Question

【題目】科學家研究表明，新冠病毒是蛋白質(zhì)包裹的單鏈RNA病毒，通過刺突蛋白（S蛋白）與人的ACE2受體識別結(jié)合，來感染人的呼吸道上皮細胞。請回答下列問題：

（1）獲取病毒RNA后，采用___________法得到cDNA，再利用PCR技術(shù)擴增S蛋白基因，擴增前要根據(jù)一段目的基因的核苷酸序列合成引物，PCR中需要引物的原因是___________________。

（2）科學家利用S蛋白刺激實驗動物的免疫系統(tǒng)，獲取___________，用于新冠病毒的檢測及篩查。

（3）將重組質(zhì)粒導入受體細胞后，首先要檢測________，這是目的基因能否在受體細胞中穩(wěn)定遺傳的關(guān)鍵。檢測的方法是DNA分子雜交技術(shù)，即在含有目的基因的片段上用____________等做標記，以此作為探針來檢測。

（4）用熒光探針檢測目的基因時，先將探針與染色體共同煮沸，使DNA雙鏈中_________斷裂，形成單鏈。隨后在降溫復(fù)性過程中，探針的堿基依據(jù)___________________，與染色體上的特定基因序列形成較穩(wěn)定的雜交分子。兩條姐妹染色單體中最多可有________________條熒光標記的DNA片段。

Answer 1

【答案】逆轉(zhuǎn)錄 DNA聚合酶不能從頭開始合成DNA， 而只能從3'端延伸DNA鏈 單克隆抗體（或抗體） 轉(zhuǎn)基因生物的DNA上是否插入了目的基因 放射性同位素 氫 堿基互補配對原則 4

【解析】

目的基因的獲�。悍椒ㄓ袕幕�因文庫中獲取、利用PCR技術(shù)擴增和人工合成。目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因—DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA—分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)—抗原-抗體雜交技術(shù)。

（1）獲取病毒RNA后，采用逆轉(zhuǎn)錄法得到cDNA，再利用PCR技術(shù)擴增S蛋白基因，由于DNA聚合酶不能從頭開始合成DNA， 而只能從3'端延伸DNA鏈，所以擴增前要根據(jù)一段目的基因的核苷酸序列合成引物。

（2）科學家利用S蛋白刺激實驗動物的免疫系統(tǒng)，獲取抗S蛋白的抗體，用于新冠病毒的檢測及篩查。

（3）目的基因在受體細胞中穩(wěn)定遺傳的關(guān)鍵是將目的基因插入到受體細胞的DNA上，使目的基因能隨受體細胞的DNA復(fù)制而復(fù)制，所以將重組質(zhì)粒導入受體細胞后，首先要檢測轉(zhuǎn)基因生物的DNA上是否插入了目的基因，檢測的方法是DNA分子雜交技術(shù)，即在含有目的基因的片段上用放射性同位素等做標記，以此作為探針來檢測。

（4）加熱可使DNA雙鏈中氫鍵斷裂，從而形成單鏈。在降溫復(fù)性過程中，探針的堿基依據(jù)堿基互補配對原則，與染色體上的特定基因序列形成較穩(wěn)定的雜交分子。兩條姐妹染色單體中共含有四條DNA單鏈，故最多可有4條熒光標記的DNA片段。