Question

【題目】下表是某研究小組配制的適合尿素分解菌生長(zhǎng)的培養(yǎng)基,請(qǐng)回答下列問題:

KH2PO4	Na2HPO4	MgSO4·7H2O	葡萄糖	尿素	瓊脂	蒸餾水
1.4g	2.1g	0.2g	10.0g	1.0g	15g	1000mL

(1)上述培養(yǎng)基的成分中，為尿素分解菌提供碳源的是____，提供氮源的是____。該培養(yǎng)基從物理狀態(tài)上看，屬于____培養(yǎng)基；從功能上看，屬于____培養(yǎng)基。

(2)當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí),培養(yǎng)基表面生長(zhǎng)的一個(gè)菌落。此菌落來源于____________,此時(shí)______較能準(zhǔn)確地反映樣品中的活菌數(shù)。

(3)培養(yǎng)過程中，常選擇菌落數(shù)在______區(qū)間的平板統(tǒng)計(jì)計(jì)數(shù)。統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比活菌的真實(shí)數(shù)目低，原因是__________________________。

(4)尿素分解菌經(jīng)X射線照射后不能正常生長(zhǎng)，添加某種維生素后才能正常生長(zhǎng)，原因是_______________________。

(5)初步篩選出的產(chǎn)脲酶細(xì)菌，在培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，能對(duì)分離的菌種做進(jìn)一步鑒定，其原理是_______________________________________。

Answer 1

【答案】葡萄糖 尿素 固體 選擇 樣品稀釋液中的一個(gè)活菌 平板上的菌落數(shù) 30～300 兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀察到的是一個(gè)菌落 X射線照射導(dǎo)致尿素分解菌發(fā)生基因突變，從而缺少合成某種維生素必需的酶 產(chǎn)脲酶細(xì)菌分解尿素，使培養(yǎng)基pH升高，指示劑變紅

【解析】

本題以“培養(yǎng)基配方”為主線，綜合考查學(xué)生對(duì)培養(yǎng)基、土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)實(shí)驗(yàn)等相關(guān)知識(shí)的識(shí)記和理解能力。

(1) 上述培養(yǎng)基的成分中，葡萄糖、尿素可分別為尿素分解菌提供碳源、氮源。該培養(yǎng)基中加入的瓊脂是一種凝固劑，因此從物理狀態(tài)上看，屬于固體培養(yǎng)基；只有尿素分解菌才能在該培養(yǎng)基中生長(zhǎng)，所以從功能上看，屬于選擇培養(yǎng)基。

(2) 當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí)，聚集在一起的微生物將被分散成單個(gè)細(xì)胞，從而能在培養(yǎng)基表面形成一個(gè)菌落。可見，培養(yǎng)基表面生長(zhǎng)的一個(gè)菌落來源于樣品稀釋液中的一個(gè)活菌，此時(shí)平板上的菌落數(shù)較能準(zhǔn)確地反映樣品中的活菌數(shù)。

(3) 用稀釋涂布平板法測(cè)定同一樣品中的細(xì)菌數(shù)時(shí)，為了保證結(jié)果準(zhǔn)確，在每一個(gè)梯度濃度內(nèi)，至少要涂布3個(gè)平板，確定對(duì)照組無菌后，選擇菌落數(shù)在30～300的平板進(jìn)行記數(shù)，求其平均值，再通過計(jì)算得出土壤中的細(xì)菌總數(shù)。由于當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀察到的是一個(gè)菌落，因此統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比活菌的真實(shí)數(shù)目低。

(4) 尿素分解菌經(jīng)X射線照射后不能正常生長(zhǎng)，添加某種維生素后才能正常生長(zhǎng)，究其原因是：X射線照射導(dǎo)致尿素分解菌發(fā)生基因突變，從而缺少合成某種維生素必需的酶。

(5) 在細(xì)菌分解尿素的化學(xué)反應(yīng)中，細(xì)菌合成的脲酶將尿素分解成氨，氨會(huì)使培養(yǎng)基的pH升高，酚紅指示劑將變紅，因此在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，能對(duì)分離的菌種做進(jìn)一步鑒定。