Question

【題目】回答有關(guān)現(xiàn)代生物技術(shù)的問題

乙肝是由乙型肝炎病毒（HBV）引起的一種慢性傳染病，主要采用基因工程乙肝疫苗進(jìn)行防治�？蒲腥藛T采用轉(zhuǎn)基因技術(shù)將乙肝病毒表面抗原（HBsAg）基因片段導(dǎo)入酵母細(xì)胞或中國倉鼠卵巢細(xì)胞（CHO），讓重組后的酵母或CHO細(xì)胞在體外培養(yǎng)過程中產(chǎn)生HBsAg，將其分離、提純之后制成乙肝疫苗，部分生產(chǎn)過程如圖。

（1）下列①～④表示獲得重組CHO細(xì)胞的步驟，其中步驟④是______；①-④步驟的正確排序是______。

①重組DNA分子導(dǎo)入CHO細(xì)胞

②篩選成功導(dǎo)入HBsAg基因的CHO細(xì)胞

③人工合成HBsAg基因

④______

（2）大量培養(yǎng)重組酵母和重組CHO細(xì)胞生產(chǎn)乙肝疫苗過程中，需將培養(yǎng)液中HBsAg與其他雜質(zhì)分離，可采用的方法是______（多選）。

A．破碎細(xì)胞 B．加入硫酸銨 C．改變pH D．冷凍干燥

（3）利用重組酵母和重組CHO細(xì)胞生產(chǎn)乙肝疫苗，分別屬于生物工程中的______、______領(lǐng)域。

（4）利用重組CHO細(xì)胞和重組酵母生產(chǎn)基因工程乙肝疫苗，目前都在進(jìn)行規(guī)�；�生產(chǎn)，但兩種方法各有不足和優(yōu)勢。請在下列選項中選擇合適的編號填入表對應(yīng)的空格中，以表示你對此問題的分析（編號可重復(fù)選用）：

①結(jié)構(gòu)簡單、遺傳操作較為容易

②表達(dá)的HBsAg更接近天然形式，疫苗穩(wěn)定性好

③表達(dá)的HBsAg與天然形式存在差異

④培養(yǎng)條件要求高，生產(chǎn)成本較高

⑤可將HBsAg分泌到胞外，易于分離提純

⑥易于培養(yǎng)、繁殖迅速，生產(chǎn)成本較低

	利用重組酵母細(xì)胞 生產(chǎn)乙肝疫苗	利用重組CHO細(xì)胞 生產(chǎn)乙肝疫苗
優(yōu)勢	______	______
不足	______	______

Answer 1

【答案】HBsAg基因與運(yùn)載體的連接 ③④①② HBsAg基因與運(yùn)載體的連接 BC 發(fā)酵工程 細(xì)胞工程 ①⑤⑥ ②⑤ ③ ④

【解析】

基因工程的基本步驟包括目的基因的獲取、構(gòu)建基因表達(dá)載體（核心步驟）、將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞、目的基因的檢測與鑒定。據(jù)圖分析，圖示是利用基因工程技術(shù)將目的基因（HBsAg）分別導(dǎo)入酵母菌細(xì)胞和動物細(xì)胞（倉鼠卵巢細(xì)胞），讓微生物細(xì)胞或動物細(xì)胞生產(chǎn)HBsAg的過程；將目的基因?qū)�入微生物�?xì)胞常用鈣離子處理使其成為感受態(tài)細(xì)胞，以便目的基因的導(dǎo)入；將目的基因?qū)�入動物�?xì)胞常用顯微注射法。

（1）根據(jù)以上分析已知，基因工程技術(shù)的基本步驟是：目的基因的獲取、基因表達(dá)載體的構(gòu)建、將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞、目的基因的檢測與鑒定，因此步驟④是HBsAg基因與運(yùn)載體的連接，且題中四個步驟的正確順序是③④①②。

（2）大量培養(yǎng)重組酵母和重組CHO細(xì)胞生產(chǎn)乙肝疫苗過程中，需將培養(yǎng)液中HBsAg與其他雜質(zhì)分離，可采用的方法是加入硫酸銨或改變pH，故選BC。

（3）利用重組酵母生產(chǎn)乙肝疫苗，利用了生物工程中的發(fā)酵工程技術(shù)，利用重組CHO細(xì)胞生產(chǎn)乙肝疫苗，利用了動物細(xì)胞工程中的動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)。

（4）利用重組酵母細(xì)胞生產(chǎn)乙肝疫苗的優(yōu)勢在于①結(jié)構(gòu)簡單、遺傳操作較為容易；⑤可將HBsAg分泌到胞外，易于分離提純；⑥易于培養(yǎng)、繁殖迅速，生產(chǎn)成本較低，而不足在于③表達(dá)的HBsAg與天然形式存在差異。利用重組CHO細(xì)胞生產(chǎn)乙肝疫苗的優(yōu)點(diǎn)在于②表達(dá)的HBsAg更接近天然形式，疫苗穩(wěn)定性好；⑤可將HBsAg分泌到胞外，易于分離提純，但是缺點(diǎn)在于④培養(yǎng)條件要求高，生產(chǎn)成本較高。