Question

【題目】萌發(fā)的大麥種子中存在著兩種淀粉酶：α 淀粉酶和α 淀粉酶。α 淀粉酶耐熱不耐酸；β 淀粉酶耐 酸不耐熱，70 ℃處理 15 min 即變性失活。為測定萌發(fā)種子中 α 淀粉酶和 β 淀粉酶活性的差異，將發(fā)芽 3 天的大麥種子加蒸餾水研磨勻漿、離心取上清液得到淀粉酶提取液，進行如下實驗。

操作步驟		1號試管	2號試管	3號試管
①	加淀粉酶提取液	1mL	1mL	1mL
②	預(yù)處理	70℃恒溫水浴15min， 取出冰浴中冷卻	高溫使α 淀粉酶 和α 淀粉酶失活	不處理
③	加緩沖液	2mL	2mL	2mL
④	預(yù)保溫	40℃恒溫水浴lOmin
⑤	加40℃預(yù)熱的 淀粉溶液	2mL	2mL	2mL
⑥	保溫	40℃恒溫水浴5min
⑦	測定	加入試劑5065℃水浴5min，測定磚紅色沉淀物的量

回答下列問題：

(1)步驟⑦中加入的試劑 X 為______。

(2)上述實驗操作步驟中，步驟②中對 1 號試管進行操作的目的是_____；為達(dá)成實驗?zāi)康模�設(shè)置的 1、2、3 號試管中，為對照組的一組是______號試管。

(3)通過上述實驗，能大致比較萌發(fā) 3 天時種子的 α-淀粉酶和 β-淀粉酶活性的大小。比較的方法 是______。

Answer 1

【答案】斐林試劑 使β-淀粉酶變性失活 2 測定各試管沉淀物的量，1、2號試管的差值代表α-淀粉酶的活性，3、1號試管的差值代表β-淀粉酶的活性，差值大的表示該酶的活性大

【解析】

本實驗的目的是測定萌發(fā)種子中α-淀粉酶和β-淀粉酶活性的差異；萌發(fā)的大麥種子中存在著兩種淀粉酶：α-淀粉酶和β-淀粉酶。α-淀粉酶耐熱不耐酸；β-淀粉酶耐酸不耐熱，70℃

處理15min即變性失活。若測定大麥種子中α-淀粉酶催化效率，因此要根據(jù)β-淀粉酶不耐熱，在70℃15min后失活的特性排除β-淀粉酶的干擾。淀粉酶能將淀粉水解成還原糖，而還原糖可以用斐林試劑進行鑒定。

（1）本實驗的目的是測定萌發(fā)種子中α-淀粉酶和β-淀粉酶活性的差異，淀粉酶分解淀粉為還原糖，還原糖可以用斐林試劑進行鑒定，步驟⑦中加入的試劑X為斐林試劑。

（2）β-淀粉酶耐酸不耐熱，70℃處理15min即變性失活。上述實驗操作步驟中，步驟②中對1號試管進行操作的目的是使β-淀粉酶變性失活，測定大麥種子中α-淀粉酶催化效率，為達(dá)成實驗?zāi)康�，設(shè)置的1、2、3號試管中，為對照組的一組是2號試管（2號試管α-淀粉酶和β-淀粉酶均失活，不能將淀粉變?yōu)檫�原糖，2號和1號對比能測定α-淀粉酶催化效率）。

（3）通過上述實驗，可以測定各試管沉淀物的量，1、2號試管的差值代表α-淀粉酶的活性，3、1號試管的差值代表β-淀粉酶的活性，差值大的表示該酶的活性大，從而能大致比較萌發(fā)3天時種子的α-淀粉酶和β-淀粉酶活性的大小。