下表中列出了幾種限制酶識(shí)別序列及其切割位點(diǎn)，圈l、圈2中箭頭表示相關(guān)限制酶的酶切位點(diǎn)。請(qǐng)回答下列問題：

（1）一個(gè)圖1所示的質(zhì)粒分子經(jīng)Sma Ⅰ切割前后，分別含有______________________個(gè)游離的磷酸基團(tuán)。

（2）若對(duì)圖中質(zhì)粒進(jìn)行改造，插入的SmaⅠ酶切位點(diǎn)越多，質(zhì)粒的熱穩(wěn)定性越______________________。

（3）用圖中的質(zhì)粒和外源DNA構(gòu)建重組質(zhì)粒，不能使用Srna Ⅰ切割，原因是______________________。

（4）與只使用EcoR I相比較，使用BamH Ⅰ和Hind Ⅲ兩種限制酶同時(shí)處理質(zhì)粒、外源DNA的優(yōu)點(diǎn)在于可以防止______________________。

（5）為了獲取重組質(zhì)粒，將切割后的質(zhì)粒與目的基因片段混合，并加入______________________酶。

（6）重組質(zhì)粒中抗生素抗性基因的作用是為了______________________。

（7）為了從cDNA文庫(kù)中分離獲取蔗糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因，將重組質(zhì)粒導(dǎo)入喪失吸收蔗糖能力的大腸桿菌突變體，然后在______________________的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，以完成目的基因表達(dá)的初步檢測(cè)。

下圖是從酵母菌獲取某植物需要的某種酶基因的流程，結(jié)合所學(xué)知識(shí)及相關(guān)信息回答下列問題：

（1）圖中cDNA文庫(kù)___________基因組文庫(kù)（填“大于”、“等于”或者“小于”）。

（2）①過程提取的DNA需要______________的切割，B過程是_____________。

（3）為在短時(shí)間內(nèi)大量獲得目的基因，可用______________________擴(kuò)增的方法，其原理是______________________。

（4）目的基因獲取之后，需要進(jìn)行______________________，其組成必須有______________________以及標(biāo)記基因等，此步驟是基因工程的核心。

（5）將該目的基因?qū)�入某雙子葉植物細(xì)胞，常采用的方法是______________________，其能否在此植物體內(nèi)穩(wěn)定遺傳的關(guān)鍵是______________________，可以用______________________技術(shù)進(jìn)行檢測(cè)。

某研究所的研究人員將生長(zhǎng)激素基因通過質(zhì)粒介導(dǎo)進(jìn)入大腸桿菌細(xì)胞內(nèi)，來表達(dá)產(chǎn)生生長(zhǎng)激素。已知質(zhì)粒中存在兩個(gè)抗性基因：A是抗鏈霉素基因，B是抗氨芐青霉素基因，且目的基因要插入到基因B中，而大腸桿菌不帶有任何抗性基因。下列敘述正確的是

A．導(dǎo)入大腸桿菌的質(zhì)粒一定為重組質(zhì)粒

B．RNA聚合酶是構(gòu)建該重組質(zhì)粒必需的工具酶

C．可用含氨芐青霉素的培養(yǎng)基檢測(cè)大腸桿菌中是否導(dǎo)入了重組質(zhì)粒

D．在含氨芐青霉素培養(yǎng)基中不能生長(zhǎng)，但在含鏈霉素培養(yǎng)基中能生長(zhǎng)的可能是符合生產(chǎn)要求的大腸桿菌

某生物興趣小組開展DNA粗提取的相關(guān)探究活動(dòng)。具體步驟如下：

材料處理：稱取新鮮的花菜、辣椒和蒜黃各2份，每份l0g。剪碎后分成兩組，一組置于20℃、另一組置于一20℃條件下保存24h。

DNA粗提取：

第一步：將上述材料分別放入研缽中，各加入l5mL研磨液，充分研磨。用兩層紗布過濾。取濾液備用。

第二步：先向6只小燒杯中分別注入10mL濾液，再加入20mL體積分?jǐn)?shù)為95％的冷酒精溶液，然后用玻璃棒緩緩地向一個(gè)方向攪拌，使絮狀物纏繞在玻璃棒上。

第三步：取6支試管，分別加入等量的2mol／LNaCl溶液溶解上述絮狀物。

DNA檢測(cè)：在上述試管中各加入4mL二苯胺試劑�；旌暇鶆蚝螅�置于沸水中加熱5min，待試管冷卻后比較溶液的顏色深淺,結(jié)果如下表。

分析上述實(shí)驗(yàn)過程，回答下列問題：

(1)該探究性實(shí)驗(yàn)課題名稱是__________________________________。

(2)第二步中”緩緩地”攪拌，這是為了減少__________________________________。

(3)根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果，得出結(jié)論并分析。

①結(jié)論1：與20℃相比，相同實(shí)驗(yàn)材料在-20℃條件下保存，DNA的提取量較多。

結(jié)論2：___________________________________________________。

②針對(duì)結(jié)論I．請(qǐng)?zhí)岢龊侠淼慕忉專?u>__________________________________。

(4)氯仿密度大于水，能使蛋白質(zhì)變性沉淀，與水和DNA均不相溶，且對(duì)DNA影響極小。為了進(jìn)一步提高DNA純度，依據(jù)氯仿的特性．在DNA粗提取第三步的基礎(chǔ)上繼續(xù)操作的步驟是：___________________________________________________，然后用體積分?jǐn)?shù)為95％的冷酒精溶液使DNA析出。

PCR（多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)）技術(shù)是一項(xiàng)在生物體外復(fù)制特定的DNA片段的核酸合成技術(shù)，下圖表示合成過程，請(qǐng)據(jù)圖分析回答：

（1）A過程高溫使DNA變性解旋，對(duì)該過程的原理敘述，正確的是 _________________。

A.該過程用到耐高溫的解旋酶破壞氫鍵

B.該過程用到限制酶破壞磷酸二酯鍵

C.該過程不需要解旋酶的作用

D.該過程與人體細(xì)胞的過程完全相同

（2）C過程要用到的酶是。這種酶在高溫下仍保持活性，因此在PCR擴(kuò)增時(shí)可以_________________加入,_________________（需要/不需要）再添加。PCR反應(yīng)除提供酶外，還需要滿足的基本條件有:_________________________________。

（3）如果把模板DNA的兩條鏈用¹⁵N標(biāo)記，游離的脫氧核苷酸不做標(biāo)記，控制“94℃~55℃~72℃”溫度循環(huán)3次，則在形成的子代DNA中含有¹⁵N標(biāo)記的DNA占_________________。

（4）如果模板DNA分子共有a個(gè)堿基對(duì)，其中含有胞嘧啶m個(gè)，則該DNA復(fù)制10次，需要加入胸腺嘧啶脫氧核苷酸個(gè)_________________。

（5）PCR中由堿基錯(cuò)配引起的變異屬于_________________。假設(shè)對(duì)一個(gè)DNA進(jìn)行擴(kuò)增，第一次循環(huán)時(shí)某一條模板鏈上發(fā)生堿基錯(cuò)配，則擴(kuò)增若干次后檢測(cè)所用DNA的擴(kuò)增片段，與原DNA相應(yīng)片段相同的占_________________。

下列關(guān)于DNA和蛋白質(zhì)提取與分離實(shí)驗(yàn)的敘述，正確的有

A．提取細(xì)胞中的DNA和蛋白質(zhì)都需用蒸餾水漲破細(xì)胞

B．用不同濃度NaCl溶液反復(fù)溶解與析出DNA可去除蛋白質(zhì)

C．蛋白質(zhì)提取和分離過程中進(jìn)行透析可去除溶液中的DNA

D．蛋白質(zhì)和DNA都可以用電泳的方法進(jìn)行分離純化

Ⅰ.下面圖一為胡蘿卜素粗品鑒定裝置示意圖，圖二為胡蘿卜素的紙層析結(jié)果示意圖，請(qǐng)據(jù)圖回答下列問題。

（1）圖一中b的名稱是_________________，a的作用是_________________，e為_________________，對(duì)于e實(shí)驗(yàn)時(shí)應(yīng)注意_________________，f為_________________，常用_________________，如果層析液沒及e會(huì)導(dǎo)致_________________。

（2）圖二中A、B、C、D四點(diǎn)中，屬于標(biāo)準(zhǔn)樣品的樣點(diǎn)是_____，屬于提取樣品的樣點(diǎn)是_____。基線一般距底邊________cm；在圖中的層析譜中，①代表的物質(zhì)是_______，②代表的物質(zhì)是___________。

Ⅱ.為了探討提取溶劑系統(tǒng)對(duì)類胡蘿卜素提取的影響，科研人員分別用六種不同的溶劑系統(tǒng)按相同的提取步驟進(jìn)行提取，比較類胡蘿卜素的含量，以尋找不同植物品種的最佳的提取溶劑，請(qǐng)據(jù)圖表作答：。

（1）表中所用的提取溶劑，均為有機(jī)溶劑，原因是____________。

（2）在本實(shí)驗(yàn)中，提取步驟必需相同，理由：________________。

（3）請(qǐng)依據(jù)圖一，寫出它的實(shí)驗(yàn)課題：______________________________，其實(shí)驗(yàn)自變量為__________，因變量為___________。

（4）從圖一和圖二及兩者比較中，你能得出哪兩個(gè)結(jié)論？_________________________。

下列是與芳香油提取有關(guān)的問題，請(qǐng)回答：

（1）玫瑰精油適合用水蒸氣蒸餾法提取，其理由是玫瑰精油具有__________________________________的性質(zhì)。蒸餾時(shí)收集的蒸餾液_________________（是、不是）純的玫瑰精油，原因是__________________________________。

（2）當(dāng)蒸餾瓶中的水和原料量一定時(shí)，蒸餾過程中，影響精油提取量的主要因素有蒸餾時(shí)間和_________________。當(dāng)原料量等其他條件一定時(shí)，提取量隨蒸餾時(shí)間的變化趨勢(shì)是_________________。

（3）如果蒸餾過程中不進(jìn)行冷卻，則精油的提取量會(huì)__________________________________，原因是__________________________________。

（4）密封不嚴(yán)的瓶裝玫瑰精油保存時(shí)最好放在溫度__________________________________的地方，目的是______________________________________。

(5)某植物花中精油的相對(duì)含量隨花的不同生長(zhǎng)發(fā)育時(shí)期的變化趨勢(shì)如下圖所示。提取精油時(shí)采摘花的最合適時(shí)間為_________________天左右。

（6）從薄荷葉中提取薄荷油時(shí)_________________（能、不能）采用從玫瑰花中提取玫瑰精油的方法，理由是___________________________________________________。

請(qǐng)回答下列與實(shí)驗(yàn)室提取芳香油有關(guān)的問題：

（1）植物芳香油的提取可采用的方法有壓榨法、_________________和_________________。

（2）芳香油溶解性的特點(diǎn)是不溶于_________________，易溶于__________________________________，因此可用_________________作為提取劑來提取芳香油。

（3）橘子果實(shí)含有芳香油，通�？捎�_________________作為材料提取芳香油，而且提取時(shí)往往選用新鮮的材料，理由是_________________。

　　（4）對(duì)材料壓榨后可得到糊狀液體，為除去其中的固體物獲得乳狀液可采用的方法是___________________________________________________。

　　（5）得到的乳狀液加入氯化鈉并放置一段時(shí)間后，芳香油將分布于液體的_________________層，原因是_________________。加入氯化鈉的作用是__________________________________。

　�。�6）從乳狀液中分離得到的芳香油中要加入無水硫酸鈉，此劑的作用是_________________。

葡萄發(fā)酵可產(chǎn)生葡萄酒，請(qǐng)利用相關(guān)的知識(shí)回答問題：

（1）利用葡萄制作葡萄酒的過程中，發(fā)揮作用的微生物是＿＿＿＿＿＿＿＿。

（2）該微生物通過無氧呼吸可分解＿＿＿＿＿，產(chǎn)生的終產(chǎn)物是＿＿＿＿和＿＿＿＿。

（3）甲、乙、丙三位同學(xué)將葡萄榨成汁后分別裝入相應(yīng)的發(fā)酵瓶中，在溫度等適宜的條件下進(jìn)行發(fā)酵，如圖所示。發(fā)酵過程中，每隔一段時(shí)間均需排氣一次。據(jù)圖分析，甲和丙同學(xué)的操作有誤，其中甲同學(xué)的錯(cuò)誤是＿＿＿＿＿＿，導(dǎo)致發(fā)酵中出現(xiàn)的主要異常現(xiàn)象是＿＿＿＿＿＿＿＿。丙同學(xué)的錯(cuò)誤是＿＿＿＿＿＿＿，導(dǎo)致發(fā)酵中出現(xiàn)的主要異常現(xiàn)象是＿＿＿＿＿＿＿＿＿。上述發(fā)酵過程結(jié)束后，甲、乙、丙同學(xué)實(shí)際得到的發(fā)酵產(chǎn)品依次是＿＿＿＿、＿＿＿＿、＿＿＿＿。

（4）在上述制作葡萄酒的過程中，假設(shè)乙同學(xué)的某一步驟操作錯(cuò)誤導(dǎo)致發(fā)酵瓶瓶塞被沖開，該操作錯(cuò)誤是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。