Question

9．圖1為某種質(zhì)粒簡圖，圖2表示某外源DNA上的目的基因，小箭頭所指分別為限制性核酸內(nèi)切酶EcoRⅠ、BamHⅠ、HindⅢ的酶切位點(diǎn)．下列有關(guān)敘述錯誤的是（　�。�

• A． 如果用EcoRⅠ對外源DNA和質(zhì)粒進(jìn)行酶切，將多個含有目的基因的DNA片段與多個質(zhì)粒的酶切產(chǎn)物用DNA連接酶進(jìn)行連接后，兩兩連接所形成的產(chǎn)物有三種
• B． 如果將一個外源DNA分子和一個質(zhì)粒分別用EcoRⅠ酶切后，再用DNA連接酶連接，形成一個含有目的基因的重組DNA，此重組DNA中EcoRⅠ酶切點(diǎn)有1個
• C． 為了防止質(zhì)粒和含目的基因的外源DNA片段自身環(huán)化，酶切時應(yīng)使用BamHⅠ和HindⅢ兩種限制酶同時處理
• D． 一個圖1所示的質(zhì)粒分子經(jīng)EcoRⅠ切割后，含有2個游離的磷酸基團(tuán)

Answer 1

分析 1、將含有目的基因的DNA與質(zhì)粒表達(dá)載體分別用EcoRⅠ酶切，酶切產(chǎn)物用DNA連接酶進(jìn)行連接后，其中由兩個DNA片段之間連接形成的產(chǎn)物有（目的基因與目的基因 ）、（目的基因與載體）、（載體和載體）三種．若要從這些連接產(chǎn)物中分離出重組質(zhì)粒，需要對這些連接產(chǎn)物進(jìn)行分離純化．
2、將目的基因?qū)�入微生物�?xì)胞．原核生物作為受體細(xì)胞的原因是繁殖快、多為單細(xì)胞、遺傳物質(zhì)相對較少，最常用的原核細(xì)胞是大腸桿菌，其轉(zhuǎn)化方法是：先用Ca²⁺處理細(xì)胞，使其成為感受態(tài)細(xì)胞，再將重組表達(dá)載體DNA分子溶于緩沖液中與感受態(tài)細(xì)胞混合，在一定的溫度下促進(jìn)感受態(tài)細(xì)胞吸收DNA分子，完成轉(zhuǎn)化過程．

解答 解：A、如果用EcoRI對外源DNA和質(zhì)粒進(jìn)行酶切，將多個含有目的基因的DNA片段與多個質(zhì)粒的酶切產(chǎn)物用DNA連接酶進(jìn)行連接后，兩兩連接所形成的產(chǎn)物有目的基因和載體連接物、載體和載體連接物、目的基因和目的基因連接物三種，A正確；
B、若將一個外源DNA分子和一個質(zhì)粒分別用EcoRⅠ酶切后再用DNA連接酶連接，則形成的重組DNA中，目的基因兩端應(yīng)各含1個EcoRⅠ酶切位點(diǎn)，B錯誤；
C、為了防止質(zhì)粒和含目的基因的外源DNA片段自身環(huán)化，酶切時應(yīng)使用BamHⅠ和HindⅢ兩種限制酶同時處理，C正確；
D、一個圖1所示的質(zhì)粒分子經(jīng)EcoRⅠ切割后，含有2個游離的磷酸基團(tuán)，D正確．
故選：B．

點(diǎn)評 本題考查基因工程的相關(guān)知識，意在考查考生能運(yùn)用所學(xué)知識與觀點(diǎn)，通過比較、分析與綜合等方法對某些生物學(xué)問題進(jìn)行解釋、推理，做出合理的判斷或的能力．