Question

P5CS是植物合成脯氨酸的關鍵酶，脯氨酸有助于植物抵御干旱．下圖是將P5CS基因轉(zhuǎn)入煙草細胞獲得耐旱煙草植株過程的示意圖．

請回答：
（1）要將P5CS基因成功插入Ti質(zhì)粒中，Ti質(zhì)粒的

 

中應含有HindⅢ、SalⅠ限制酶切割位點．③過程需在農(nóng)桿菌的培養(yǎng)基中添加

 

才能篩選出含P5CS基因的Ti質(zhì)粒的農(nóng)桿菌．
（2）檢測P5CS基因是否整合到煙草細胞染色體DNA上，采用

 

技術，轉(zhuǎn)基因是否成功可以直接在個體水平上對轉(zhuǎn)基因植物與非轉(zhuǎn)基因植物的

 

性能進行比較．
（3）將轉(zhuǎn)入P5CS基因的煙草細胞培育成完整的植株需要用

 

技術，愈傷組織通過

 

發(fā)育成完整植株，此過程除營養(yǎng)物質(zhì)外還必須向培養(yǎng)基中添加

 

．

Answer 1

考點：基因工程的原理及技術,植物培養(yǎng)的條件及過程

專題：

分析：分析題圖：圖示是將P5CS基因轉(zhuǎn)入煙草細胞獲得耐旱煙草植株過程的示意圖，其中①表示基因表達載體的構建過程；②表示將目的基因?qū)�入農(nóng)桿菌細胞；③表示目的基因隨著農(nóng)桿菌的增殖而擴增；④表示脫分化過程；⑤表示再分化過程；⑥⑦表示個體發(fā)育過程．

解答： 解：（1）由圖可知，目的基因前有HindⅢ限制酶切割位點，后有SalⅠ限制酶切割位點，因此要將P5CS基因成功插入Ti質(zhì)粒中，Ti質(zhì)粒的T-DNA中應含有HindⅢ、SalⅠ限制酶切割位點．由圖可知，標記基因是四環(huán)素抗性基因，因此③過程需在農(nóng)桿菌的培養(yǎng)基中添加四環(huán)素才能篩選出含P5CS基因的Ti質(zhì)粒的農(nóng)桿菌．
（2）檢測目的基因是否整合到煙草細胞染色體DNA上，采用DNA分子雜交技術；轉(zhuǎn)基因是否成功可以直接在個體水平上對轉(zhuǎn)基因植物與非轉(zhuǎn)基因植物的抗旱（或耐旱）性能進行比較．
（3）將轉(zhuǎn)基因煙草細胞培育成完整的植株還需采用植物組織培養(yǎng)技術，該技術包括脫分化和再分化兩個重要的步驟，即轉(zhuǎn)基因煙草細胞首先經(jīng)過脫分化過程形成愈傷組織，愈傷組織再經(jīng)過再分化發(fā)育成完整植株；決定脫分化和再分化的關鍵因素是植物激素的種類和比例，尤其是生長素和細胞分裂素．
故答案為：
（1）T-DNA        四環(huán)素
（2）DNA分子雜交    抗旱/耐旱
（3）植物組織培養(yǎng)　   再分化（細胞增殖和分化）　 植物激素（生長素和細胞分裂素）

點評：本題結合將P5CS基因轉(zhuǎn)入煙草細胞獲得耐旱煙草植株過程的示意圖，考查基因工程和細胞工程的相關知識，要求考生識記基因工程的原理及操作步驟；識記植物組織培養(yǎng)的過程及相關應用，能正確分析題圖，并能從中提取有效信息準確答題．