（1）Cre酶是該技術(shù)的關(guān)鍵酶，能隨機(jī)識(shí)別兩個(gè)相同的loxP序列，催化如圖1所示的反應(yīng)。

通過(guò)Cre-loxP系統(tǒng)敲除基因的基本原理是：Cre酶隨機(jī)識(shí)別DNA分子上兩個(gè)相同的loxP序列并從特定位點(diǎn)切斷DNA雙鏈，切口被重新連接后，保留片段_____，從而實(shí)現(xiàn)目標(biāo)基因的敲除。

（2）研究者設(shè)計(jì)圖2所示的DNA片段，轉(zhuǎn)人小鼠體內(nèi)，獲得僅含一個(gè)圖2所示片段的轉(zhuǎn)基因小鼠。

①構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，需用限制酶和_____酶處理三種熒光蛋白基因、兩種loxP序列，將它們與腦組織特異表達(dá)啟動(dòng)子M相連接。

②研究者用顯微注射法將圖2所示表達(dá)載體導(dǎo)入小鼠的_____中，得到僅含一個(gè)圖2 所示片段的轉(zhuǎn)基因小鼠，再經(jīng)過(guò)進(jìn)一步篩選，獲得純合的轉(zhuǎn)基因小鼠a。

（3）圖2所示序列的兩個(gè)loxP1之間或兩個(gè)loxP2之間的基因，只會(huì)被Cre酶識(shí)別并切割一次。為使腦組織細(xì)胞中Cre酶的表達(dá)受調(diào)控，研究者將Cre酶基因與啟動(dòng)子N（由信號(hào)分子X開(kāi)啟)連接，獲得純合轉(zhuǎn)基因小鼠b，將圖3所示純合小鼠a和b雜交，得到F1。

①無(wú)信號(hào)分子X作用時(shí)，F1腦組織和其他組織細(xì)胞的色彩分別是_____。

②有信號(hào)分子X作用時(shí)，F1：出現(xiàn)“腦彩虹”，請(qǐng)闡述機(jī)理：_____。

（4）研究者希望具有更豐富的顏色組合，即在一個(gè)細(xì)胞內(nèi)隨機(jī)出現(xiàn)兩種或兩種以上顏色疊加，形成更多顏色的“腦彩虹”，請(qǐng)依據(jù)題目信息，寫(xiě)出設(shè)計(jì)思路：_____。

（1）與A方式相比，B方式的主要特點(diǎn)是需要借助_______，參與該物質(zhì)合成、加工的具膜細(xì)胞器有____________________。

（2）胰島B細(xì)胞分泌胰島素是通過(guò)______（請(qǐng)?zhí)顖D中英文字母）方式進(jìn)行，隨后胰島素隨血液運(yùn)輸?shù)竭_(dá)靶細(xì)胞，與細(xì)胞膜上的________結(jié)合，體現(xiàn)細(xì)胞膜的________功能。該種運(yùn)輸方式體現(xiàn)出細(xì)胞膜具有_________的特點(diǎn)，具有這種特點(diǎn)的原因是_________________________。

（3）胰島素屬于一種分泌蛋白，教材中研究分泌蛋白的合成和運(yùn)輸過(guò)程所用方法為________，該實(shí)驗(yàn)的因變量為________________________。

（4）A、B、C、D四種方式中需要消耗能量的運(yùn)輸方式是_________________。

（1）科研人員在圖1豌豆幼苗的c點(diǎn)處用IAA運(yùn)輸抑制劑處理后，ab段GA1 含量顯著降低。由于豌豆幼苗的______________________部位產(chǎn)生的IAA，______________________運(yùn)輸至c點(diǎn)以下，因此可以作出兩種假設(shè)，請(qǐng)補(bǔ)充完成假設(shè)二。

假設(shè)一：GA1在ab段中合成，來(lái)自c點(diǎn)以上的生長(zhǎng)素促進(jìn)合成過(guò)程。

假設(shè)二：GA1在c點(diǎn)以上合成并向下運(yùn)輸，_____________________。

（2）已知豌豆幼苗中GA1的合成途徑如圖2所示，酶1催化無(wú)活性的GA20轉(zhuǎn)變成GA1。酶2催化則使GA20轉(zhuǎn)變成無(wú)活性的GA29。為驗(yàn)證上述假設(shè)一，科研人員做了圖3所示實(shí)驗(yàn)，三組豌豆都用放射性GA20處理d處葉片，一段時(shí)間后，測(cè)定ab段放射性強(qiáng)度。

①據(jù)圖可知，第2組去除頂端導(dǎo)致ab段GA1含量________________，第3組與第1組結(jié)果比較， IAA處理導(dǎo)致GA1含量比未處理時(shí)增加了約________________倍。

②分析第2組和第3組結(jié)果，結(jié)合圖2推測(cè)_________________。

③第2組ab段放射性總量明顯高于第1組，且GA29含量顯著高于GA1，其原因是_________________

（3）若從蛋白質(zhì)水平進(jìn)一步驗(yàn)證假設(shè)一成立，請(qǐng)寫(xiě)出研究思路并預(yù)期結(jié)果：____________________。

（1）配制培養(yǎng)基并分離微生物的步驟是：計(jì)算→稱(chēng)量→溶化→調(diào)pH→______________→倒平板→______________→培養(yǎng)。篩選微生物的一般思路是，根據(jù)表型特征利用____培養(yǎng)基進(jìn)行篩選。

（2）若某種微生物沒(méi)有明顯表型特征時(shí)，就無(wú)法通過(guò)上述方法篩選，科研人員通過(guò)圖所示的流程進(jìn)行篩選。

①據(jù)圖分析，科研人員利用目標(biāo)微生物編碼膜蛋白的____________________，構(gòu)建表達(dá)載體，并導(dǎo)入用________________處理的大腸桿菌細(xì)胞中，獲取大量膜蛋白。

②用獲取的膜蛋白作為抗原，利用兔子制備單克隆抗體的具體流程是：_____。

（3）將上述帶有熒光的單克隆抗體與待分離微生物群體混合，目的是_____目標(biāo)微生物。 用流式細(xì)胞儀分離不同熒光強(qiáng)度的細(xì)胞，結(jié)果如圖2所示。對(duì)結(jié)果進(jìn)行比較，應(yīng)從區(qū)域_____（選填圖中數(shù)字）的細(xì)胞中篩選目標(biāo)微生物。

（1）細(xì)胞生命活動(dòng)過(guò)程中產(chǎn)生衰老、受損的細(xì)胞器或功能喪失的蛋白復(fù)合物時(shí)，B蛋白在細(xì)胞內(nèi)招募L-II蛋白（由細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中的L-I蛋白轉(zhuǎn)變而來(lái)）等蛋白，啟動(dòng)自噬過(guò)程，形成自噬體，自噬體最終融入_____中降解，這有利于保持細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能的_____。

（2）科研人員用MV、CQ （自噬抑制劑）和RAPA（自噬誘導(dǎo)劑）處理胰腺癌細(xì)胞，96 h后 測(cè)定細(xì)胞內(nèi)B蛋白、L-II蛋白、L-I蛋白含量，并以細(xì)胞內(nèi)恒定表達(dá)的p-actin蛋白含量作為參照，得到下表所示結(jié)果。

①本實(shí)驗(yàn)中，作為對(duì)照組的是_____組。

②L-II蛋白是定位在自噬體膜上的蛋白，在自噬過(guò)程結(jié)束時(shí)會(huì)重新轉(zhuǎn)變成l- I蛋白， 因而“L-II蛋白/L-I蛋白”可作為_____的一個(gè)觀測(cè)指標(biāo)。

③比較1、2、3組結(jié)果，推測(cè)自噬過(guò)程_____（選填“促進(jìn)”或“抑制”）癌細(xì)胞增殖，從物質(zhì)與能量的角度分析，其原因是_____。

（3）綜合上述研究，請(qǐng)寫(xiě)出MV影響胰腺癌細(xì)胞增殖的機(jī)制：_____。MV雖有抗胰腺癌的應(yīng)用前景，但目前研究結(jié)果在很多方面尚不足以支持臨床醫(yī)學(xué)應(yīng)用，請(qǐng)闡述理由：_____。

A.該實(shí)驗(yàn)不能選取綠色植物成熟的葉肉細(xì)胞進(jìn)行

B.若乙溶液的濃度稍增大，則曲線(xiàn)中b點(diǎn)左移

C.兩條曲線(xiàn)的差異僅是由甲、乙溶液濃度不同導(dǎo)致的

D.6 min時(shí)取出兩個(gè)細(xì)胞用顯微鏡觀察，均可看到質(zhì)壁分離現(xiàn)象

A.該載體最可能為環(huán)形DNA分子

B.兩種限制酶在載體上各有一個(gè)酶切位點(diǎn)

C.限制酶R1與R2的切點(diǎn)最短相距約200 bp

D.限制酶作用位點(diǎn)會(huì)導(dǎo)致氫鍵和肽鍵斷裂

A. 右側(cè)液面高度下降；胰島素 B. 兩側(cè)液面高度不變；蔗糖酶

C. 兩側(cè)液面高度不變；麥芽糖酶 D. 兩側(cè)液面高度不變；蒸餾水

A. 某種藥物只抑制圖1中的c而對(duì)a無(wú)影響，說(shuō)明該藥物抑制了c運(yùn)輸過(guò)程中載體的作用

B. 圖2表示的植物細(xì)胞可能發(fā)生了質(zhì)壁分離和復(fù)原的過(guò)程，此時(shí)植物細(xì)胞所處的溶液一定是KNO3溶液

C. 圖2中A點(diǎn)細(xì)胞失水量最大，此時(shí)細(xì)胞的吸水能力最強(qiáng)

D. 若溫度降低，對(duì)圖1中的a,b,c都會(huì)造成影響

A.已分化的小鼠體細(xì)胞在特定條件下可恢復(fù)全能性

B.四倍體囊胚由于染色體數(shù)目變異而無(wú)法發(fā)育為成體

C.本實(shí)驗(yàn)使用到體外受精和胚胎分割移植等技術(shù)

D.誘導(dǎo)多能干細(xì)胞技術(shù)可應(yīng)用于組織器官移植