【題目】引起人類產(chǎn)生埃博拉出血熱的埃博拉病毒(EBOV),是一種單鏈RNA病毒,某研究團(tuán)隊(duì)利用其跨膜表面糖蛋白(GP),以重組腺病毒為載體研發(fā)了埃博拉疫苗。腺病毒是一種DNA病毒,腺病毒載體包括骨架質(zhì)粒(攜帶腺病毒的主要功能基因)和穿梭質(zhì)粒(能轉(zhuǎn)移外源基因到骨架質(zhì)粒上)。下圖為重組埃博拉疫苗制作的部分流程示意圖,已知四種限制性核酸內(nèi)切酶KpnIBamHI、NheI、BgIII的識別序列和酶切位點(diǎn)分別為:。請回答下列問題:

1)為了判斷是否感染EBOV,利用探針對疑似患者進(jìn)行核酸檢測,其檢測方法采用了______技術(shù)。為了提高檢測的準(zhǔn)確性,需從EBOV核酸中選取具有______的序列作為探針設(shè)計(jì)的模板。

2)從EBOV基因組中分離出的GP基因不能直接與穿梭質(zhì)粒重組,其原因是______;而過程①獲得的GP基因片段因兩端缺乏______也不能直接與穿梭質(zhì)粒重組。研究人員在過程①獲得的GP基因片段下游添加了含“-AGATCT-”的序列,則需在其上游添加包含有______序列的片段,以便與穿梭質(zhì)粒重組,且能避免GP基因反向連接。

3)實(shí)際操作中需利用限制酶將環(huán)狀的重組穿梭質(zhì)粒切成兩個(gè)核苷酸片段,則切割前后含有的游離磷酸基團(tuán)數(shù)目變化為______。將含GP基因的核苷酸片段與骨架質(zhì)粒通過過程④完成重組,再在含______的平板上培養(yǎng),篩選出含重組骨架質(zhì)粒的陽性菌。

4)過程⑤中,利用脂質(zhì)體將重組骨架質(zhì)粒導(dǎo)入到人的胚胎腎細(xì)胞HEK293中,其運(yùn)用的原理是______,再將成功導(dǎo)入的細(xì)胞HK293培養(yǎng)一段時(shí)間,獲得大量重組腺病毒,為疫苗的進(jìn)一步研究奠定基礎(chǔ)。

【答案】分子雜交 特異性 GP基因是單鏈RNA結(jié)構(gòu) 相應(yīng)的限制酶酶切位點(diǎn)(或相應(yīng)的限制酶識別序列) -GGTACC- 0→4 卡那霉素 膜的流動(dòng)性

【解析】

基因工程是狹義的遺傳工程,基因工程的基本原理是讓人們感興趣的基因(即目的基因)在宿主細(xì)胞中穩(wěn)定高效地表達(dá)。為了實(shí)現(xiàn)基因工程的目標(biāo),通常要有多種工具酶、目的基因、載體和宿主細(xì)胞等基本要素,并按照一定的程序進(jìn)行操作,它包括目的基因的獲得、重組DNA的形成,重組DNA導(dǎo)入受體細(xì)胞也稱(宿主)細(xì)胞、篩選含有目的基因的受體細(xì)胞和目的基因的表達(dá)等幾個(gè)方面;虮磉_(dá)載體的構(gòu)建(即目的基因與運(yùn)載體結(jié)合)是實(shí)施基因工程的第二步,也是基因工程的核心。

1)為了判斷是否感染EBOV,利用探針(能與病毒的互補(bǔ)配對的序列)對疑似患者進(jìn)行核酸檢測,其檢測方法采用了分子雜交技術(shù)(堿基互補(bǔ)配對)。為了提高檢測的準(zhǔn)確性,需從EBOV核酸中選取具有特異性的序列作為探針設(shè)計(jì)的模板。

2EBOVRNA病毒,從EBOV基因組中分離出的GP基因是單鏈RNA結(jié)構(gòu),不能直接與穿梭質(zhì)粒重組,且過程①獲得的GP基因片段因兩端缺乏相應(yīng)的限制酶酶切位點(diǎn)(或相應(yīng)的限制酶識別序列)也不能直接與穿梭質(zhì)粒重組。質(zhì)粒與目的基因相連,需要有相同的粘性末端,因此需要在目的基因兩端添加酶切位點(diǎn),從圖中可知質(zhì)粒的啟動(dòng)子和終止子之間有三種酶切位點(diǎn)(KpnIBamHIBgIII),“-AGATCT-”的序列是BgIII的識別位點(diǎn),若用BamHI來酶切,會(huì)得到相同的粘性末端,因此只能用KpnI來酶切質(zhì)粒,則需在GP基因上游添加包含有-GGTACC-序列的片段,且能避免GP基因反向連接。

3)實(shí)際操作中需利用限制酶將環(huán)狀的重組穿梭質(zhì)粒切成兩個(gè)核苷酸片段,有兩個(gè)酶切位點(diǎn),一個(gè)酶切位點(diǎn)會(huì)比切割前多出來2個(gè)游離的磷酸基團(tuán),則切割前后含有的游離磷酸基團(tuán)數(shù)目變化為0→4。將含GP基因的核苷酸片段與骨架質(zhì)粒通過過程④完成重組,重組質(zhì)粒含卡那霉素抗性基因,因此需在含卡那霉素的平板上培養(yǎng),篩選出含重組骨架質(zhì)粒的陽性菌。

4)脂質(zhì)體(空心)是由卵磷脂和神經(jīng)酰胺等制得的雙分子層結(jié)構(gòu),過程⑤中,利用脂質(zhì)體將重組骨架質(zhì)粒導(dǎo)入到人的胚胎腎細(xì)胞HEK293中,其運(yùn)用的原理是膜的流動(dòng)性(相似相溶)。

練習(xí)冊系列答案
相關(guān)習(xí)題

科目:高中生物 來源: 題型:

【題目】如圖是tRNA的結(jié)構(gòu)示意圖,圖中a端是3′端,d端是5′端,反密碼子的讀取方向?yàn)椤?/span>3′→5′端”。下列敘述正確的是( )

A.tRNA是由三個(gè)核糖核苷酸連接成的單鏈分子

B.tRNA為雙鏈分子,圖中b處上下鏈之間的堿基通過氫鍵互補(bǔ)配對

C.c處表示密碼子,可以與mRNA堿基互補(bǔ)配對

D.tRNA在翻譯過程中可搬運(yùn)密碼子為ACC的氨基酸

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【題目】已知在同一碳原子上連有兩個(gè)羥基的化合物是極不穩(wěn)定的,它會(huì)自動(dòng)失水生成含醛基的化合物。在無其他氧化劑存在的條件下,以甲苯和氯氣為主要原料按下列過程制取苯甲醛(C6H5CHO):

1)條件2中的試劑為___。

2)寫出苯甲醛與新制Cu(OH)2懸濁液反應(yīng)的化學(xué)方程式:___。

3)苯甲醛在強(qiáng)堿性條件下可發(fā)生自身氧化還原反應(yīng),即部分氧化成羧酸鹽A,部分還原成醇B。寫出A經(jīng)酸化后的產(chǎn)物與B發(fā)生酯化反應(yīng)生成的一種新的化合物C的結(jié)構(gòu)簡式:___。

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科目:高中生物 來源: 題型:

【題目】G常用于有機(jī)合成和藥物制造,一種合成G的路線如圖,請回答相關(guān)問題。

1)根據(jù)系統(tǒng)命名法,A的名稱是___。

2A→B反應(yīng)類型為___D→E反應(yīng)類型為___。

3D分子中官能團(tuán)名稱為___

4C→D反應(yīng)的化學(xué)反應(yīng)方程式為___。

5E→G反應(yīng)的化學(xué)反應(yīng)方程式為___

6)滿足下列條件的E的同分異構(gòu)體還有__種,其中核磁共振氫譜中有五組峰,面積比為22211的同分異構(gòu)體的結(jié)構(gòu)簡式為___。

①與碳酸鈉溶液反應(yīng)有氣體產(chǎn)生②1mol該有機(jī)物與Na反應(yīng)產(chǎn)生1mol氣體

7)已知:CH2=CHCH3CH2=CHCH2Cl

寫出以丙烯為原料制備丙三醇的合成路線流程圖(無機(jī)試劑任用)__。

合成路線流程圖示例如下:

原料產(chǎn)物

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【題目】如圖為“細(xì)胞直接與內(nèi)環(huán)境進(jìn)行物質(zhì)交換”的圖解,其中②④⑤為細(xì)胞外液。相關(guān)敘述中錯(cuò)誤的是(

A.②中可發(fā)生丙酮酸氧化分解,產(chǎn)生二氧化碳和水

B.若某人長期營養(yǎng)不良,會(huì)導(dǎo)致血漿中蛋白質(zhì)含量降低,進(jìn)而使圖中②液體增加,引起組織水腫

C.⑥所處的內(nèi)環(huán)境為血漿

D.某人皮膚燙傷后出現(xiàn)了水泡,主要是指圖中的標(biāo)號②增多的結(jié)果

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科目:高中生物 來源: 題型:

【題目】某濕地生態(tài)系統(tǒng)中,除分解者外,僅有甲、乙、丙、丁、戊5個(gè)種群,調(diào)查得知,該生態(tài)系統(tǒng)有4個(gè)營養(yǎng)級,營養(yǎng)級之間的能量傳遞效率為10%20%,且每個(gè)種群只處于一個(gè)營養(yǎng)級。下表為該生態(tài)系統(tǒng)中一年內(nèi)輸入各種群的能量數(shù)值,表中能量數(shù)值的單位相同,回答下列相關(guān)問題:

種群

能量

3.56

12.8

10.30

0.48

226.50

1)該生態(tài)系統(tǒng)中,處于第二營養(yǎng)級的生物是__________________

2)生態(tài)系統(tǒng)的主要功能包括物質(zhì)循環(huán)、能量流動(dòng)和__________________等功能。碳循環(huán)對生物和生態(tài)系統(tǒng)具有重要意義,碳在無機(jī)環(huán)境和生物群落之間主要以_________________的形式進(jìn)行循環(huán)。

3)該生態(tài)系統(tǒng)通過多年演替,生物多樣性增加,其中蘆葦、菖蒲、堿茅等植物呈散亂、交錯(cuò)分布狀態(tài),從群落的結(jié)構(gòu)角度看,這屬于群落的_________結(jié)構(gòu)。這樣的分布給該濕地生態(tài)系統(tǒng)增添了旅游觀光等多方面的資源,體現(xiàn)了生物多樣性的__________價(jià)值。

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【題目】在恢復(fù)靜息電位過程中,圖所示的鈉鉀泵會(huì)參與對兩種離子的轉(zhuǎn)運(yùn)過程,下列說法錯(cuò)誤的是(

A.圖中膜電位形成的主要原因是K+A側(cè)到B側(cè)移動(dòng)造成的

B.鈉鉀泵吸K+Na+的過程屬于主動(dòng)運(yùn)輸

C.血鈉不足時(shí),會(huì)引起腦組織水腫,產(chǎn)生頭痛等癥狀

D.神經(jīng)細(xì)胞受到刺激產(chǎn)生興奮,主要是由于Na+A側(cè)到B側(cè)引起膜電位改變

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【題目】下圖為一種新型高效農(nóng)業(yè)生態(tài)循環(huán)系統(tǒng),其中包含了農(nóng)田生產(chǎn)系統(tǒng)、大耳羊養(yǎng)殖系統(tǒng)苗木蔬菜種植系統(tǒng)和特種生態(tài)養(yǎng)殖系統(tǒng),解決了現(xiàn)有農(nóng)業(yè)生產(chǎn)附加值低、農(nóng)民收入不高,以及禽畜養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展過程中帶來環(huán)境污染問題。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是(

A.常溫厭氧沼氣池和恒壓沼氣池中的甲烷菌在無氧條件下才可以將有機(jī)廢物轉(zhuǎn)化成有用的甲烷,無氧呼吸在人和動(dòng)物的腸道微生物中也能發(fā)生

B.設(shè)計(jì)該農(nóng)業(yè)生態(tài)系統(tǒng)時(shí),應(yīng)運(yùn)用的生態(tài)工程原理有物質(zhì)循環(huán)再生、整體性、系統(tǒng)學(xué)和工程學(xué)原理等

C.大耳羊養(yǎng)殖場產(chǎn)生的糞渣可作為苗木和果樹的有機(jī)肥料,既能改善土壤結(jié)構(gòu)、提高土壤肥力,又能被微生物分解,所釋放二氧化碳可促進(jìn)果木的光合作用

D.人類通過建立新型高效農(nóng)業(yè)生態(tài)循環(huán)系統(tǒng),調(diào)整了能量流動(dòng)關(guān)系提高了生態(tài)系統(tǒng)的能量傳遞效率,使能量盡可能多地流向?qū)θ祟愖钣幸娴牟糠?/span>

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科目:高中生物 來源: 題型:

【題目】如圖是人體組織細(xì)胞的新陳代謝與四大系統(tǒng)(A、B、C、D表示四大系統(tǒng))關(guān)系的模式圖,據(jù)圖回答問題:

(1)A為________系統(tǒng),A中物質(zhì)進(jìn)入B的過程稱________。

(2)外界物質(zhì)經(jīng)C進(jìn)入B的方式是________,B中的氧氣進(jìn)入組織細(xì)胞被利用的場所是________

(3)可在B內(nèi)流動(dòng)但不能進(jìn)入D的是________,若最終在D中檢測出有葡萄糖則原因可能是一次性吃糖太多或________分泌不足。

(4)經(jīng)D排出的最終成分除了尿素外,還有多余的________,除該途徑外,排出代謝廢物的器官還有________、________

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