Question

【題目】甲型H1N1流感是一種急性呼吸道傳染病，其病原體甲型H1N1流感病毒是一種RNA病毒。針對甲型H1N1流感病毒的預防和治療，科研人員設(shè)計了相應地兩種技術(shù)路線，分別如圖1、圖2所示。據(jù)圖分析回答下列問題：

（1）甲型H1N1流感病毒表面有一種特征性蛋白質(zhì)A，適合作為疫苗的有效成分。通過基因工程的方法制備含蛋白質(zhì)A的疫苗的過程如圖1所示。其中過程①代表的是___________，過程③構(gòu)建A基因重組載體時，應在目的基因（A基因）前后插入___________，從而保證目的基因的準確表達。

（2）甲型H1N1流感病毒表面還有一種特征性蛋白質(zhì)B，制備抗蛋白B的單克隆抗體過程如圖2所示。該過程中首先需要獲得B淋巴細胞和骨髓瘤細胞，請根據(jù)圖示寫出獲得B淋巴細胞的方法：___________。細胞融合時常用的促融劑是______________________。

（3）HAT培養(yǎng)基的作用是經(jīng)選擇性培養(yǎng)篩選出___________細胞，之后還需要進行___________和抗體檢測，經(jīng)多次篩選，就可獲得具備___________特點的雜交瘤細胞。

Answer 1

【答案】逆轉(zhuǎn)錄 啟動子和終止子 向小鼠體內(nèi)注入蛋白質(zhì)B，再從產(chǎn)生免疫反應小鼠的脾臟中獲得B淋巴細胞 聚乙二醇（PEG） 雜交瘤 克隆化培養(yǎng) 能無限增殖，又能分泌抗蛋白B抗體

【解析】

單克隆抗體是由單一B細胞克隆產(chǎn)生的高度均一、僅針對某一特定抗原表位的抗體。通常采用雜交瘤技術(shù)來制備，雜交瘤抗體技術(shù)是在細胞融合技術(shù)的基礎(chǔ)上，將具有分泌特異性抗體能力的B細胞和具有無限繁殖能力的骨髓瘤細胞融合為B細胞雜交瘤。

（1）該病毒是RNA病毒，要先逆轉(zhuǎn)錄成DNA片段才能表達出相應的蛋白質(zhì)，①代表逆轉(zhuǎn)錄。有RNA逆轉(zhuǎn)錄的DNA片段可能沒有啟動子和終止子，所以要在DNA片段前后添加啟動子和終止子。

（2）單克隆抗體制備過程中要在小鼠體內(nèi)注入相對應的抗原物質(zhì)B，然后分離B淋巴細胞，與骨髓瘤細胞融合。細胞融合用的化學試劑是聚乙二醇（PEG）。

（3）單克隆抗體制備時要篩選出產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細胞。這種雜交瘤細胞既可以無限增殖又可以產(chǎn)生相應抗體。通過克隆化培養(yǎng)這種細胞就可以獲得大量單一抗體。