Question

10．生物技術(shù)已經(jīng)滲入到了我們生活的方方面面，比如：
（1）目前臨床用的胰島素生效較慢，科學(xué)家將胰島素B鏈的第28和29個(gè)氨基酸調(diào)換順序，成功獲得了速效胰島素．生產(chǎn)速效胰島素，需要對(duì)胰島素基因（胰島素/胰島素mRNA/胰島素基因/胰島）進(jìn)行定向改造．為了將改造后的分子導(dǎo)入受體大腸桿菌，一般需要用Ca²⁺處理大腸桿菌細(xì)胞，使之成為感受態(tài)．
（2）科學(xué)家利用人絨毛膜促性腺激素的單克隆抗體，制作出了早早孕試紙．要獲得人絨毛膜促性腺激素的單克隆抗體，需要先將人絨毛膜促性腺激素注射到小鼠體內(nèi)，培養(yǎng)一段時(shí)間之后，將從小鼠的脾臟中提取出的B淋巴細(xì)胞和小鼠的骨髓瘤細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞融合，獲得雜交細(xì)胞，雜交細(xì)胞經(jīng)特定培養(yǎng)基培養(yǎng)和抗體檢測(cè)等方法篩選后，就能獲得既能持續(xù)增殖，又能產(chǎn)生人絨毛膜促性腺激素的單克隆抗體的細(xì)胞了．
（3）許多不孕不育的夫婦受益于試管嬰兒技術(shù)，在體外受精前，要對(duì)采集到的精子進(jìn)行獲能處理，才能與卵子受精．受精后形成的受精卵要移入發(fā)育培養(yǎng)液中繼續(xù)培養(yǎng)到4細(xì)胞階段再移植到母親體內(nèi)，早期胚胎發(fā)育到囊胚階段的某一時(shí)刻，會(huì)沖破透明帶，稱之為“孵化”．
（4）科學(xué)家在玉米基因組中加入了根瘤菌的基因，用來抑制海藻糖酶的活性，從而獲得了高海藻糖抗旱玉米植株．該培育過程的核心步驟為基因表達(dá)載體的構(gòu)建．將目的基因?qū)�入玉米�?xì)胞最常用的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法．用導(dǎo)入目的基因的玉米細(xì)胞快速繁殖抗旱植株需要用到植物組織培養(yǎng)技術(shù)．

Answer 1

分析 1、基因工程技術(shù)的基本步驟：
（1）目的基因的獲�。悍椒ㄓ袕幕�因文庫中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成．
（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等．
（3）將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣．將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)�入�?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)�入微生物�?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法．
（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定：分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)．個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．
2、單克隆抗體制備流程：先給小鼠注射特定抗原使之發(fā)生免疫反應(yīng)，之后從小鼠脾臟中獲取已經(jīng)免疫的B淋巴細(xì)胞；誘導(dǎo)B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合，利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞；進(jìn)行抗體檢測(cè)，篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞；進(jìn)行克隆化培養(yǎng)，即用培養(yǎng)基培養(yǎng)和注入小鼠腹腔中培養(yǎng)；最后從培養(yǎng)液或小鼠腹水中獲取單克隆抗體．

解答 解：（1）將胰島素B鏈的第28和29個(gè)氨基酸調(diào)換順序后可獲得速效胰島素．因此，要生產(chǎn)速效胰島素，可采用蛋白質(zhì)工程技術(shù)，這就需要對(duì)胰島素基因進(jìn)行定向改造．將目的基因?qū)�入微生物�?xì)胞常用感受態(tài)細(xì)胞法，即用Ca²⁺處理大腸桿菌細(xì)胞，使之成為易于吸收周圍環(huán)境中DNA分子的感受態(tài)．
（2）科學(xué)家利用人絨毛膜促性腺激素的單克隆抗體，制作出了早早孕試紙．要獲得人絨毛膜促性腺激素的單克隆抗體，需要先將抗原（人絨毛膜促性腺激素）注射到小鼠體內(nèi)，培養(yǎng)一段時(shí)間之后，將從小鼠的脾臟中提取出的B淋巴細(xì)胞和小鼠的骨髓瘤細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞融合，獲得雜交細(xì)胞，雜交細(xì)胞經(jīng)特定培養(yǎng)基培養(yǎng)和抗體檢測(cè)等方法篩選后，就能獲得既能持續(xù)增殖，又能產(chǎn)生人絨毛膜促性腺激素的單克隆抗體的細(xì)胞了．
（3）體外受精前，要對(duì)采集到的精子進(jìn)行獲能處理，才能與卵子受精．受精后形成的受精卵要移入發(fā)育培養(yǎng)液中繼續(xù)培養(yǎng)到4細(xì)胞階段再移植到母親體內(nèi)．早期胚胎發(fā)育到囊胚階段的某一時(shí)刻，會(huì)沖破透明帶，稱之為“孵化”．
（4）基因工程的核心步驟為基因表達(dá)載體的構(gòu)建．將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞最常用的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法．將導(dǎo)入目的基因的玉米細(xì)胞培育成植株需要用到植物組織培養(yǎng)技術(shù)．
故答案為：
（1）胰島素基因     Ca²⁺      感受態(tài)
（2）人絨毛膜促性腺激素      B淋巴細(xì)胞      骨髓瘤細(xì)胞
（3）獲能     發(fā)育培養(yǎng)液     囊胚
（4）基因表達(dá)載體的構(gòu)建    農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法    植物組織培養(yǎng)

點(diǎn)評(píng) 本題考查基因工程、植物組織培養(yǎng)和單克隆抗體的制備等知識(shí)，要求考生識(shí)記基因工程的原理及操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細(xì)節(jié)；識(shí)記植物組織培養(yǎng)技術(shù)的過程及應(yīng)用；識(shí)記單克隆抗體的制備過程，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題．