Question

【題目】金屬硫蛋白（MT）是一類廣泛存在的金屬結合蛋白，某研究小組計劃通過PCR技術擴增獲得目的基因，構建轉基因工程菌，用于重金屬廢水的凈化處理。PCR擴增過程示意圖如下，引物1和引物2分別與MT基因兩端的序列互補。下列表述正確的是

A. 引物1和引物2的序列相同，且序列已知

B. 步驟1需要解旋酶，步驟2需要耐高溫的DNA聚合酶，步驟3需要DNA連接酶

C. n個循環(huán)后，擴增出的所需要的目的基因的分子數是2n

D. 為方便構建重組質粒，可在引物中設計適當的限制性核酸內切酶位點

Answer 1

【答案】D

【解析】

PCR全稱為聚合酶鏈式反應，是一項在生物體外復制特定的DNA片段的核酸合成技術，利用的原理是DNA復制，需要條件有模板DNA、四種脫氧核苷酸、一對引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶），過程包括：①高溫變性：DNA解旋過程，高溫條件下氫鍵可自動解開；②低溫退火：引物結合到互補鏈DNA上；③中溫延伸：合成子鏈；據圖分析，圖中步驟1、2、3分別代表變性、退火、延伸，據此分析。

A. PCR中，根據一段模板DNA序列，設計互補的寡核苷酸鏈做引物，故引物1和引物2的序列不相同，A錯誤；

B. PCR的第一步是加熱高溫DNA變性，也就是DNA的解旋，因為有高溫破壞氫鍵，所以無須解旋酶的參與，故步驟1需要解旋酶，PCR不需要DNA連接酶，B錯誤；

C. n個循環(huán)后，擴增出的DNA分子數是為2n個，但符合需要的目的基因的分子數少于2n個，C錯誤；

D. 獲得目的基因后一般需要將目的基因連接到質粒上，因此在引物中設計適當的限制性核酸內切酶位點可以使后續(xù)的連接過程簡單、可控，D正確。