下表中列出了幾種限制酶識別序列及其切割位點，圈l、圈2中箭頭表示相關限制酶的酶切位點。請回答下列問題：

（1）一個圖1所示的質粒分子經(jīng)Sma Ⅰ切割前后，分別含有______________________個游離的磷酸基團。

（2）若對圖中質粒進行改造，插入的SmaⅠ酶切位點越多，質粒的熱穩(wěn)定性越______________________。

（3）用圖中的質粒和外源DNA構建重組質粒，不能使用Srna Ⅰ切割，原因是______________________。

（4）與只使用EcoR I相比較，使用BamH Ⅰ和Hind Ⅲ兩種限制酶同時處理質粒、外源DNA的優(yōu)點在于可以防止______________________。

（5）為了獲取重組質粒，將切割后的質粒與目的基因片段混合，并加入______________________酶。

（6）重組質粒中抗生素抗性基因的作用是為了______________________。

（7）為了從cDNA文庫中分離獲取蔗糖轉運蛋白基因，將重組質粒導入喪失吸收蔗糖能力的大腸桿菌突變體，然后在______________________的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，以完成目的基因表達的初步檢測。

下圖是從酵母菌獲取某植物需要的某種酶基因的流程，結合所學知識及相關信息回答下列問題：

（1）圖中cDNA文庫___________基因組文庫（填“大于”、“等于”或者“小于”）。

（2）①過程提取的DNA需要______________的切割，B過程是_____________。

（3）為在短時間內大量獲得目的基因，可用______________________擴增的方法，其原理是______________________。

（4）目的基因獲取之后，需要進行______________________，其組成必須有______________________以及標記基因等，此步驟是基因工程的核心。

（5）將該目的基因導入某雙子葉植物細胞，常采用的方法是______________________，其能否在此植物體內穩(wěn)定遺傳的關鍵是______________________，可以用______________________技術進行檢測。

某研究所的研究人員將生長激素基因通過質粒介導進入大腸桿菌細胞內，來表達產(chǎn)生生長激素。已知質粒中存在兩個抗性基因：A是抗鏈霉素基因，B是抗氨芐青霉素基因，且目的基因要插入到基因B中，而大腸桿菌不帶有任何抗性基因。下列敘述正確的是

A．導入大腸桿菌的質粒一定為重組質粒

B．RNA聚合酶是構建該重組質粒必需的工具酶

C．可用含氨芐青霉素的培養(yǎng)基檢測大腸桿菌中是否導入了重組質粒

D．在含氨芐青霉素培養(yǎng)基中不能生長，但在含鏈霉素培養(yǎng)基中能生長的可能是符合生產(chǎn)要求的大腸桿菌

某生物興趣小組開展DNA粗提取的相關探究活動。具體步驟如下：

材料處理：稱取新鮮的花菜、辣椒和蒜黃各2份，每份l0g。剪碎后分成兩組，一組置于20℃、另一組置于一20℃條件下保存24h。

DNA粗提�。�

第一步：將上述材料分別放入研缽中，各加入l5mL研磨液，充分研磨。用兩層紗布過濾。取濾液備用。

第二步：先向6只小燒杯中分別注入10mL濾液，再加入20mL體積分數(shù)為95％的冷酒精溶液，然后用玻璃棒緩緩地向一個方向攪拌，使絮狀物纏繞在玻璃棒上。

第三步：取6支試管，分別加入等量的2mol／LNaCl溶液溶解上述絮狀物。

DNA檢測：在上述試管中各加入4mL二苯胺試劑�；旌暇鶆蚝�，置于沸水中加熱5min，待試管冷卻后比較溶液的顏色深淺,結果如下表。

分析上述實驗過程，回答下列問題：

(1)該探究性實驗課題名稱是__________________________________。

(2)第二步中”緩緩地”攪拌，這是為了減少__________________________________。

(3)根據(jù)實驗結果，得出結論并分析。

①結論1：與20℃相比，相同實驗材料在-20℃條件下保存，DNA的提取量較多。

結論2：___________________________________________________。

②針對結論I．請?zhí)岢龊侠淼慕忉專?u>__________________________________。

(4)氯仿密度大于水，能使蛋白質變性沉淀，與水和DNA均不相溶，且對DNA影響極小。為了進一步提高DNA純度，依據(jù)氯仿的特性．在DNA粗提取第三步的基礎上繼續(xù)操作的步驟是：___________________________________________________，然后用體積分數(shù)為95％的冷酒精溶液使DNA析出。

PCR（多聚酶鏈式反應）技術是一項在生物體外復制特定的DNA片段的核酸合成技術，下圖表示合成過程，請據(jù)圖分析回答：

（1）A過程高溫使DNA變性解旋，對該過程的原理敘述，正確的是 _________________。

A.該過程用到耐高溫的解旋酶破壞氫鍵

B.該過程用到限制酶破壞磷酸二酯鍵

C.該過程不需要解旋酶的作用

D.該過程與人體細胞的過程完全相同

（2）C過程要用到的酶是。這種酶在高溫下仍保持活性，因此在PCR擴增時可以_________________加入,_________________（需要/不需要）再添加。PCR反應除提供酶外，還需要滿足的基本條件有:_________________________________。

（3）如果把模板DNA的兩條鏈用¹⁵N標記，游離的脫氧核苷酸不做標記，控制“94℃~55℃~72℃”溫度循環(huán)3次，則在形成的子代DNA中含有¹⁵N標記的DNA占_________________。

（4）如果模板DNA分子共有a個堿基對，其中含有胞嘧啶m個，則該DNA復制10次，需要加入胸腺嘧啶脫氧核苷酸個_________________。

（5）PCR中由堿基錯配引起的變異屬于_________________。假設對一個DNA進行擴增，第一次循環(huán)時某一條模板鏈上發(fā)生堿基錯配，則擴增若干次后檢測所用DNA的擴增片段，與原DNA相應片段相同的占_________________。

下列關于DNA和蛋白質提取與分離實驗的敘述，正確的有

A．提取細胞中的DNA和蛋白質都需用蒸餾水漲破細胞

B．用不同濃度NaCl溶液反復溶解與析出DNA可去除蛋白質

C．蛋白質提取和分離過程中進行透析可去除溶液中的DNA

D．蛋白質和DNA都可以用電泳的方法進行分離純化

Ⅰ.下面圖一為胡蘿卜素粗品鑒定裝置示意圖，圖二為胡蘿卜素的紙層析結果示意圖，請據(jù)圖回答下列問題。

（1）圖一中b的名稱是_________________，a的作用是_________________，e為_________________，對于e實驗時應注意_________________，f為_________________，常用_________________，如果層析液沒及e會導致_________________。

（2）圖二中A、B、C、D四點中，屬于標準樣品的樣點是_____，屬于提取樣品的樣點是_____。基線一般距底邊________cm；在圖中的層析譜中，①代表的物質是_______，②代表的物質是___________。

Ⅱ.為了探討提取溶劑系統(tǒng)對類胡蘿卜素提取的影響，科研人員分別用六種不同的溶劑系統(tǒng)按相同的提取步驟進行提取，比較類胡蘿卜素的含量，以尋找不同植物品種的最佳的提取溶劑，請據(jù)圖表作答：。

（1）表中所用的提取溶劑，均為有機溶劑，原因是____________。

（2）在本實驗中，提取步驟必需相同，理由：________________。

（3）請依據(jù)圖一，寫出它的實驗課題：______________________________，其實驗自變量為__________，因變量為___________。

（4）從圖一和圖二及兩者比較中，你能得出哪兩個結論？_________________________。

下列是與芳香油提取有關的問題，請回答：

（1）玫瑰精油適合用水蒸氣蒸餾法提取，其理由是玫瑰精油具有__________________________________的性質。蒸餾時收集的蒸餾液_________________（是、不是）純的玫瑰精油，原因是__________________________________。

（2）當蒸餾瓶中的水和原料量一定時，蒸餾過程中，影響精油提取量的主要因素有蒸餾時間和_________________。當原料量等其他條件一定時，提取量隨蒸餾時間的變化趨勢是_________________。

（3）如果蒸餾過程中不進行冷卻，則精油的提取量會__________________________________，原因是__________________________________。

（4）密封不嚴的瓶裝玫瑰精油保存時最好放在溫度__________________________________的地方，目的是______________________________________。

(5)某植物花中精油的相對含量隨花的不同生長發(fā)育時期的變化趨勢如下圖所示。提取精油時采摘花的最合適時間為_________________天左右。

（6）從薄荷葉中提取薄荷油時_________________（能、不能）采用從玫瑰花中提取玫瑰精油的方法，理由是___________________________________________________。

請回答下列與實驗室提取芳香油有關的問題：

（1）植物芳香油的提取可采用的方法有壓榨法、_________________和_________________。

（2）芳香油溶解性的特點是不溶于_________________，易溶于__________________________________，因此可用_________________作為提取劑來提取芳香油。

（3）橘子果實含有芳香油，通�？捎�_________________作為材料提取芳香油，而且提取時往往選用新鮮的材料，理由是_________________。

　　（4）對材料壓榨后可得到糊狀液體，為除去其中的固體物獲得乳狀液可采用的方法是___________________________________________________。

　　（5）得到的乳狀液加入氯化鈉并放置一段時間后，芳香油將分布于液體的_________________層，原因是_________________。加入氯化鈉的作用是__________________________________。

　�。�6）從乳狀液中分離得到的芳香油中要加入無水硫酸鈉，此劑的作用是_________________。

葡萄發(fā)酵可產(chǎn)生葡萄酒，請利用相關的知識回答問題：

（1）利用葡萄制作葡萄酒的過程中，發(fā)揮作用的微生物是＿＿＿＿＿＿＿＿。

（2）該微生物通過無氧呼吸可分解＿＿＿＿＿，產(chǎn)生的終產(chǎn)物是＿＿＿＿和＿＿＿＿。

（3）甲、乙、丙三位同學將葡萄榨成汁后分別裝入相應的發(fā)酵瓶中，在溫度等適宜的條件下進行發(fā)酵，如圖所示。發(fā)酵過程中，每隔一段時間均需排氣一次。據(jù)圖分析，甲和丙同學的操作有誤，其中甲同學的錯誤是＿＿＿＿＿＿，導致發(fā)酵中出現(xiàn)的主要異�，F(xiàn)象是＿＿＿＿＿＿＿＿。丙同學的錯誤是＿＿＿＿＿＿＿，導致發(fā)酵中出現(xiàn)的主要異�，F(xiàn)象是＿＿＿＿＿＿＿＿＿。上述發(fā)酵過程結束后，甲、乙、丙同學實際得到的發(fā)酵產(chǎn)品依次是＿＿＿＿、＿＿＿＿、＿＿＿＿。

（4）在上述制作葡萄酒的過程中，假設乙同學的某一步驟操作錯誤導致發(fā)酵瓶瓶塞被沖開，該操作錯誤是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。