Question

10．Bt毒蛋白基因是從蘇云金芽孢桿菌中分離出來的抗蟲基因，因其表達(dá)產(chǎn)物Bt毒蛋白具有殺蟲效果好、安全、高效等優(yōu)點而成為應(yīng)用最為廣泛的基因．請回答下列有關(guān)轉(zhuǎn)基因抗蟲植物的問題：
（1）要從蘇云金芽孢桿菌中獲取Bt毒蛋白基因，可根據(jù)Bt毒蛋白基因的部分已知序列，設(shè)計特異性引物（對），再利用PCR技術(shù)擴增出Bt毒蛋白基因．
（2）構(gòu)建重組質(zhì)粒時，常用Ti質(zhì)粒作為載體，是因為Ti質(zhì)粒上具有T-DNA（可移動的DNA），它能把目的基因整合到受體細(xì)胞（植株細(xì)胞）的染色體DNA上．這種將基因表達(dá)載體導(dǎo)入受體細(xì)胞的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法．
（3）要確定抗蟲基因?qū)�入棉花�?xì)胞后，是否賦予了棉花抗蟲特性，在個體水平上還需要做抗蟲接種實驗；若要檢測具有抗蟲基因的棉花是否產(chǎn)生了相應(yīng)毒蛋白，在分子水平上可利用抗原-抗體雜交方法進行檢測．
（4）目前，轉(zhuǎn)基因植物的安全性問題是社會爭論的熱點．如有些人認(rèn)為轉(zhuǎn)基因植物的種植會威脅環(huán)境安全；但也有人認(rèn)為轉(zhuǎn)基因植物的種植減少了農(nóng)藥的使用，有利于減輕污染．面對轉(zhuǎn)基因技術(shù)的利弊，我們應(yīng)持有的正確做法是趨利避害，不能因噎廢食．

Answer 1

分析 基因工程的基本操作步驟主要包括四步：①目的基因的獲取②基因表達(dá)載體的構(gòu)建③將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞④目的基因的檢測與鑒定．
目的基因的檢測與鑒定
1．分子水平上的檢測  
  ①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)
  ②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)
  ③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)
2．個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．
（例：用蟲食用棉花，觀察其存活情況，來鑒定棉花是否具有抗蟲特性．）

解答 解：（1）要從蘇云金芽孢桿菌中獲取Bt毒蛋白基因，擴增目的基因利用PCR技術(shù)，該技術(shù)需要引物，可根據(jù)Bt毒蛋白基因的部分已知序列，設(shè)計特異性引物（對）．
（2）構(gòu)建重組質(zhì)粒時，常用Ti質(zhì)粒作為載體，是因為Ti質(zhì)粒上具有T-DNA（可移動的DNA），它能把目的基因整合到受體細(xì)胞（植株細(xì)胞）的染色體DNA上．這種將基因表達(dá)載體導(dǎo)入受體細(xì)胞的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法．
（3）要確定抗蟲基因?qū)�入棉花�?xì)胞后，是否賦予了棉花抗蟲特性，在個體水平上還需要做抗蟲接種實驗；若要檢測具有抗蟲基因的棉花是否產(chǎn)生了相應(yīng)毒蛋白，在分子水平上可利用抗原-抗體雜交方法進行檢測．
（4）如有些人認(rèn)為轉(zhuǎn)基因植物的種植會威脅環(huán)境安全；但也有人認(rèn)為轉(zhuǎn)基因植物的種植減少了農(nóng)藥的使用，有利于減輕污染．面對轉(zhuǎn)基因技術(shù)的利弊，我們應(yīng)持有的正確做法是趨利避害，不能因噎廢食．
故答案為：
（1）引物（對）   PCR
（2）T-DNA（可移動的DNA）　  染色體DNA     農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法
（3）抗蟲接種　   抗原-抗體雜交
（4）農(nóng)藥     趨利避害，不能因噎廢食

點評 本題考查了基因工程的有關(guān)知識，要求考生能夠識記基因工程的操作步驟；區(qū)分識記目的基因?qū)�入受體細(xì)胞的不同方法；掌握目的基因檢測與鑒定的方法；明確抗蟲植物研究的生態(tài)學(xué)意義．