退火溫度是影響PCR特異性的較重要的因素。變性后溫度快速冷卻至40~60 ℃,可使引物和模板發(fā)生結(jié)合。PCR的結(jié)果可不考慮原來解旋開的兩個DNA模板鏈的重新結(jié)合,原因不包括( )

A.由于模板DNA比引物復(fù)雜得多

B.引物和模板之間的碰撞結(jié)合機會遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于模板互補鏈之間的碰撞

C.加入引物的量足夠多而模板鏈數(shù)量少

D.模板鏈加熱解旋已經(jīng)變性不可能再次結(jié)合

PCR過程與細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制過程相比,主要有兩點不同,它們是( )

①PCR過程需要的引物是人工合成的單鏈DNA或RNA

②PCR過程不需要DNA聚合酶

③PCR過程中DNA的解旋不依靠解旋酶,而是通過對反應(yīng)溫度的控制來實現(xiàn)的

④PCR過程中,DNA不需要解旋,直接以雙鏈DNA為模板進(jìn)行復(fù)制

A.③④B.①② C.①③D.②④

PCR利用了DNA熱變性的原理,PCR儀實際上也是一種能自動調(diào)控溫度的儀器,對PCR過程中“溫度的控制”的說法中錯誤的是( )

A.酶促反應(yīng)需要高的溫度,是為了確保模板是單鏈

B.延伸的溫度必須大于退火溫度,而小于變性溫度

C.DNA聚合酶不具熱變性,要用耐高溫的聚合酶

D.DNA解旋酶不具熱變性,為了確保模板是單鏈

多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)是一種體外擴增DNA片段的技術(shù)�？捎糜谶z傳疾病的診斷、刑偵破案、古生物學(xué)、基因克隆和DNA序列測定等方面�；卮鹨韵聠栴}:

(1)細(xì)胞內(nèi)DNA復(fù)制過程中,引物的作用是 ,而且DNA復(fù)制的前提是 。

(2)PCR利用了 原理,可通過控制溫度來控制雙鏈的解旋與結(jié)合。

(3)PCR技術(shù)用到的酶是 ,與細(xì)胞內(nèi)DNA復(fù)制時發(fā)揮相同作用的酶相比區(qū)別在于 。

(4)下面表格是DNA體內(nèi)復(fù)制與PCR反應(yīng)的部分比較結(jié)果。通過比較分析,請推導(dǎo)出PCR反應(yīng)合成DNA子鏈時能量來源于 。

(5)假如PCR反應(yīng)所用的引物含有放射性、模板不具有放射性,且引物不被切除,則經(jīng)過n次循環(huán),具有放射性的脫氧核苷酸鏈占總鏈數(shù)的比值為 。

以下關(guān)于豬血紅蛋白提純的描述,不正確的是( )

A.洗滌紅細(xì)胞時,使用生理鹽水可防止紅細(xì)胞破裂

B.豬成熟紅細(xì)胞中缺少細(xì)胞器和細(xì)胞核,提純時雜蛋白較少

C.血紅蛋白的顏色可用于凝膠色譜法分離過程的監(jiān)測

D.在凝膠色譜法分離過程中,血紅蛋白比分子量較少的雜蛋白移動慢

凝膠色譜法分離蛋白質(zhì)時,凝膠的種類較多,但其作用的共同點是( )

A.改變蛋白質(zhì)分子通過凝膠時的路徑

B.吸附一部分蛋白質(zhì),從而影響蛋白質(zhì)分子的移動速度

C.將酶或細(xì)胞固定在細(xì)胞中

D.與蛋白質(zhì)分子進(jìn)行化學(xué)反應(yīng),從而影響其移動速率

下列關(guān)于蛋白質(zhì)的提取與分離的敘述正確的是( )

A.在凝膠色譜柱內(nèi),相對分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)路程較長,但移動速度較快

B.從凝膠色譜柱中最后分離出來的是相對分子質(zhì)量較小的蛋白質(zhì)

C.蛋白質(zhì)的純化使用最多的方法是SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳法

D.分離血紅蛋白溶液時,離心管的第三層是脂類物質(zhì)

在蛋白質(zhì)的提取和分離實驗中,下列對樣品處理過程中,正確的是( )

A.洗滌紅細(xì)胞的目的是去除血漿中的葡萄糖、無機鹽

B.洗滌時離心速度過小,時間過短,白細(xì)胞等會沉淀,達(dá)不到分離的效果

C.洗滌過程選用0.1%的生理鹽水

D.透析的目的是去除樣品中相對分子質(zhì)量較小的雜質(zhì)

如圖表示血紅蛋白提取和分離的部分實驗裝置,請回答下列問題:

(1)血紅蛋白是人和其他脊椎動物紅細(xì)胞的主要組成成分,其在紅細(xì)胞中的作用體現(xiàn)了蛋白質(zhì)具有 功能。我們通常選用豬、牛、羊等動物的血液進(jìn)行實驗,實驗前取新鮮的血液,要切記在采血容器中預(yù)先加入檸檬酸鈉,取血回來,馬上進(jìn)行離心,收集血紅蛋白溶液。加入檸檬酸鈉的目的是  。

(2)甲裝置中,B是血紅蛋白溶液,則A是 ;乙裝置中,C溶液的作用是 。

(3)甲裝置用于 ,目的是 。用乙裝置分離蛋白質(zhì)的方法叫 ,是根據(jù)

分離蛋白質(zhì)的有效方法。

在操作中加樣(下圖)的正確順序是 。

(4)最后經(jīng)SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳進(jìn)行 。

紅細(xì)胞含有大量血紅蛋白,紅細(xì)胞的機能主要是由血紅蛋白完成的。我們可以選用豬、牛、羊或其他脊椎動物的血液進(jìn)行實驗,來提取和分離血紅蛋白,請回答下列有關(guān)問題:

(1)分離蛋白質(zhì)分子的一種常用方法是凝膠色譜法,也叫做 ,是根據(jù) 分離蛋白質(zhì)的有效方法。

(2)血紅蛋白提取和分離的程序可分為 、 、 和純度鑒定。

(3)洗滌紅細(xì)胞的目的是 ,以利于后續(xù)步驟的分離強化。采集的血樣要及時分離紅細(xì)胞,分離時采用低速短時間 ,然后用膠頭吸管吸出上層透明的 ,將下層暗紅色的紅細(xì)胞液體倒入燒杯,再加入 洗滌,如此重復(fù),直至上清液中沒有黃色。

(4)將洗滌好的紅細(xì)胞倒入燒杯中,加入 和 充分?jǐn)嚢?紅細(xì)胞破裂,釋放出血紅蛋白。