Question

20．國家飲用水標準規(guī)定，每升飲用水中大腸桿菌不超過3個．某小組欲通過實驗來檢測自來水中大腸桿菌的含量，已知大腸桿菌在伊紅-美藍培養(yǎng)基培養(yǎng)，大腸桿菌菌落呈深紫色．請根據下列有關實驗步驟回答問題．
（1）配制培養(yǎng)基：配制伊紅-美藍培養(yǎng)基時，除蛋白胨、乳糖、伊紅、美藍等原料外，還需要水、無機鹽和瓊脂．在這些成分中，能為大腸桿菌提供氮源的是蛋白胨．攪拌加熱至完全溶解后調節(jié)pH，分裝到錐形瓶．
（2）倒平板：配制好的培養(yǎng)基用高壓蒸汽滅菌法滅菌后，待培養(yǎng)基冷卻到50℃左右倒平板．平板冷凝后應將平板倒過來（倒置）放置，以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基．
（3）接種：在如圖的系列稀釋操作中（10¹、10²、10³表示稀釋倍數(shù)），依次將1mL液體移入下一個盛有9mL蒸餾水的試管中．過程a所用的接種方法為（稀釋）涂布平板法．
（4）觀察與計數(shù)：通過一段時間的培養(yǎng)，觀察統(tǒng)計培養(yǎng)皿表面深紫色菌落的數(shù)目，結果如圖所示，則自來水樣本中大腸桿菌超標1000萬倍．

Answer 1

分析 培養(yǎng)基根據物理性質可分為固體培養(yǎng)基和液體培養(yǎng)基，培養(yǎng)基的基本營養(yǎng)成分有碳源、氮源、無機鹽、水等成分；滅菌和消毒的主要區(qū)別是：消毒是指使用較為溫和的物理或化學方法反殺死物體表面或內部一部分對人體有害的微生物（不包括芽孢和孢子）；滅菌則是指使用強烈的理化因素殺死物體內外所有的微生物，包括芽孢和孢子．

解答 解：（1）該培養(yǎng)基為固體培養(yǎng)基，故要加入凝固劑瓊脂，培養(yǎng)基的基本營養(yǎng)成分有碳源、氮源、無機鹽、水等成分，能為大腸桿菌提供氮源的是蛋白胨，溶解后還要調節(jié)PH值，再分裝到錐形瓶中．
（2）配制好的培養(yǎng)基用高壓蒸汽滅菌法滅菌后，待培養(yǎng)基冷卻到50℃左右倒平板．等待平板冷卻凝固（大約需5～10min）后，將平板倒過來放置，使皿蓋在下，皿底在上，防止水蒸氣凝結的小水滴污染培養(yǎng)基．
（3）系列稀釋操作中，依次將1mL液體移人下一個盛有9mL蒸餾水的試管中，使?jié)舛日�好為原來的十分之一．由題圖可知，圖中顯示的接種方法a是稀釋涂布平板法
（4）根據題圖估算自來水中大腸桿菌的菌落數(shù)是3÷0.1×10³×10³=3×10⁷個/L，超標1000萬倍．
故答案為：
（1）瓊脂　蛋白胨　pH　
（2）高壓蒸汽滅菌　倒過來（倒置）
（3）9　（稀釋）涂布平板法　
（4）1000

點評 本題考查了微生物的培養(yǎng)和數(shù)量測定的相關內容，意在考查學生的應用和實驗探究能力，試題難度一般．