Question

4．表是一種培養(yǎng)基的配方，請回答：

牛肉膏	蛋白胨	NaCl	瓊脂	水
0.5g	1g	0.5g	2g	200ml

（1）培養(yǎng)基從物理性質(zhì)來說，屬于固體培養(yǎng)基．
（2）無菌操作是微生物培養(yǎng)最基本的要求，其中滅菌指的是用強烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所有的微生物，包括芽孢和孢子．對于培養(yǎng)基、培養(yǎng)皿、接種環(huán)、實驗操作者的雙手、空氣、牛奶所采用的滅菌和消毒方法依次是⑤③②①④⑥．（填代號）
①化學消毒 ②灼燒滅菌 ③干熱滅菌 ④紫外線滅菌 ⑤高壓蒸汽滅菌 ⑥巴氏消毒法
（3）在平板劃線法中，每次灼燒接種環(huán)的目的殺死上一次劃線結(jié)束后殘留在接種環(huán)上的菌種；
（4）稀釋涂布平板法統(tǒng)計菌落數(shù)目時，一般選擇菌落數(shù)在30-300的平板進行計數(shù)，在某一稀釋度下平板上的平均菌落數(shù)為50個，所用稀釋液的體積為0.2ml，稀釋倍數(shù)為10⁵時，則每毫升樣品中的菌落數(shù)為2.5×10⁷．
（5）以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，培養(yǎng)某種細菌后，如果pH升高，指示劑將變紅，利用這一特點，可準確地鑒定該種細菌能夠分解尿素．

Answer 1

分析 1、消毒和滅菌：
滅菌是指使用強烈的理化因素殺死物體內(nèi)外一切微生物的細胞、芽孢和孢子的過程；常用的方法有灼燒滅菌、干熱滅菌和高壓蒸汽滅菌．
消毒是指用較為溫和的物理或化學方法僅殺死物體體表或內(nèi)部的一部分微生物的過程；常用的方法有煮沸消毒法、巴氏消毒法、紫外線或化學藥物消毒法等．
2、培養(yǎng)基按其物理狀態(tài)可分為固體培養(yǎng)基、液體培養(yǎng)基和半固體培養(yǎng)基三類．
3、常用的固體培養(yǎng)基上的接種方法有稀釋涂布平板法和平板劃線法，稀釋涂布平板法可以用來進行微生物的計數(shù)．酚紅指示劑可以鑒定尿素分解菌．

解答 解：（1）固體培養(yǎng)基與液體培養(yǎng)基的區(qū)別就是固體培養(yǎng)基中含有凝固劑瓊脂，表中的培養(yǎng)基配方中含有瓊脂，所以是固體培養(yǎng)基．
（2）滅菌是指使用強烈的理化因素殺死物體內(nèi)外一切微生物的細胞、芽孢和孢子的過程．高壓蒸汽滅菌適用于對一般培養(yǎng)基和玻璃器皿的滅菌．干熱滅菌適用于需要保持干燥的空玻璃器皿的滅菌，凡帶有橡膠的物品和培養(yǎng)基，都不能進行干熱滅菌．無菌室緩沖間和接種箱常用紫外線燈作空氣滅菌．微生物接種時的金屬接種工具和試管口可以用灼燒滅菌．煮沸滅菌通常不能徹底殺滅一些微生物的孢子和芽孢，一般適用于餐具或不耐高溫的食品等的消毒，巴氏消毒法適合對牛奶消毒．所以題中所給的項目所采用的滅菌和消毒方法依次是⑤③②①④⑥．
（3）在平板劃線法中，每次灼燒接種環(huán)的目的殺死上一次劃線結(jié)束后殘留在接種環(huán)上的菌種，使下一次劃線的菌種來自上一次劃線的末端．
（4）稀釋涂布平板法可以用來進行微生物的計數(shù)，一般選擇菌落數(shù)在30～300的平板進行計數(shù)．每毫升樣品中的菌落數(shù)為50÷0.2×10⁵=2.5×10⁷．
（5）尿素分解菌產(chǎn)生的脲酶可以將尿素分解為氨使pH升高，從而使酚紅指示劑呈紅色，利用這一特點，可準確地鑒定該種細菌能夠分解尿素．
故答案為：
（1）固體
（2）用強烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所有的微生物，包括芽孢和孢子                 ⑤③②①④⑥
（3）殺死上一次劃線結(jié)束后殘留在接種環(huán)上的菌種
（4）30-300      2.5×10⁷
（5）酚紅     變紅

點評 本題主要考查微生物實驗過程的消毒、滅菌、接種方法、計數(shù)等知識，意在強化學生相關(guān)知識點的識記與理解．