Question

15．如圖是制備分泌抗X抗體過程，根據(jù)圖解回答問題：

（1）給小鼠注射抗原的目的是產(chǎn)生相應(yīng)的（效應(yīng)）B細(xì)胞．
（2）在單克隆抗體制備過程中之所以選用B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞，是因為它們?nèi)诤虾蟮碾s交瘤細(xì)胞具有無限增殖和分泌抗體的特性．
（3）由圖中可看出，單克隆抗體制備過程運用了動物細(xì)胞融合和動物細(xì)胞培養(yǎng)的動物細(xì)胞工程技術(shù)手段，前者常用的誘導(dǎo)劑與植物原生質(zhì)體融合不同的是滅活病毒．
（4）動物細(xì)胞培養(yǎng)液的配方通常含有葡萄糖、氨基酸、無機(jī)鹽、維生素等，與植物細(xì)胞培養(yǎng)基有所不同的是，還含有動物血清．
（5）圖中有兩次篩選過程，其中步驟④的目的是篩選出雜交瘤細(xì)胞，步驟⑤⑥的目的是篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞．
（6）單克隆抗體的特點是特異性強靈敏度高．
（7）請根據(jù)以下信息，設(shè)計一方法（不考慮機(jī)械方法），從培養(yǎng)液中篩選出雜交瘤細(xì)胞．已知細(xì)胞合成DNA有D和S兩條途徑，其中D途徑能被氨基嘌呤阻斷．人淋巴細(xì)胞中有這兩種DNA的合成途徑，但一般不分裂增殖．鼠骨髓瘤細(xì)胞中盡管沒有S途徑，但能不斷分裂增殖，將這兩種細(xì)胞在試管中混合，加聚乙二醇促融，獲得雜種細(xì)胞．方法：培養(yǎng)液中加入氨基嘌呤，收集增殖的細(xì)胞．原理：加入氨基嘌呤后，使D合成途徑阻斷，僅有D合成途徑的骨髓瘤細(xì)胞及其彼此融合的細(xì)胞就不能增殖，但人淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合后的雜種細(xì)胞中可以利用淋巴細(xì)胞中的S途徑合成DNA而增殖．

Answer 1

分析 分析題圖：圖示是制備分泌抗X抗體的過程，其中①表示注射抗原，獲取已經(jīng)免疫的B淋巴細(xì)胞；②表示骨髓瘤細(xì)胞的培養(yǎng)；③表示動物細(xì)胞融合；④表示篩選得到雜交瘤細(xì)胞（去掉未雜交的細(xì)胞以及自身融合的細(xì)胞）；⑤表示篩選出能夠產(chǎn)生特異性抗體的細(xì)胞群；⑥表示動物細(xì)胞培養(yǎng)．

解答 解：（1）首先應(yīng)給小鼠注射抗原，目的是從小鼠的脾臟中取得已免疫的B細(xì)胞（效應(yīng)B細(xì)胞），該細(xì)胞能夠產(chǎn)生抗體．
（2）細(xì)胞來源：B淋巴細(xì)胞能產(chǎn)生特異性抗體，在體外不能無限繁殖；骨髓瘤細(xì)胞：不產(chǎn)生專一性抗體，體外能無限繁殖；雜交瘤細(xì)胞既能無限增殖，又能產(chǎn)生特定抗體的特性．
（3）由圖中可看出，單克隆抗體制備過程運用動物細(xì)胞融合和動物細(xì)胞培養(yǎng)的技術(shù)手段，前者常用的誘導(dǎo)劑與植物原生質(zhì)體融合不同的是滅活病毒．
（4）動物細(xì)胞培養(yǎng)液的配方通常為合成培養(yǎng)基，含有葡萄糖、氨基酸、無機(jī)鹽、維生素等，還應(yīng)該加入動物血清或者血漿．
（5）圖中有兩次篩選過程：步驟④篩選得到雜交瘤細(xì)胞（去掉未雜交的細(xì)胞以及自身融合的細(xì)胞）；步驟⑤⑥篩選出能夠產(chǎn)生特異性抗體的細(xì)胞群．
（6）單克隆抗體與常規(guī)的血清抗體相比，其最大的優(yōu)越性是特異性強，靈敏度高，純度高，可以體外大量制備．
（7）為了篩選出雜交瘤細(xì)胞，除去其他細(xì)胞，可向培養(yǎng)液中加入氨基蝶呤，使D合成途徑阻斷，僅有該合成途徑的骨髓瘤細(xì)胞及其彼此融合的瘤細(xì)胞就不能增殖，但人淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合后的雜種細(xì)胞可以利用淋巴細(xì)胞中的S途徑合成DNA而增殖．
故答案為：
（1）產(chǎn)生相應(yīng)的（效應(yīng)）B細(xì)胞
（2）無限增殖     分泌抗體
（3）動物細(xì)胞融合     動物細(xì)胞培養(yǎng)     滅活病毒
（4）動物血清
（5）雜交瘤細(xì)胞     能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞
（6）特異性強、靈敏度高
（7）培養(yǎng)液中加入氨基嘌呤，收集增殖的細(xì)胞     加入氨基嘌呤后，使D合成途徑阻斷，僅有D合成途徑的骨髓瘤細(xì)胞及其彼此融合的細(xì)胞就不能增殖，但人淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合后的雜種細(xì)胞中可以利用淋巴細(xì)胞中的S途徑合成DNA而增殖

點評 本題考查單克隆抗體制備、動物細(xì)胞培養(yǎng)的相關(guān)知識，意在考查考生的識記能力，識圖能力和理解能力，屬于中等難度題，注意：植物體細(xì)胞雜交和動物細(xì)胞融合的比較：

項目	細(xì)胞融合原理	細(xì)胞融合方法	誘導(dǎo)手段	用途
植物體細(xì)胞雜交	細(xì)胞膜的流動性，（細(xì)胞的全能性）	去除細(xì)胞壁后誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合	離心、電刺激、聚乙二醇等試劑誘導(dǎo)	克服遠(yuǎn)緣雜交不親和，獲得雜交植株
動物細(xì)胞融合	細(xì)胞膜的流動性	使細(xì)胞分散后，誘導(dǎo)細(xì)胞融合	離心、電刺激、聚乙二醇、滅活病毒等試劑誘導(dǎo)	制備單克隆抗體的