Question

【題目】磷是植物生長的重要營養(yǎng)元素之一，我國74%的耕地土壤中缺磷，而施入土壤的磷肥只有5%—25%的利用率，大部分磷都成了不能吸收的難溶性磷酸鹽。為了從土壤中篩選出能夠?qū)㈦y溶性磷酸鹽轉(zhuǎn)化為植物能吸收的可溶性磷的優(yōu)良解磷菌株，以便將其添加到有機(jī)肥中，改善植物磷元素供應(yīng)�？蒲腥藛T進(jìn)行如下實(shí)驗(yàn)：

實(shí)驗(yàn)原理：固體培養(yǎng)基中難溶性磷酸鹽在微生物的作用下溶解，會在菌落周圍形成透明圈（如右圖），透明圈直徑（D）與菌落直徑（d）的比值（D/d）代表微生物溶解磷的能力大小。

實(shí)驗(yàn)步驟：

步驟1取某地區(qū)土樣5g制得土壤溶液后稀釋，取稀釋液lmL接種到基礎(chǔ)培養(yǎng)基A上，在適宜溫度下培養(yǎng)72h。

步驟2 在基礎(chǔ)培養(yǎng)基A上用接種環(huán)挑取代表性菌落再次接種，培養(yǎng)34d后觀察菌落特征和透明圈的大小，初步篩選出三種優(yōu)良解磷菌株（如右表）。

請分析回答下列問題：

（1）土壤中的磷以_______________形式被植物細(xì)胞吸收，吸收后可用于合成_______________ （填出

3種含磷的有機(jī)物）。

（2）實(shí)驗(yàn)中所用的固體培養(yǎng)基往往是在液體培養(yǎng)基中加人凝固劑_______________制備的，培養(yǎng)基上出現(xiàn)的單一菌落可以看做一個(gè)_______________（填“種群”、“群落”、“生態(tài)系統(tǒng)”）。

（3）為了篩選出所需菌株，培養(yǎng)基中唯一的磷源應(yīng)該是_______________，步驟1中接種方法是_______________，步驟2中接種環(huán)的滅菌方法是_______________。

（4）根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以確定溶解磷能力最強(qiáng)的菌株是_______________。為了保持所得菌種的純凈，需要進(jìn)行菌種的保藏。臨時(shí)保藏時(shí)，要將菌種接種到試管的_______________ 格養(yǎng)基上，長成菌落后放人4℃的冰箱中；長期保存時(shí)可以采用_______________的方法。

Answer 1

【答案】

（1）PO43-（HPO42-或H2PO4-）（2分） 核酸、磷脂、ATP、NADPH等（3分。寫出任意三項(xiàng)即可）

（2）瓊脂 種群

（3）難溶性磷酸鹽（2分） 稀釋涂布平板法（2分） 灼燒滅菌

（4）乙 固體斜面 甘油管藏

【解析】

（1）P應(yīng)是以磷酸鹽的方式被吸收的，即PO43-（HPO42-或H2PO4-）。吸收后可以用于合成磷脂、核酸、ATP、NADPH等。

（2）固體培養(yǎng)基需要在液體培養(yǎng)基中加入凝固劑瓊脂。培養(yǎng)基上出現(xiàn)的菌落是位于同一區(qū)域內(nèi)的同種生物的全部個(gè)體，所以是一個(gè)種群。但如果受到雜菌的污染后就是一個(gè)群落。

（3）因?yàn)槭菫榱撕Y選吸收難溶性磷酸鹽的細(xì)菌，所以應(yīng)以難溶性磷酸鹽為唯一的磷源。步驟1是稀釋涂布平板法，步驟2是中對接種環(huán)需要進(jìn)行灼燒滅菌。

（4）溶解磷能力最強(qiáng)的應(yīng)是乙，因?yàn)橥该魅χ睆?/span>（D）與菌落直徑（d）的比值（D/d）代表微生物溶解磷的能力大小。臨時(shí)保藏可以接種到試管的固體鞋面培養(yǎng)基上，長期保存可以使用甘油管藏法進(jìn)行保存。

土壤中分解尿素的細(xì)菌	分解纖維素的微生物
①選擇培養(yǎng)基的成分：尿素作為唯一的氮源 ②鑒定方法：在培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，若指示劑變紅，pH升高，說明細(xì)菌能分解尿素	①選擇培養(yǎng)基的成分：纖維素作為唯一的碳源 ②鑒定方法：剛果紅染色法，即剛果紅與纖維素形成紅色復(fù)合物，當(dāng)纖維素被分解后，培養(yǎng)基出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈