

 

．
（3）流程圖中顯示獲取目的基因的途徑有二條：通過(guò)①

 

技術(shù)和從

 

中獲取．將該基因的表達(dá)載體導(dǎo)入受體細(xì)胞常采用的方法是

 

．
（4）本流程圖中還涉及到的一項(xiàng)細(xì)胞工程技術(shù)是

 

．培養(yǎng)重組CHO 細(xì)胞時(shí)，為便于清除代謝產(chǎn)物，防止細(xì)胞產(chǎn)物積累對(duì)細(xì)胞自身造成危害，應(yīng)定期更換

 

．
（5）檢測(cè)rhEPO外活性需用抗rhEPO單克隆抗體．分泌單克隆抗體的

 

細(xì)胞，可由

 

免疫過(guò)的小鼠B淋巴細(xì)胞與小鼠骨髓瘤細(xì)胞融合而成．

Answer 1

考點(diǎn)：基因工程的原理及技術(shù),動(dòng)物細(xì)胞與組織培養(yǎng)過(guò)程,單克隆抗體的制備過(guò)程

專(zhuān)題：

分析：分析題圖：圖示是利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)人細(xì)胞生成素的過(guò)程，首先獲取目的基因（人EPO基因），可從人的胚胎干細(xì)胞中獲取，其中①表示采用PCR技術(shù)體外擴(kuò)增，也可以人工合成法獲取，其中②為mRNA；其次構(gòu)建基因表達(dá)載體；再將基因表達(dá)載體導(dǎo)入受體細(xì)胞（中國(guó)倉(cāng)鼠細(xì)胞）；最后進(jìn)行目的基因的檢測(cè)和篩選，再大規(guī)模．

解答： 解：（1）①PCR技術(shù)--擴(kuò)增DNA，①錯(cuò)誤；
②雜交瘤技術(shù)（動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)）--制備單克隆抗體，②正確；
③葉綠體的基粒屬于亞顯微結(jié)構(gòu)，用光學(xué)顯微鏡觀察不到，③錯(cuò)誤；
④單倍體是由配子直接發(fā)育而來(lái)的，因此花粉離體培養(yǎng)可以獲得單倍體植物，④正確．
故選：D．
（2）由圖可知，目的基因是人EPO基因（控制紅細(xì)胞生成素合成的基因）；受體細(xì)胞是中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞；圖中②是mRNA；③是目的基因的表達(dá)產(chǎn)物，即rhEPO．
（3）由圖可知，獲取目的基因的途徑有二條：通過(guò)①PCR技術(shù)和從cDNA文庫(kù)中獲�。�顯微注射法是將目的基因?qū)�入�?dòng)物細(xì)胞最有效的方法．
（4）大規(guī)模培養(yǎng)重組CHO細(xì)胞還需采用動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)．動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，需要無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境，為便于清除代謝產(chǎn)物，防止細(xì)胞產(chǎn)物積累對(duì)細(xì)胞自身造成危害，應(yīng)定期更換培養(yǎng)液．
（5）rhEPO免疫過(guò)的小鼠B淋巴細(xì)胞能分泌抗體，但不能在體外無(wú)限增殖，小鼠骨髓瘤細(xì)胞不能分泌抗體，但能無(wú)限增殖，由rhEPO免疫過(guò)的小鼠B淋巴細(xì)胞與小鼠骨髓瘤細(xì)胞融合而成的雜交瘤細(xì)胞，既可分泌單克隆抗體，也可無(wú)限增殖．
故答案為：
（1）D
（2）人EPO基因（控制紅細(xì)胞生成素合成的基因）   中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞     mRNA    rhEPO
（3）PCR    cDNA文庫(kù)    顯微注射法
（4）動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)    培養(yǎng)液
（5）雜交瘤     rhEPO

點(diǎn)評(píng)：本題結(jié)合利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)人紅細(xì)胞生成素的過(guò)程圖，考查基因工程的原理及技術(shù)、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、單克隆抗體等知識(shí)，要求考生識(shí)記基因工程的操作步驟，能準(zhǔn)確判斷圖中各過(guò)程或物質(zhì)的名稱(chēng)；識(shí)記動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過(guò)程及條件；掌握單克隆抗體的制備原理．